LLC-MK2

LLC-MK2 ir nepārtraukta epitēlija šūnu līnija, kas izveidota no pieaugušu rezus pērtiķu (*Macaca mulatta*) nieru audiem. Šo šūnu līniju sākotnēji izolēja pagājušā gadsimta 50. gados, tripsinizējot sešu rēzus pērtiķu nieru audu kopumu. LLC-MK2 šūnām piemīt adherentas augšanas īpašības, un tās ir plaši izmantotas virusoloģijā, pateicoties to augstajai uzņēmībai pret dažādiem vīrusiem, tostarp govju vīrusu diarejas vīrusu 1, cilvēka poliovīrusu 1 un cilvēka koksackie vīrusu B4. Šūnu līnijas izcelsme un uzņēmība pret vīrusiem padara to par ideālu modeli vīrusu replikācijas un citopatoģenētiskās iedarbības izpētei.

LLC-MK2 šūnu līnija ir pazīstama ar to, ka to var kultivēt ķīmiski definētā barotnē bez seruma, kas ļauj kontrolēt eksperimentālos apstākļus. Pētījumi ir pierādījuši, ka šīs šūnas var pielāgot bezseruma apstākļiem, neapdraudot to augšanu, lai gan sākotnējās kultūras tika uzturētas barotnēs, kas satur ievērojamu daudzumu zirgu seruma. Pielāgošanās ķīmiski definētām barotnēm ir īpaši izdevīga virusoloģiskos pētījumos, jo tā samazina seruma radīto mainīgumu un veicina ilgtermiņa šūnu līnijas uzturēšanu. Turklāt ir pierādīts, ka LLC-MK2 līnija saglabā vīrusu jutību, kas ir salīdzināma ar primārajām pērtiķu nieru šūnām, padarot to par uzticamu instrumentu vīrusu titrēšanas un vakcīnu ražošanas pētījumiem.

Papildus tās nozīmei virusoloģijā LLC-MK2 līnija ir pētīta arī attiecībā uz tās audzēja potenciālu. Lai gan tai piemīt noteiktas transformētas īpašības, piemēram, spēja augt mīkstā agārā, in vivo modeļos tā neveido audzējus, kas liecina par ierobežotu tumorogēnu risku. Šī īpašība vēl vairāk pasvītro tās kā modeļa šūnu līnijas lietderību in vitro pētījumiem, vienlaikus apstiprinot tās nepiemērotību terapeitiskiem vai in vivo lietojumiem.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu