LLC-MK2

LLC-MK2 è una linea cellulare epiteliale continua ottenuta dal tessuto renale di scimmie rhesus adulte (*Macaca mulatta*). Questa linea cellulare è stata originariamente isolata negli anni '50 attraverso la tripsinizzazione del tessuto renale di sei scimmie rhesus. Le cellule LLC-MK2 presentano caratteristiche di crescita aderente e sono state ampiamente utilizzate in virologia grazie alla loro elevata suscettibilità a vari virus, tra cui il virus della diarrea virale bovina 1, il poliovirus umano 1 e il coxsackievirus umano B4. L'origine della linea cellulare e la sua suscettibilità ai virus la rendono un modello ideale per lo studio della replicazione virale e degli effetti citopatogeni.

La linea cellulare LLC-MK2 è nota per la sua capacità di essere coltivata in terreni chimicamente definiti e privi di siero, che consentono condizioni sperimentali controllate. La ricerca ha dimostrato che queste cellule possono essere adattate a condizioni prive di siero senza compromettere la crescita, sebbene le colture iniziali siano state mantenute in terreni contenenti quantità significative di siero di cavallo. L'adattamento a terreni chimicamente definiti è particolarmente vantaggioso per gli studi virologici, in quanto riduce al minimo la variabilità introdotta dal siero e favorisce il mantenimento a lungo termine della linea cellulare. Inoltre, è stato dimostrato che la linea LLC-MK2 mantiene una sensibilità al virus paragonabile a quella delle cellule primarie del rene di scimmia, il che la rende uno strumento affidabile per gli studi di titolazione virale e di produzione di vaccini.

Oltre al suo ruolo nella virologia, la LLC-MK2 è stata studiata anche per il suo potenziale tumorigenico. Sebbene presenti alcune caratteristiche di trasformazione, come la capacità di crescere in soft agar, non forma tumori in modelli in vivo, suggerendo un rischio tumorigenico limitato. Questa caratteristica sottolinea ulteriormente la sua utilità come linea cellulare modello per studi in vitro, pur confermando la sua inadeguatezza per applicazioni terapeutiche o in vivo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia