LLC-MK2

إن خط الخلايا الظهارية LLC-MK2 هو خط خلايا طلائية متصل تم إنشاؤه من النسيج الكلوي لقرود ريسوس البالغة (*Macaca mulatta*). تم عزل هذا الخط الخلوي في الأصل في الخمسينيات من القرن الماضي من خلال التريبسين لأنسجة الكلى المجمعة من ستة قرود ريسوس. تتميز خلايا LLC-MK2 بخصائص نمو ملتصقة وقد استُخدمت على نطاق واسع في علم الفيروسات نظراً لقابليتها العالية للفيروسات المختلفة، بما في ذلك فيروس الإسهال الفيروسي البقري 1 وفيروس شلل الأطفال البشري 1 وفيروس كوكساكييفيروس B4 البشري. إن أصل خط الخلية وقابليتها للتأثر بالفيروسات يجعلها نموذجًا مثاليًا لدراسة التكاثر الفيروسي والتأثيرات الممرضة للخلايا.

ويُعرف خط خلايا LLC-MK2 بقدرته على الاستزراع في وسائط محددة كيميائياً وخالية من المصل، مما يسمح بظروف تجريبية مضبوطة. وقد أثبتت الأبحاث أن هذه الخلايا يمكن تكييفها مع ظروف خالية من المصل دون المساس بالنمو، على الرغم من أن المزروعات الأولية تم الحفاظ عليها في وسائط تحتوي على كميات كبيرة من مصل الحصان. ويُعد التكيف مع الوسائط المحددة كيميائياً مفيداً بشكل خاص للدراسات الفيروسية، حيث أنه يقلل من التباين الذي يُدخله المصل ويدعم الحفاظ على خط الخلايا على المدى الطويل. وعلاوة على ذلك، فقد ثبت أن خط LLC-MK2 يحافظ على حساسية للفيروسات مماثلة لخلايا كلية القرود الأولية، مما يجعله أداة موثوقة لدراسات المعايرة الفيروسية وإنتاج اللقاحات.

وبالإضافة إلى دوره في علم الفيروسات، فقد تم فحص خط LLC-MK2 أيضاً من حيث قدرته على التكاثر الورمي. وعلى الرغم من أنه يُظهر بعض الخصائص المتحولة، مثل القدرة على النمو في أجار لين، إلا أنه لا يشكل أورامًا في النماذج الحية، مما يشير إلى وجود خطر محدود للتسبب في الأورام. وتؤكد هذه الخاصية كذلك فائدته كخط خلوي نموذجي للدراسات المختبرية، بينما تؤكد عدم ملاءمته للتطبيقات العلاجية أو في الجسم الحي.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان