Prejsť na obsah
WIL2
Tkanivo
Slezina
Choroba
Hereditárna sférocytóza
Synonymá
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

Dokumenty

WIL2

Cell line · Číslo výrobku 302011

Wil2 je ľudská B-lymfoblastoidná bunková línia odvodená z B-lymfocytov periférnej krvi dospelého darcu, ktorá bola následne imortalizovaná prostredníctvom vírusu Epstein–Bar...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Wil2 je ľudská B-lymfoblastoidná bunková línia odvodená z B-lymfocytov periférnej krvi dospelého darcu, ktorá bola následne imortalizovaná transformáciou vírusom Epstein–Barr (EBV). Ako EBV-pozitívna suspenzná bunková línia vykazuje Wil2 charakteristické vlastnosti aktivovaných B buniek, vrátane nepretržitej proliferácie, expresie povrchových markerov B buniek a schopnosti syntézy imunoglobulínov. Bunky rastú v suspenzii ako jednotlivé bunky alebo malé zhluky a bežne sa udržiavajú v štandardných podmienkach kultivácie lymfocytov doplnených sérom.

Fenotypicky bunky Wil2 exprimujú typické markery B-línie, ako sú CD19, CD20 a povrchové imunoglobulíny, spolu s markermi spojenými s aktiváciou indukovanými expresiou latentných génov EBV. Prítomnosť epizómov EBV stimuluje proliferáciu a podporuje dlhodobú kultiváciu, čo z tejto buneckej línie robí užitočný model na štúdium vírusovej latencie, aktivácie B-buniek a interakcií medzi hostiteľom a vírusom. Okrem toho sa Wil2 používa v imunologickom a molekulárno-biologickom výskume zameranom na produkciu protilátok, prezentáciu antigénov a signálne transdukčné dráhy v transformovaných B-lymfocytoch.

Hoci Wil2 slúži ako reprezentatívny model B-buniek transformovaných EBV, dostupné publikované údaje o jej podrobnom genetickom pozadí a funkčnej špecializácii zostávajú relatívne obmedzené v porovnaní s rozsiahlejšie charakterizovanými lymfoblastoidnými líniami. Výskumníci sú povzbudzovaní, aby overili špecifické fenotypové alebo funkčné vlastnosti vo svojom experimentálnom kontexte a pre najaktuálnejšie charakterizačné údaje konzultovali aktualizované databázy alebo primárnu literatúru.

Tkanivo
Slezina
Choroba
Hereditárna sférocytóza
Synonymá
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Typ bunky
B lymfoblast
Karyotyp
46, hypodiploidný

04Identifikátory

Citácia
WIL2 (katalógové číslo Cytion 302011)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Hustota výsevu
1 x 105 buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Rýchle
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
5 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský