Ga naar de inhoud
WIL2
Weefsel
Milt
Ziekte
Erfelijke sferocytose
Synoniemen
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

Documenten

WIL2

Cell line · Productnummer 302011

Wil2 is een menselijke B-lymfoblastoïde cellijn die is afgeleid van B-lymfocyten uit het perifere bloed van een volwassen donor en vervolgens onsterfelijk is gemaakt door middel van Epstein–Bar...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Wil2 is een menselijke B-lymfoblastoïde cellijn die is afgeleid van B-lymfocyten uit het perifere bloed van een volwassen donor en vervolgens onsterfelijk is gemaakt door transformatie met het Epstein-Barr-virus (EBV). Als EBV-positieve suspensiecellijn vertoont Wil2 kenmerkende eigenschappen van geactiveerde B-cellen, waaronder continue proliferatie, expressie van B-celoppervlaktemarkers en het vermogen tot immunoglobulinesynthese. De cellen groeien in suspensie als afzonderlijke cellen of kleine clusters en worden doorgaans gekweekt onder standaard lymfocytkweekomstandigheden, aangevuld met serum.

Fenotypisch brengen Wil2-cellen typische B-lijnmarkers tot expressie, zoals CD19, CD20 en oppervlakte-immunoglobulinen, samen met activeringsgerelateerde markers die worden geïnduceerd door de expressie van latente EBV-genen. De aanwezigheid van EBV-episomen stimuleert de proliferatie en ondersteunt langdurige kweek, waardoor deze cellijn een nuttig model is voor het bestuderen van virale latentie, B-celactivering en interacties tussen gastheer en virus. Daarnaast is Wil2 gebruikt in immunologisch en moleculair biologisch onderzoek gericht op antilichaamproductie, antigeenpresentatie en signaaltransductieroutes in getransformeerde B-lymfocyten.

Hoewel Wil2 dient als een representatief model voor door EBV getransformeerde B-cellen, blijven de beschikbare gepubliceerde gegevens over de gedetailleerde genetische achtergrond en functionele specialisatie ervan relatief beperkt in vergelijking met meer uitgebreid gekarakteriseerde lymfoblastoïde lijnen. Onderzoekers worden aangemoedigd om specifieke fenotypische of functionele eigenschappen in hun experimentele context te valideren en bijgewerkte databases of primaire literatuur te raadplegen voor de meest actuele karakteriseringsgegevens.

Weefsel
Milt
Ziekte
Erfelijke sferocytose
Synoniemen
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
B lymfoblast
Karyotype
46, hypodiploïd

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
WIL2 (Cytion catalogusnummer 302011)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Onderhoud de culturen door het medium periodiek toe te voegen of te vervangen. Start de culturen met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 3 x 105 tot 1 x 106 cellen/ml voor een optimale groei.
Zaaidichtheid
1 x 105 cellen/ml
Vloeistofverversing
2 keer per week
Herstel na ontdooiing
Snel
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
5 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch