Siirry sisältöön
HT55
Kudos
Peräsuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
HT55

Asiakirjat

HT55

Cell line · Tuotenumero 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HT55 on ihmisen peräsuolen adenokarsinooman solulinja, joka on peräisin 54-vuotiaan valkoihoisen naisen primaarisesta peräsuolikasvaimesta. Solulinja kasvaa kiinnittyvänä yksikerroksena, jonka morfologia muistuttaa epiteeliä. HT55-solulinjassa on useita heterotsygoottisia ja homotsygoottisia funktionaalisen menetyksen mutaatioita APC-kasvainsuppressorigeenissä (adenomatoottinen polypoosi coli), mukaan lukien p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ja p.Lys241Ter (kaikki heterotsygoottisia) sekä homotsygoottisen p.Arg213Leu-substituution. Tämä mutaatioprofiili tekee HT55:stä biologisesti merkittävän mallin APC:n ohjaamasta kolorektaalisen syövän syntymisestä, mikä heijastaa kanonisen WNT-signaalireitin säätelyhäiriötä, joka ohjaa suurinta osaa ihmisen kolorektaalisista syövistä.

HT55-linjaa käytetään laajalti kolorektaalisyövän tutkimuksessa WNT/β-kateniini-signaloinnin, APC-kasvainsuppressorigeenin toiminnan, lääkeherkkyyden ja -resistenssin tutkimuksissa sekä WNT-signalointireitin komponentteihin kohdistuvien lääkeaineiden prekliinisessä arvioinnissa. Kanta soveltuu in vitro -farmakologisiin määrityksiin ja ksenotransplantaattitutkimuksiin immuunipuutteisissa hiirimalleissa, ja se tarjoaa kiinnittyvän, helposti käsiteltävän in vitro -alustan kolorektaalisyövän mekanistiseen ja translaationaaliseen tutkimukseen. Useiden APC-trunkaatiomutaatioiden läsnäolo tekee HT55:stä edustavan esimerkin mikrosatelliittivakaasta, kromosomaalisesti epävakaasta paksusuolisyövän alatyypistä, jota yleisesti ajaa eteenpäin APC:n toimintahäiriö.

Kudos
Peräsuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Sovellukset
Paksusuolen ja peräsuolen syövän tutkimus; WNT/APC-signaalireitin tutkimukset; lääkeherkkyys- ja resistenssitestaus; prekliininen onkologia; ksenotransplantaattimallit; kohdennetun hoidon arviointi
Synonyymit
  • HT55

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Kaksinkertaistumisaika
28 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HT55 (Cytion-tuotenumero 305018)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: p.Gln1131Ter, heterotsygootti; Mutaatio: p.Gln1303Ter, heterotsygootti; Mutaatio: p.Arg1463Ser, heterotsygootti; Mutaatio: p.Asn581Tyr, heterotsygootti; Mutaatio: p.Lys241Ter, heterotsygootti; Mutaatio: p.Arg213Leu, homotsygootti

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha elatusaine kiinnittyneistä soluista ja huuhtele ne kalsiumia ja magnesiumia sisältämättömällä PBS-liuoksella. Käytä T25-pulloihin 3–5 ml PBS-liuosta ja T75-pulloihin 5–10 ml. Peitä solut sitten kokonaan Accutase-liuoksella; käytä 1–2 ml T25-pulloihin ja 2,5 ml T75-pulloihin. Anna solujen inkuboida huoneenlämmössä 8–10 minuuttia, jotta ne irtoavat. Inkuboinnin jälkeen sekoita soluja varovasti 10 ml:n kanssa elatusainetta niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoi sitten 300×g:ssa 3 minuuttia. Hävitä supernatantti, resuspendoi solut tuoreeseen elatusaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, joissa on jo tuoretta elatusainetta.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 päivän välein
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
54 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen