
- Væv
- Nyre
- Synonymer
- Llc-Mk2, LLC-MK-2, LLC-MK2 Original, LLCMK2, LLcMK2, Lilly Laboratories Culture-Monkey Kidney 2
Dokumenter
LLC-MK2
Cell line · Varenummer 305149
LLC-MK2 is a continuous epithelial cell line established from the renal tissue of adult rhesus monkeys (*Macaca mulatta*). This cell line was originally i...
Tilpasning / Anbefalinger
- LLC-MK2Cell line€430.00
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
LLC-MK2 er en kontinuerlig epitelcellelinje, der er etableret fra nyrevæv fra voksne rhesusaber (*Macaca mulatta*). Denne cellelinje blev oprindeligt isoleret i 1950'erne gennem trypsinisering af samlet nyrevæv fra seks rhesusaber. LLC-MK2-celler har vedhængende vækstkarakteristika og er blevet brugt i vid udstrækning inden for virologi på grund af deres høje følsomhed over for forskellige vira, herunder bovin viral diarrévirus 1, human poliovirus 1 og human coxsackievirus B4. Cellelinjens oprindelse og virusmodtagelighed gør den til en ideel model til undersøgelse af virusreplikation og cytopatogene effekter.
LLC-MK2-cellelinjen er kendt for sin evne til at blive dyrket i kemisk definerede, serumfri medier, hvilket giver mulighed for kontrollerede forsøgsbetingelser. Forskning har vist, at disse celler kan tilpasses til serumfrie forhold uden at kompromittere væksten, selvom de første kulturer blev vedligeholdt i medier, der indeholdt betydelige mængder hesteserum. Tilpasningen til kemisk definerede medier er særlig fordelagtig for virologiske undersøgelser, da det minimerer den variation, der introduceres af serum, og understøtter langsigtet vedligeholdelse af cellelinjen. Desuden har LLC-MK2-linjen vist sig at opretholde en virusfølsomhed, der kan sammenlignes med primære abenyreceller, hvilket gør den til et pålideligt værktøj til undersøgelser af viral titrering og vaccineproduktion.
Ud over sin rolle i virologi er LLC-MK2 også blevet undersøgt for sit tumorgeniske potentiale. Selvom den udviser visse transformerede egenskaber, såsom evnen til at vokse i blød agar, danner den ikke tumorer i in vivo-modeller, hvilket tyder på en begrænset tumorgenisk risiko. Denne egenskab understreger yderligere dens anvendelighed som modelcellelinje til in vitro-studier, samtidig med at den bekræfter dens uegnethed til terapeutiske eller in vivo-anvendelser.
- Væv
- Nyre
- Synonymer
- Llc-Mk2
- LLC-MK-2
- LLC-MK2 Original
- LLCMK2
- LLcMK2
- Lilly Laboratories Culture-Monkey Kidney 2
02Klassificering
- Organisme
- Rhesusmakak
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitelial
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- LLC-MK2 (Cytion-katalognummer 305149)
- NCBI-skattenummer
- 9544
- Cellosaurus
- CVCL_3009
05Udtryk og modtagelighed
- Proteinekspression
- Plasminogen-aktivator
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- Medium 199, w: 2,7 mM stabil glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820101a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 1% hesteserum
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Såtæthed
- 4 x 104 celler/cm2
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- Voksen
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja