HT55

A HT55 é uma linhagem celular de adenocarcinoma retal humano estabelecida a partir do tumor retal primário de uma mulher caucasiana de 54 anos. A linhagem cresce na forma de uma monocamada aderente com morfologia semelhante à epitelial. A HT55 apresenta múltiplas mutações heterozigotas e homozigotas com perda de função no gene supressor de tumor APC (polipose adenomatosa coli), incluindo p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr e p.Lys241Ter (todas heterozigotas), bem como uma substituição homozigótica p.Arg213Leu. Esse perfil mutacional torna o HT55 um modelo biologicamente relevante da carcinogênese colorretal induzida pelo APC, refletindo a desregulação da via WNT canônica que está na origem da maioria dos cânceres colorretais humanos.

A HT55 é amplamente utilizada na pesquisa do câncer colorretal para estudos da sinalização WNT/β-catenina, da função supressora de tumor da APC, da sensibilidade e resistência a medicamentos e da avaliação pré-clínica de agentes direcionados contra componentes da via WNT. A linhagem é adequada para ensaios farmacológicos in vitro e estudos de xenoenxertos em modelos de camundongos imunocomprometidos, proporcionando uma plataforma in vitro aderente e maleável para pesquisas mecanísticas e translacionais sobre o câncer colorretal. A presença de múltiplas mutações de truncamento do APC torna a HT55 representativa do subtipo de câncer colorretal com estabilidade de microssatélites e instabilidade cromossômica, comumente impulsionado pela perda de função do APC.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.