WIL2

Wil2 é uma linhagem celular linfoblastoide B humana derivada de linfócitos B do sangue periférico de um doador adulto e, posteriormente, imortalizada por meio da transformação pelo vírus de Epstein–Barr (EBV). Por ser uma linhagem celular em suspensão positiva para o EBV, a Wil2 apresenta características típicas das células B ativadas, incluindo proliferação contínua, expressão de marcadores de superfície de células B e capacidade de síntese de imunoglobulinas. As células crescem em suspensão como células isoladas ou pequenos aglomerados e são comumente mantidas em condições padrão de cultura de linfócitos, suplementadas com soro.

Fenotipicamente, as células Wil2 expressam marcadores típicos da linhagem B, como CD19, CD20 e imunoglobulinas de superfície, juntamente com marcadores associados à ativação induzidos pela expressão de genes latentes do EBV. A presença de episomas do EBV estimula a proliferação e possibilita a cultura de longo prazo, tornando essa linhagem celular um modelo útil para o estudo da latência viral, da ativação de células B e das interações hospedeiro-vírus. Além disso, a Wil2 tem sido utilizada em pesquisas de imunologia e biologia molecular focadas na produção de anticorpos, na apresentação de antígenos e nas vias de transdução de sinal em linfócitos B transformados.

Embora a Wil2 sirva como um modelo representativo de células B transformadas pelo EBV, os dados publicados disponíveis sobre seu perfil genético detalhado e especialização funcional permanecem relativamente limitados em comparação com linhagens linfoblastoides mais amplamente caracterizadas. Os pesquisadores são incentivados a validar propriedades fenotípicas ou funcionais específicas em seus contextos experimentais e a consultar bancos de dados atualizados ou literatura primária para obter os dados de caracterização mais recentes.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.