LLC-MK2

LLC-MK2 je kontinuální epiteliální buněčná linie vytvořená z ledvinové tkáně dospělých opic druhu rhesus (*Macaca mulatta*). Tato buněčná linie byla původně izolována v 50. letech 20. století trypsinizací sdružené ledvinové tkáně šesti opic rhesus. Buňky LLC-MK2 vykazují adherentní růstové vlastnosti a byly hojně využívány ve virologii díky své vysoké citlivosti k různým virům, včetně viru bovinního virového průjmu 1, lidského polioviru 1 a lidského coxsackieviru B4. Původ buněčné linie a její citlivost k virům z ní činí ideální model pro studium virové replikace a cytopatogenních účinků.

Buněčná linie LLC-MK2 je známá svou schopností kultivace v chemicky definovaných médiích bez séra, což umožňuje kontrolované experimentální podmínky. Výzkum prokázal, že tyto buňky lze přizpůsobit podmínkám bez použití séra, aniž by byl ohrožen jejich růst, ačkoli počáteční kultury byly udržovány v médiích obsahujících značné množství koňského séra. Přizpůsobení chemicky definovaným médiím je zvláště výhodné pro virologické studie, protože minimalizuje variabilitu způsobenou sérem a podporuje dlouhodobé udržování buněčných linií. Kromě toho bylo prokázáno, že linie LLC-MK2 si zachovává citlivost na virus srovnatelnou s primárními buňkami opičích ledvin, což z ní činí spolehlivý nástroj pro titrační studie virů a výrobu vakcín.

Kromě své úlohy ve virologii byla linie LLC-MK2 zkoumána také z hlediska svého nádorového potenciálu. Ačkoli vykazuje určité transformované vlastnosti, jako je schopnost růstu v měkkém agaru, netvoří nádory v modelech in vivo, což naznačuje omezené tumorigenní riziko. Tato vlastnost dále podtrhuje její užitečnost jako modelové buněčné linie pro studie in vitro a zároveň potvrzuje její nevhodnost pro terapeutické nebo in vivo aplikace.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení