LLC-MK2

LLC-MK2 jest ciągłą nabłonkową linią komórkową utworzoną z tkanki nerkowej dorosłych małp rezus (*Macaca mulatta*). Ta linia komórkowa została pierwotnie wyizolowana w latach pięćdziesiątych XX wieku poprzez trypsynizację połączonej tkanki nerkowej sześciu małp rezus. Komórki LLC-MK2 wykazują właściwości wzrostu przylegającego i były szeroko stosowane w wirusologii ze względu na ich wysoką podatność na różne wirusy, w tym wirus biegunki wirusowej bydła 1, ludzki wirus polio 1 i ludzki wirus coxsackie B4. Pochodzenie linii komórkowej i podatność na wirusy sprawiają, że jest ona idealnym modelem do badania replikacji wirusów i efektów cytopatogennych.

Linia komórkowa LLC-MK2 jest znana ze swojej zdolności do hodowli w chemicznie zdefiniowanych pożywkach bez surowicy, co pozwala na kontrolowane warunki eksperymentalne. Badania wykazały, że komórki te można dostosować do warunków bez surowicy bez uszczerbku dla wzrostu, chociaż początkowe hodowle były utrzymywane w pożywkach zawierających znaczne ilości surowicy końskiej. Adaptacja do chemicznie zdefiniowanych mediów jest szczególnie korzystna dla badań wirusologicznych, ponieważ minimalizuje zmienność wprowadzaną przez surowicę i wspiera długoterminowe utrzymanie linii komórkowej. Ponadto wykazano, że linia LLC-MK2 utrzymuje wrażliwość na wirusy porównywalną z pierwotnymi komórkami nerki małpy, co czyni ją niezawodnym narzędziem do miareczkowania wirusów i badań nad produkcją szczepionek.

Oprócz roli w wirusologii, LLC-MK2 badano również pod kątem potencjału nowotworowego. Chociaż wykazuje pewne cechy transformacji, takie jak zdolność do wzrostu w miękkim agarze, nie tworzy guzów w modelach in vivo, co sugeruje ograniczone ryzyko nowotworzenia. Ta cecha dodatkowo podkreśla jej użyteczność jako modelowej linii komórkowej do badań in vitro, jednocześnie potwierdzając jej nieprzydatność do zastosowań terapeutycznych lub in vivo.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym