LLC-MK2

LLC-MK2は、成体のアカゲザル（*Macaca mulatta*）の腎組織から樹立された連続上皮細胞株である。この細胞株はもともと1950年代に、6匹のアカゲザルからプールした腎組織のトリプシン化によって単離された。LLC-MK2細胞は付着性増殖特性を示し、ウシウイルス下痢症ウイルス1、ヒトポリオウイルス1、ヒトコクサッキーウイルスB4など様々なウイルスに対する高い感受性を持つことから、ウイルス学で広く用いられてきた。LLC-MK2細胞株は、その起源とウイルス感受性から、ウイルスの複製と細胞病原性への影響を研究するための理想的なモデルとなっている。

LLC-MK2細胞株は、化学的に定義された無血清培地で培養できることで知られており、これにより実験条件を制御することができる。初期の培養は、かなりの量の馬血清を含む培地で維持されていたが、これらの細胞は増殖を損なうことなく無血清条件に適応できることが、研究によって証明されている。化学的に定義された培地への適応は、血清によってもたらされるばらつきを最小限に抑え、細胞株の長期維持をサポートするため、ウイルス学的研究にとって特に有利である。さらに、LLC-MK2株はサル腎臓初代細胞に匹敵するウイルス感受性を維持することが示されており、ウイルスの滴定やワクチン製造研究のための信頼できるツールとなっている。

ウイルス学における役割に加えて、LLC-MK2はその腫瘍形成能についても研究されてきた。LLC-MK2は軟寒天培地で増殖する能力など、ある種の形質転換特性を示すが、in vivoモデルでは腫瘍を形成せず、腫瘍形成リスクは限定的であることが示唆された。この特性は、in vitro研究のモデル細胞株としての有用性をさらに強調する一方で、治療やin vivoでの応用には適さないことを裏付けている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。