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WIL2
Tessuto
Milza
Malattia
Sferocitosi ereditaria
Sinonimi
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

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WIL2

Cell line · Codice prodotto 302011

Wil2 è una linea cellulare linfoblastoide B umana derivata dai linfociti B del sangue periferico di un donatore adulto e successivamente immortalizzata tramite il virus di Epstein–Bar...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

Wil2 è una linea cellulare linfoblastoide B umana derivata dai linfociti B del sangue periferico di un donatore adulto e successivamente immortalizzata tramite trasformazione con il virus di Epstein-Barr (EBV). In quanto linea cellulare in sospensione EBV-positiva, Wil2 presenta le caratteristiche tipiche delle cellule B attivate, tra cui la proliferazione continua, l'espressione dei marcatori di superficie delle cellule B e la capacità di sintetizzare immunoglobuline. Le cellule crescono in sospensione come cellule singole o piccoli cluster e vengono comunemente mantenute in condizioni standard di coltura dei linfociti integrate con siero.

Dal punto di vista fenotipico, le cellule Wil2 esprimono marcatori tipici del lignaggio B quali CD19, CD20 e immunoglobuline di superficie, insieme a marcatori associati all’attivazione indotti dall’espressione genica latente dell’EBV. La presenza di episomi dell'EBV stimola la proliferazione e favorisce la coltura a lungo termine, rendendo questa linea cellulare un modello utile per lo studio della latenza virale, dell'attivazione delle cellule B e delle interazioni ospite-virus. Inoltre, Wil2 è stata utilizzata nella ricerca immunologica e di biologia molecolare incentrata sulla produzione di anticorpi, sulla presentazione dell'antigene e sulle vie di trasduzione del segnale nei linfociti B trasformati.

Sebbene Wil2 funga da modello rappresentativo di cellule B trasformate dall'EBV, i dati pubblicati disponibili sul suo background genetico dettagliato e sulla sua specializzazione funzionale rimangono relativamente limitati rispetto alle linee linfoblastoidi caratterizzate in modo più approfondito. I ricercatori sono incoraggiati a convalidare specifiche proprietà fenotipiche o funzionali nel loro contesto sperimentale e a consultare banche dati aggiornate o la letteratura primaria per i dati di caratterizzazione più recenti.

Tessuto
Milza
Malattia
Sferocitosi ereditaria
Sinonimi
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tipo di cellula
Linfoblasto B
Cariotipo
46, ipodiploide

04Identificatori

Riferimento bibliografico
WIL2 (numero di catalogo Cytion 302011)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Subcoltura
Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Densità di semina
1 x 105 cellule/mL
Rinnovo dei fluidi
2 volte a settimana
Recupero post-scongelamento
Veloce
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
5 anni
Etnia
Caucasico