Gå direkt till innehållet
LLC-MK2
Vävnad
Njurar
Synonymer
Llc-Mk2, LLC-MK-2, LLC-MK2 Original, LLCMK2, LLcMK2, Lilly Laboratories Culture-Monkey Kidney 2

LLC-MK2

Cell line · Produktnummer 305149

LLC-MK2 is a continuous epithelial cell line established from the renal tissue of adult rhesus monkeys (*Macaca mulatta*). This cell line was originally i...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

LLC-MK2 är en kontinuerlig epitelcellinje som etablerats från njurvävnaden hos vuxna rhesusapor (*Macaca mulatta*). Denna cellinje isolerades ursprungligen på 1950-talet genom trypsinisering av poolad njurvävnad från sex rhesusapor. LLC-MK2-cellerna har adherenta tillväxtegenskaper och har använts flitigt inom virologin på grund av sin höga känslighet för olika virus, bland annat bovint virusdiarrévirus 1, humant poliovirus 1 och humant coxsackievirus B4. Cellinjens ursprung och viruskänslighet gör den till en idealisk modell för att studera virusreplikation och cytopatogena effekter.

LLC-MK2-cellinjen är känd för sin förmåga att odlas i kemiskt definierade, serumfria medier, vilket möjliggör kontrollerade experimentella förhållanden. Forskning har visat att dessa celler kan anpassas till serumfria förhållanden utan att tillväxten äventyras, även om de första kulturerna hölls i medier som innehöll betydande mängder hästserum. Anpassningen till kemiskt definierade medier är särskilt fördelaktig för virologiska studier, eftersom den minimerar den variabilitet som introduceras av serum och stöder långsiktigt underhåll av cellinjen. LLC-MK2-cellinjen har dessutom visat sig ha en viruskänslighet som är jämförbar med den hos primära njurceller från apor, vilket gör den till ett tillförlitligt verktyg för studier av virustitrering och vaccinproduktion.

Förutom sin roll inom virologin har LLC-MK2 också undersökts för sin tumörframkallande potential. Även om den uppvisar vissa transformerade egenskaper, till exempel förmågan att växa i mjuk agar, bildar den inte tumörer i in vivo-modeller, vilket tyder på en begränsad tumörframkallande risk. Denna egenskap understryker ytterligare dess användbarhet som modellcellinje för in vitro-studier, samtidigt som den bekräftar dess olämplighet för terapeutiska eller in vivo-applikationer.

Vävnad
Njurar
Synonymer
  • Llc-Mk2
  • LLC-MK-2
  • LLC-MK2 Original
  • LLCMK2
  • LLcMK2
  • Lilly Laboratories Culture-Monkey Kidney 2

02Klassificering

Organism
Rhesusmakak
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
LLC-MK2 (Cytion katalognummer 305149)
NCBI-skattenummer
9544
Cellosaurus
CVCL_3009

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
Plasminogenaktivator

06Hantering och odling

Odlingsmedium
Medium 199, w: 2,7 mM stabilt glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820101a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 1% hästserum
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
4 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Vuxen