İçeriğe atla
RM-1-Luc
Doku
Prostat
Hastalık
Prostat bezi karsinomu
Eş anlamlılar
RM1

RM-1-Luc

Cell line · Ürün numarası 305703

RM-1-Luc, fare RM-1 prostat karsinomu hücre hattının biyolüminesan bir türevidir ve ateşböceği lusiferaz rapor genini istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır. ...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

RM-1-Luc, fare RM-1 prostat karsinomu hücre hattının biyolüminesan bir türevidir ve ateşböceği lusiferaz raportör genini istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır. Ana RM-1 hücre hattı, 17. fetal günde C57BL/6 fetal dokusundan elde edilen fare prostat bezi karsinomundan oluşturulmuştur ve C57BL/6 singenik arka planda hızla büyüyen, androjenden bağımsız bir prostat kanseri modelidir. RM-1 hücreleri epitelyal morfoloji sergiler, tipik prostat karsinomu belirteçlerini eksprese eder ve immünokompetan C57BL/6 konakçılarda agresif tümörler oluşturur; bu da bu modeli, tümör-bağışıklık etkileşimlerini incelemek ve prostat kanserine karşı immünoterapi stratejilerini değerlendirmek için uygun hale getirir.

RM-1-Luc'taki stabil lusiferaz entegrasyonu, lusiferin uygulamasını takiben canlı C57BL/6 farelerde birincil tümör büyümesinin ve metastatik yayılımın hassas, noninvaziv biyolüminesans görüntülemesini (BLI) mümkün kılar. Yayılan sinyal, canlı tümör hücresi sayısı ile korelasyon gösterir; bu da, tekrarlanan invaziv prosedürlere gerek kalmaksızın tümörün greftlenmesi, büyüme kinetiği ve terapötik yanıtın uzun süreli değerlendirmesini destekler. RM-1-Luc, immün yetkin bir prostat kanseri modelinde kontrol noktası inhibitörlerinin, androjen yoksunlaştırma stratejilerinin ve kombinasyon immünoterapi yaklaşımlarının preklinik değerlendirmesi açısından özellikle değerlidir.

RM-1-Luc, androjenden bağımsız büyümesi, C57BL/6 singenik uyumluluğu ve prostat kanseri araştırmalarında yerleşik kullanımı dahil olmak üzere, ana RM-1 hattının temel biyolojik özelliklerini korur. Lüseraz raportörü, deneysel duyarlılığı artırır ve gerçek zamanlı farmakodinamik değerlendirmeyi mümkün kılar. Araştırmacılar, büyük ölçekli in vivo kullanıma geçmeden önce, kendi spesifik deney koşulları altında lusiferaz aktivitesini, büyüme kinetiğini ve immünolojik fenotipi doğrulamalıdır.

Doku
Prostat
Hastalık
Prostat bezi karsinomu
Eş anlamlılar
  • RM1

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
RM-1-Luc (Cytion katalog numarası 305703)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IK

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase 5 dakika, oda sıcaklığında
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 ila 4 x 10⁴ hücre/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
C57BL/6
Bağışçının yaşı
17 fetal gün