WIL2

Wil2 on inimese B-lümfoblastoidne rakuliin, mis on saadud täiskasvanud doonori perifeersest verest pärit B-lümfotsüütidest ja seejärel Epstein–Barr-viiruse (EBV) transformatsiooni abil immortalisatsioonile allutatud. EBV-positiivse suspensioonrakkude liinina näitab Wil2 aktiveeritud B-rakkude iseloomulikke tunnuseid, sealhulgas pidevat proliferatsiooni, B-rakkude pinnamarkerite ekspressiooni ja võimet sünteesida immunoglobuliine. Rakud kasvavad suspensioonis üksikrakkudena või väikeste klastritena ning neid hoitakse tavaliselt standardse lümfotsüütide kultiveerimistingimustes, millele on lisatud seerumit.

Fenotüübiliselt ekspresseerivad Wil2-rakud tüüpilisi B-liini markereid, nagu CD19, CD20 ja pinnal asuvaid immunoglobuliine, koos EBV latentsete geenide ekspressiooni poolt indutseeritud aktiveerimisega seotud markeritega. EBV episomide olemasolu soodustab proliferatsiooni ja toetab pikaajalist kultiveerimist, muutes selle rakuliini kasulikuks mudeliks viiruse latentsuse, B-rakkude aktiveerimise ja peremees-viiruse interaktsioonide uurimiseks. Lisaks on Wil2-d kasutatud immunoloogilistes ja molekulaarbioloogilistes uuringutes, mis keskenduvad antikehade tootmisele, antigeeni esitamisele ja signaaliülekande radadele transformeeritud B-lümfotsüütides.

Kuigi Wil2 on tüüpiline EBV-transformeeritud B-rakkude mudel, on selle üksikasjaliku geneetilise taustaga ja funktsionaalse spetsialiseerumisega seotud avaldatud andmed suhteliselt piiratud võrreldes põhjalikumalt iseloomustatud lümfoblastoidliinidega. Teadlastel soovitatakse valideerida spetsiifilisi fenotüübilisi või funktsionaalseid omadusi oma eksperimentaalses kontekstis ning konsulteerida ajakohastatud andmebaase või esmaseid allikaid, et saada kõige värskemaid iseloomustamisandmeid.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest