Langsung ke isi
LLC-MK2
Tisu
Ginjal
Sinonim
Llc-Mk2, LLC-MK-2, LLC-MK2 Original, LLCMK2, LLcMK2, Lilly Laboratories Culture-Monkey Kidney 2

LLC-MK2

Cell line · Nomor produk 305149

LLC-MK2 is a continuous epithelial cell line established from the renal tissue of adult rhesus monkeys (*Macaca mulatta*). This cell line was originally i...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

LLC-MK2 adalah garis sel epitel kontinu yang dibuat dari jaringan ginjal monyet rhesus dewasa (*Macaca mulatta*). Garis sel ini awalnya diisolasi pada tahun 1950-an melalui tripsinisasi jaringan ginjal yang terkumpul dari enam monyet rhesus. Sel LLC-MK2 menunjukkan karakteristik pertumbuhan yang patuh dan telah banyak digunakan dalam virologi karena kerentanannya yang tinggi terhadap berbagai virus, termasuk virus diare virus sapi 1, virus polio manusia 1, dan virus coxsackievirus B4 manusia. Asal usul garis sel dan kerentanan virus menjadikannya model yang ideal untuk mempelajari replikasi virus dan efek sitopatogenik.

Garis sel LLC-MK2 dikenal karena kemampuannya untuk dikultur dalam media bebas serum yang ditentukan secara kimiawi, yang memungkinkan kondisi eksperimental yang terkendali. Penelitian telah menunjukkan bahwa sel-sel ini dapat beradaptasi dengan kondisi bebas serum tanpa mengorbankan pertumbuhan, meskipun kultur awal dipertahankan dalam media yang mengandung sejumlah besar serum kuda. Adaptasi terhadap media yang ditentukan secara kimiawi sangat menguntungkan untuk studi virologi, karena meminimalkan variabilitas yang disebabkan oleh serum dan mendukung pemeliharaan lini sel jangka panjang. Selain itu, lini LLC-MK2 telah terbukti mempertahankan sensitivitas virus yang sebanding dengan sel ginjal monyet primer, menjadikannya alat yang dapat diandalkan untuk titrasi virus dan studi produksi vaksin.

Selain perannya dalam virologi, LLC-MK2 juga telah diselidiki untuk potensi tumorigeniknya. Meskipun menunjukkan karakteristik tertentu yang berubah, seperti kemampuan untuk tumbuh dalam agar lunak, ia tidak membentuk tumor pada model in vivo, menunjukkan risiko tumorigenik yang terbatas. Karakteristik ini semakin menggarisbawahi kegunaannya sebagai garis sel model untuk studi in vitro, sekaligus menegaskan ketidaksesuaiannya untuk aplikasi terapeutik atau in vivo.

Tisu
Ginjal
Sinonim
  • Llc-Mk2
  • LLC-MK-2
  • LLC-MK2 Original
  • LLCMK2
  • LLcMK2
  • Lilly Laboratories Culture-Monkey Kidney 2

02Klasifikasi

Organisme
Monyet rhesus
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
LLC-MK2 (nomor katalog Cytion 305149)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9544
Cellosaurus
CVCL_3009

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
Aktivator plasminogen

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
Medium 199, w: 2,7 mM Glutamin stabil, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820101a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 1% serum kuda
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
4 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Dewasa