Pāriet uz saturu
WIL2
Audums
Spleen
Slimība
Iedzimta sferocitozi
Sinonīmi
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

Dokumenti

WIL2

Cell line · Preces numurs 302011

Wil2 ir cilvēka B limfoblastoīdu šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša donora perifērās asins B limfocītiem un vēlāk imortalizēta ar Epšteina–Barra...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Wil2 ir cilvēka B limfoblastoīdu šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša donora perifērās asins B limfocītiem un vēlāk imortalizēta ar Epšteina–Barra vīrusa (EBV) transformāciju. Kā EBV-pozitīva suspensijas šūnu līnija, Wil2 izrāda aktivētu B šūnu raksturīgās pazīmes, tostarp nepārtrauktu proliferāciju, B šūnu virsmas marķieru ekspresiju un spēju sintezēt imūnglobulīnus. Šūnas aug suspensijā kā atsevišķas šūnas vai nelielos kopumos un parasti tiek uzturētas standarta limfocītu kultivēšanas apstākļos, papildinot ar serumu.

Fenotipiski Wil2 šūnas ekspresē tipiskus B-līnijas marķierus, piemēram, CD19, CD20 un virsmas imūnglobulīnus, kā arī ar aktivāciju saistītus marķierus, ko inducē EBV latentā gēna ekspresija. EBV episomu klātbūtne veicina proliferāciju un atbalsta ilgtermiņa kultivēšanu, padarot šo šūnu līniju par noderīgu modeli vīrusu latentuma, B šūnu aktivācijas un saimnieka–vīrusa mijiedarbības pētīšanai. Turklāt Wil2 ir izmantota imunoloģijas un molekulārās bioloģijas pētījumos, kas vērsti uz antivielu ražošanu, antigēnu prezentāciju un signālu pārneses ceļiem transformētos B limfocītos.

Lai gan Wil2 kalpo kā reprezentatīvs EBV transformētu B šūnu modelis, pieejamie publicētie dati par tās detalizēto ģenētisko fonu un funkcionālo specializāciju joprojām ir salīdzinoši ierobežoti salīdzinājumā ar plašāk raksturotām limfoblastoīdo līnijām. Pētnieki tiek aicināti validēt specifiskas fenotipiskas vai funkcionālas īpašības savā eksperimentālajā kontekstā un konsultēties ar atjauninātām datu bāzēm vai primāro literatūru, lai iegūtu jaunākos raksturojošos datus.

Audums
Spleen
Slimība
Iedzimta sferocitozi
Sinonīmi
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
B limfoblasts
Kariotips
46, hipodiploīds

04Identifikatori

Atsauce
WIL2 (Cytion kataloga numurs 302011)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Sēšanas blīvums
1 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Fast
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
5 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis