İçeriğe atla
WIL2
Doku
Dalak
Hastalık
Kalıtsal sferositoz
Eş anlamlılar
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

WIL2

Cell line · Ürün numarası 302011

Wil2, yetişkin bir donörün periferik kanındaki B lenfositlerinden elde edilen ve daha sonra Epstein–Bar virüsü aracılığıyla ölümsüzleştirilen bir insan B lenfoblastoid hücre hattıdır...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Wil2, yetişkin bir donörün periferik kan B lenfositlerinden elde edilen ve daha sonra Epstein–Barr virüsü (EBV) dönüşümü yoluyla ölümsüzleştirilmiş bir insan B lenfoblastoid hücre hattıdır. EBV-pozitif bir süspansiyon hücre hattı olan Wil2, sürekli proliferasyon, B hücresi yüzey belirteçlerinin ekspresyonu ve immünoglobulin sentezi kapasitesi dahil olmak üzere aktive B hücrelerinin karakteristik özelliklerini sergiler. Hücreler, süspansiyon içinde tek hücreler veya küçük kümeler halinde büyür ve genellikle serum ilaveli standart lenfosit kültür koşullarında muhafaza edilir.

Fenotipik olarak, Wil2 hücreleri, EBV latent gen ekspresyonu tarafından indüklenen aktivasyonla ilişkili belirteçlerin yanı sıra CD19, CD20 ve yüzey immünoglobulinleri gibi tipik B-soy belirteçlerini eksprese eder. EBV episomlarının varlığı, proliferasyonu tetikler ve uzun süreli kültürü destekler; bu da bu hücre hattını viral latenstik, B hücresi aktivasyonu ve konak-virüs etkileşimlerini incelemek için yararlı bir model haline getirir. Ayrıca Wil2, transformasyon geçirmiş B lenfositlerinde antikor üretimi, antijen sunumu ve sinyal iletim yolaklarına odaklanan immünolojik ve moleküler biyoloji araştırmalarında kullanılmıştır.

Wil2, temsili bir EBV ile transformasyon geçirmiş B hücresi modeli olarak hizmet etse de, ayrıntılı genetik arka planı ve fonksiyonel uzmanlaşması hakkında mevcut yayınlanmış veriler, daha kapsamlı bir şekilde karakterize edilmiş lenfoblastoid hatlarına kıyasla nispeten sınırlıdır. Araştırmacılar, spesifik fenotipik veya fonksiyonel özellikleri kendi deneysel bağlamlarında doğrulamaya ve en güncel karakterizasyon verileri için güncellenmiş veritabanlarına veya birincil literatüre başvurmaya teşvik edilmektedir.

Doku
Dalak
Hastalık
Kalıtsal sferositoz
Eş anlamlılar
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
B lenfoblast
Karyotip
46, hipodiploid

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
WIL2 (Cytion katalog numarası 302011)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Kültürleri, besiyerini periyodik olarak ekleyerek veya değiştirerek muhafaza edin. Kültürleri 5 x 105 hücre/ml yoğunlukta başlatın ve optimal büyüme için hücre konsantrasyonunu 3 x 105 ila 1 x 106 hücre/ml aralığında tutun.
Ekim yoğunluğu
1 x 105 hücre/mL
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Hızlı
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
5 yıl
Etnik köken
Kafkas