Siirry sisältöön
WIL2
Kudos
Perna
Sairaus
Perinnöllinen sferosytoosi
Synonyymit
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

Asiakirjat

WIL2

Cell line · Tuotenumero 302011

Wil2 on ihmisen B-lymfoblastoidinen solulinja, joka on peräisin aikuisen luovuttajan ääreisverestä otetuista B-lymfosyytteistä ja joka on myöhemmin muutettu kuolemattomaksi Epstein–Bar...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Wil2 on ihmisen B-lymfoblastoidinen solulinja, joka on peräisin aikuisen luovuttajan ääreisverestä otetuista B-lymfosyytteistä ja joka on myöhemmin muutettu kuolemattomaksi Epstein–Barr-viruksen (EBV) avulla. EBV-positiivisena suspensiosolulinjana Wil2:lla on aktivoituneiden B-solujen tyypillisiä piirteitä, kuten jatkuva proliferaatio, B-solujen pintamarkkerien ilmentyminen ja kyky immunoglobuliinisynteesiin. Solut kasvavat suspensiossa yksittäisinä soluina tai pieninä klustereina, ja niitä ylläpidetään yleensä tavanomaisissa lymfosyyttiviljelyolosuhteissa, joihin on lisätty seerumia.

Fenotyyppisesti Wil2-solut ilmentävät tyypillisiä B-linjan markkereita, kuten CD19, CD20 ja pinta-immunoglobuliineja, sekä EBV:n latenttien geenien ilmentymisen indusoimia aktivaatioon liittyviä markkereita. EBV-episomien läsnäolo edistää proliferaatiota ja tukee pitkäaikaista viljelyä, mikä tekee tästä solulinjasta hyödyllisen mallin viruksen latenssin, B-solujen aktivaation ja isäntä-virus-vuorovaikutusten tutkimiseen. Lisäksi Wil2:ta on käytetty immunologisessa ja molekyylibiologisessa tutkimuksessa, joka keskittyy vasta-aineiden tuotantoon, antigeenien esittelyyn ja signaalinsiirtoreitteihin transformoiduissa B-lymfosyytteissä.

Vaikka Wil2 toimii edustavana EBV-transformoitujen B-solujen mallina, sen yksityiskohtaisesta geneettisestä taustasta ja toiminnallisesta erikoistumisesta saatavilla olevat julkaistut tiedot ovat edelleen suhteellisen rajallisia verrattuna laajemmin karakterisoituihin lymfoblastoidilinjoihin. Tutkijoita kannustetaan validoimaan spesifiset fenotyyppiset tai toiminnalliset ominaisuudet omassa kokeellisessa kontekstissaan ja tarkistamaan päivitetyt tietokannat tai primaarikirjallisuus saadakseen ajantasaisimmat karakterisointitiedot.

Kudos
Perna
Sairaus
Perinnöllinen sferosytoosi
Synonyymit
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
B-lymfoblasti
Karyotyyppi
46, hypodiploidinen

04Tunnisteet

Lähdeviite
WIL2 (Cytionin luettelonumero 302011)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Ylläpidä viljelmiä lisäämällä tai vaihtamalla kasvualusta säännöllisesti. Aloita viljelyt tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus välillä 3 x 105 – 1 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi.
Kylvötiheys
1 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
2 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Nopea
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
5 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen