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WIL2
Pañuelo de papel
Bazo
Enfermedad
Esferocitosis hereditaria
Sinónimos
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

Documentos

WIL2

Cell line · Número de producto 302011

Wil2 es una línea celular linfoblastoide B humana derivada de linfocitos B de sangre periférica de un donante adulto y posteriormente inmortalizada mediante el virus de Epstein-Barr...

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01Información general

Descripción

Wil2 es una línea celular linfoblastoide B humana derivada de linfocitos B de sangre periférica de un donante adulto y posteriormente inmortalizada mediante transformación con el virus de Epstein-Barr (VEB). Como línea celular en suspensión positiva al VEB, Wil2 presenta características propias de las células B activadas, entre las que se incluyen la proliferación continua, la expresión de marcadores de superficie de células B y la capacidad de sintetizar inmunoglobulinas. Las células crecen en suspensión como células individuales o en pequeños grupos y se mantienen habitualmente en condiciones estándar de cultivo de linfocitos suplementadas con suero.

Fenotípicamente, las células Wil2 expresan marcadores típicos del linaje B, como CD19, CD20 e inmunoglobulinas de superficie, junto con marcadores asociados a la activación inducidos por la expresión de genes latentes del VEB. La presencia de episomas del VEB impulsa la proliferación y favorece el cultivo a largo plazo, lo que convierte a esta línea celular en un modelo útil para estudiar la latencia viral, la activación de las células B y las interacciones entre el huésped y el virus. Además, Wil2 se ha utilizado en investigaciones de inmunología y biología molecular centradas en la producción de anticuerpos, la presentación de antígenos y las vías de transducción de señales en linfocitos B transformados.

Aunque Wil2 sirve como modelo representativo de células B transformadas por el VEB, los datos publicados disponibles sobre su trasfondo genético detallado y su especialización funcional siguen siendo relativamente limitados en comparación con líneas linfoblastoides caracterizadas más exhaustivamente. Se anima a los investigadores a validar propiedades fenotípicas o funcionales específicas en su contexto experimental y a consultar bases de datos actualizadas o la literatura primaria para obtener los datos de caracterización más recientes.

Pañuelo de papel
Bazo
Enfermedad
Esferocitosis hereditaria
Sinónimos
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Tipo de célula
Linfoblasto B
Cariotipo
46, hipodiploide

04Identificadores

Referencia
WIL2 (número de catálogo de Cytion 302011)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Subcultivo
Mantenga los cultivos añadiendo o sustituyendo periódicamente el medio. Inicie los cultivos con una densidad de 5 x 105 células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para un crecimiento óptimo.
Densidad de siembra
1 x 105 células/ml
Renovación de fluidos
2 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Rápido
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
5 años
Origen étnico
Caucásico