
- Kudos
- Munuaiset
- Synonyymit
- Llc-Mk2, LLC-MK-2, LLC-MK2 Original, LLCMK2, LLcMK2, Lilly Laboratories Culture-Monkey Kidney 2
Asiakirjat
LLC-MK2
Cell line · Tuotenumero 305149
LLC-MK2 is a continuous epithelial cell line established from the renal tissue of adult rhesus monkeys (*Macaca mulatta*). This cell line was originally i...
Räätälöinti / Suositukset
- LLC-MK2Cell line€430.00
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
LLC-MK2 on jatkuva epiteelisolulinja, joka on luotu aikuisten rhesusapinoiden (*Macaca mulatta*) munuaiskudoksesta. Tämä solulinja eristettiin alun perin 1950-luvulla trypsiinisoimalla kuuden rhesusapinan yhdistettyä munuaiskudosta. LLC-MK2-soluilla on adheesiokasvuominaisuudet, ja niitä on käytetty laajalti virologiassa, koska ne ovat erittäin herkkiä erilaisille viruksille, kuten naudan virusripulivirukselle 1, ihmisen poliovirukselle 1 ja ihmisen coxsackievirukselle B4. Solulinjan alkuperä ja virusherkkyys tekevät siitä ihanteellisen mallin virusten replikaation ja sytopatogeenisten vaikutusten tutkimiseen.
LLC-MK2-solulinja tunnetaan kyvystään viljellä kemiallisesti määritellyissä, seerumittomissa väliaineissa, mikä mahdollistaa kontrolloidut koeolosuhteet. Tutkimukset ovat osoittaneet, että nämä solut voidaan mukauttaa seerumittomiin olosuhteisiin ilman, että kasvu vaarantuu, vaikka alkuperäisiä viljelmiä pidettiinkin yllä medioissa, jotka sisälsivät huomattavia määriä hevosseerumia. Kemiallisesti määriteltyihin väliaineisiin sopeutuminen on erityisen edullista virologisissa tutkimuksissa, koska se minimoi seerumin aiheuttaman vaihtelun ja tukee solulinjojen pitkäaikaista ylläpitoa. Lisäksi LLC-MK2-linjan on osoitettu säilyttävän samanlaisen virusherkkyyden kuin primaaristen apinan munuaissolujen, mikä tekee siitä luotettavan välineen virustitraus- ja rokotetuotantotutkimuksiin.
Sen lisäksi, että LLC-MK2:lla on merkitystä virologiassa, sitä on tutkittu myös sen kasvainvaikutuspotentiaalin vuoksi. Vaikka sillä on tiettyjä muuntuneita ominaisuuksia, kuten kyky kasvaa pehmeässä agarissa, se ei muodosta kasvaimia in vivo -malleissa, mikä viittaa rajalliseen kasvainriskiin. Tämä ominaisuus korostaa entisestään sen käyttökelpoisuutta mallisolulinjana in vitro -tutkimuksissa, mutta vahvistaa samalla sen soveltumattomuuden terapeuttisiin tai in vivo -sovelluksiin.
- Kudos
- Munuaiset
- Synonyymit
- Llc-Mk2
- LLC-MK-2
- LLC-MK2 Original
- LLCMK2
- LLcMK2
- Lilly Laboratories Culture-Monkey Kidney 2
02Luokittelu
- Organismi
- Rhesusmakaki
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteeli
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- LLC-MK2 (Cytionin tuotenumero 305149)
- NCBI-verotunnus
- 9544
- Cellosaurus
- CVCL_3009
05Ilmentyminen ja alttius
- Proteiinin ilmentyminen
- Plasminogeenin aktivaattori
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- Medium 199, w: 2,7 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820101a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 1 % hevosseerumilla
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 4 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- Aikuiset
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä