LLC-MK2

LLC-MK2 er en kontinuerlig epitelcellelinje som er etablert fra nyrevev fra voksne rhesusaper (*Macaca mulatta*). Denne cellelinjen ble opprinnelig isolert på 1950-tallet gjennom trypsinisering av nyrevev fra seks rhesusaper. LLC-MK2-celler har adherente vekstegenskaper og har blitt mye brukt i virologi på grunn av sin høye mottakelighet for ulike virus, inkludert bovint virusdiarévirus 1, humant poliovirus 1 og humant coxsackievirus B4. Cellelinjens opprinnelse og virusfølsomhet gjør den til en ideell modell for studier av virusreplikasjon og cytopatogene effekter.

LLC-MK2-cellelinjen er kjent for sin evne til å bli dyrket i kjemisk definerte, serumfrie medier, noe som muliggjør kontrollerte eksperimentelle forhold. Forskning har vist at disse cellene kan tilpasses til serumfrie forhold uten at det går ut over veksten, selv om de første kulturene ble opprettholdt i medier som inneholdt betydelige mengder hesteserum. Tilpasningen til kjemisk definerte medier er spesielt fordelaktig for virologiske studier, ettersom det minimerer variabiliteten som introduseres av serum, og støtter langsiktig vedlikehold av cellelinjen. Videre har LLC-MK2-cellelinjen vist seg å opprettholde en virusfølsomhet som er sammenlignbar med virusfølsomheten til primære nyreceller fra aper, noe som gjør den til et pålitelig verktøy for studier av virustitrering og vaksineproduksjon.

I tillegg til sin rolle i virologien har LLC-MK2 også blitt undersøkt for sitt tumorgeniske potensial. Selv om den har visse transformerte egenskaper, som evnen til å vokse i myk agar, danner den ikke svulster i in vivo-modeller, noe som tyder på en begrenset tumorgen risiko. Denne egenskapen understreker ytterligere cellelinjens nytteverdi som modellcellelinje for in vitro-studier, samtidig som den bekrefter dens uegnethet for terapeutiske eller in vivo-applikasjoner.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring