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WIL2
Gewebe
Spleen
Krankheit
Hereditäre Sphärozytose
Synonyme
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

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WIL2

Cell line · Artikelnummer 302011

Wil2 ist eine humane B-Lymphoblastoid-Zelllinie, die aus B-Lymphozyten des peripheren Blutes eines erwachsenen Spenders gewonnen und anschließend durch Epstein-Barr…

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Wil2 ist eine humane B-Lymphoblastoid-Zelllinie, die aus peripheren B-Lymphozyten eines erwachsenen Spenders gewonnen und anschließend durch Transformation mit dem Epstein-Barr-Virus (EBV) immortalisiert wurde. Als EBV-positive Suspensionszelllinie weist Wil2 charakteristische Merkmale aktivierter B-Zellen auf, darunter kontinuierliche Proliferation, Expression von B-Zell-Oberflächenmarkern und die Fähigkeit zur Immunglobulinsynthese. Die Zellen wachsen in Suspension als Einzelzellen oder kleine Cluster und werden üblicherweise unter Standardbedingungen für Lymphozytenkulturen, ergänzt durch Serum, gehalten.

Phänotypisch exprimieren Wil2-Zellen typische Marker der B-Zell-Linie wie CD19, CD20 und Oberflächen-Immunglobuline sowie aktivierungsassoziierte Marker, die durch die Expression latenter EBV-Gene induziert werden. Das Vorhandensein von EBV-Episomen treibt die Proliferation an und unterstützt die Langzeitkultur, was diese Zelllinie zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung der viralen Latenz, der B-Zell-Aktivierung und der Wirt-Virus-Interaktionen macht. Darüber hinaus wurde Wil2 in der immunologischen und molekularbiologischen Forschung eingesetzt, die sich auf die Antikörperproduktion, die Antigenpräsentation und Signaltransduktionswege in transformierten B-Lymphozyten konzentriert.

Während Wil2 als repräsentatives Modell für EBV-transformierte B-Zellen dient, sind die verfügbaren veröffentlichten Daten zu ihrem detaillierten genetischen Hintergrund und ihrer funktionellen Spezialisierung im Vergleich zu umfassender charakterisierten lymphoblastischen Linien nach wie vor relativ begrenzt. Forscher werden dazu angehalten, spezifische phänotypische oder funktionelle Eigenschaften in ihrem experimentellen Kontext zu validieren und aktualisierte Datenbanken oder Primärliteratur zu konsultieren, um die aktuellsten Charakterisierungsdaten zu erhalten.

Gewebe
Spleen
Krankheit
Hereditäre Sphärozytose
Synonyme
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
B-Lymphoblasten
Karyotyp
46, hypodiploid

04Bezeichner

Quellenangabe
WIL2 (Cytion-Katalognummer 302011)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Subkultivierung
Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
Aussaatdichte
1 x 105 Zellen/ml
Flüssigkeitswechsel
2 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Schnell
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
5 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch