LLC-MK2

LLC-MK2 ist eine kontinuierliche Epithelzelllinie, die aus dem Nierengewebe erwachsener Rhesusaffen (*Macaca mulatta*) gewonnen wird. Diese Zelllinie wurde ursprünglich in den 1950er Jahren durch die Trypsinierung von gepooltem Nierengewebe von sechs Rhesusaffen isoliert. LLC-MK2-Zellen weisen adhärente Wachstumseigenschaften auf und wurden aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit gegenüber verschiedenen Viren, einschließlich des Bovinen Virusdiarrhöe-Virus 1, des Humanen Poliovirus 1 und des Humanen Coxsackievirus B4, in der Virologie häufig verwendet. Die Herkunft der Zelllinie und ihre Virusanfälligkeit machen sie zu einem idealen Modell für die Untersuchung der viralen Replikation und der zytopathogenen Auswirkungen.

Die LLC-MK2-Zelllinie ist dafür bekannt, dass sie in chemisch definierten, serumfreien Medien kultiviert werden kann, was kontrollierte Versuchsbedingungen ermöglicht. Die Forschung hat gezeigt, dass diese Zellen an serumfreie Bedingungen angepasst werden können, ohne das Wachstum zu beeinträchtigen, obwohl die ersten Kulturen in Medien gehalten wurden, die erhebliche Mengen an Pferdeserum enthielten. Die Anpassung an chemisch definierte Medien ist besonders für virologische Studien von Vorteil, da sie die durch Serum verursachte Variabilität minimiert und die langfristige Aufrechterhaltung der Zelllinie unterstützt. Darüber hinaus hat sich gezeigt, dass die LLC-MK2-Linie eine Virusempfindlichkeit aufweist, die mit der von primären Affennierenzellen vergleichbar ist, was sie zu einem zuverlässigen Instrument für Studien zur Virustitration und Impfstoffherstellung macht.

Zusätzlich zu ihrer Rolle in der Virologie wurde LLC-MK2 auch auf ihr tumorigenes Potenzial hin untersucht. Obwohl es bestimmte transformierte Eigenschaften aufweist, wie z. B. die Fähigkeit, in weichem Agar zu wachsen, bildet es in In-vivo-Modellen keine Tumore, was auf ein begrenztes tumorigenes Risiko schließen lässt. Diese Eigenschaft unterstreicht ihre Nützlichkeit als Modellzelllinie für In-vitro-Untersuchungen, bestätigt aber gleichzeitig, dass sie für therapeutische oder In-vivo-Anwendungen nicht geeignet ist.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung