Gå til innholdet
WIL2
Vev
Milten
Sykdom
Arvelig sfærocytose
Synonymer
WIL-2, Wil.2, WI-L2, Wi-L2

Dokumenter

WIL2

Cell line · Produktnummer 302011

Wil2 er en human B-lymfoblastoidcellelinje som stammer fra B-lymfocytter i perifert blod fra en voksen donor og som deretter er gjort udødelig ved hjelp av Epstein–Bar...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Wil2 er en human B-lymfoblastoidcellelinje som stammer fra B-lymfocytter i perifert blod fra en voksen donor og som deretter er gjort udødelig gjennom transformasjon med Epstein–Barr-virus (EBV). Som en EBV-positiv suspensjonscellelinje viser Wil2 karakteristiske trekk ved aktiverte B-celler, inkludert kontinuerlig proliferasjon, uttrykk for B-celleoverflatemarkører og evnen til immunoglobulinsyntese. Cellene vokser i suspensjon som enkeltceller eller små klynger og opprettholdes vanligvis under standard lymfocyttkulturforhold tilsatt serum.

Fenotypisk uttrykker Wil2-celler typiske markører for B-linjen, slik som CD19, CD20 og overflate-immunoglobuliner, sammen med aktiveringsassosierte markører indusert av latent EBV-genuttrykk. Tilstedeværelsen av EBV-episomer driver proliferasjon og støtter langvarig dyrking, noe som gjør denne cellelinjen til en nyttig modell for å studere viral latens, B-celleaktivering og vert–virus-interaksjoner. I tillegg har Wil2 blitt brukt i immunologisk og molekylærbiologisk forskning med fokus på antistoffproduksjon, antigenpresentasjon og signaltransduksjonsveier i transformerte B-lymfocytter.

Selv om Wil2 fungerer som en representativ modell for EBV-transformerte B-celler, er tilgjengelige publiserte data om dens detaljerte genetiske bakgrunn og funksjonelle spesialisering fortsatt relativt begrenset sammenlignet med mer omfattende karakteriserte lymfoblastoidlinjer. Forskere oppfordres til å validere spesifikke fenotypiske eller funksjonelle egenskaper i sin eksperimentelle kontekst og konsultere oppdaterte databaser eller primærlitteratur for de mest aktuelle karakteriseringsdataene.

Vev
Milten
Sykdom
Arvelig sfærocytose
Synonymer
  • WIL-2
  • Wil.2
  • WI-L2
  • Wi-L2

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
B-lymfoblast
Karyotype
46, hypodiploid

04Identifikatorer

Kildehenvisning
WIL2 (Cytion-katalognummer 302011)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6544

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vekst.
Såtetthet
1 x 105 celler/ml
Væskefornyelse
2 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Rask
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
5 år
Etnisitet
Kaukasisk