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RM-1-Luc
Tessuto
Prostata
Malattia
Carcinoma della ghiandola prostatica
Sinonimi
RM1

Documenti

RM-1-Luc

Cell line · Codice prodotto 305703

RM-1-Luc è un derivato bioluminescente della linea cellulare murina RM-1 del carcinoma prostatico, ingegnerizzato per esprimere in modo stabile un gene reporter della luciferasi della lucciola. ...

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01Informazioni generali

Descrizione

RM-1-Luc è un derivato bioluminescente della linea cellulare murina RM-1 di carcinoma prostatico, ingegnerizzata per esprimere in modo stabile un gene reporter della luciferasi di lucciola. La linea cellulare parentale RM-1 è stata ottenuta da un carcinoma della ghiandola prostatica murina derivato da tessuto fetale C57BL/6 a 17 giorni di gestazione ed è un modello di cancro alla prostata a crescita rapida e androgeno-indipendente nel contesto singeneico C57BL/6. Le cellule RM-1 presentano una morfologia epiteliale, esprimono i marcatori tipici del carcinoma prostatico e formano tumori aggressivi in ospiti C57BL/6 immunocompetenti, rendendo questo modello adatto allo studio delle interazioni tumore-sistema immunitario e alla valutazione di strategie di immunoterapia contro il cancro alla prostata.

L’integrazione stabile della luciferasi in RM-1-Luc consente un’imaging a bioluminescenza (BLI) sensibile e non invasivo della crescita del tumore primario e della diffusione metastatica in topi C57BL/6 vivi in seguito alla somministrazione di luciferina. Il segnale emesso è correlato al numero di cellule tumorali vitali, consentendo una valutazione longitudinale dell’attecchimento del tumore, della cinetica di crescita e della risposta terapeutica senza ricorrere a ripetute procedure invasive. RM-1-Luc è particolarmente utile per la valutazione preclinica di inibitori dei checkpoint, strategie di deprivazione androgenica e approcci di immunoterapia combinata in un modello di carcinoma prostatico immunocompetente.

RM-1-Luc conserva le caratteristiche biologiche chiave della linea parentale RM-1, tra cui la crescita androgeno-indipendente, la compatibilità singenica con C57BL/6 e l’uso consolidato nella ricerca sul cancro alla prostata. Il reporter luciferasi migliora la sensibilità sperimentale e consente una valutazione farmacodinamica in tempo reale. I ricercatori dovrebbero verificare l’attività della luciferasi, la cinetica di crescita e il fenotipo immunologico nelle loro specifiche condizioni sperimentali prima di procedere a un impiego in vivo su larga scala.

Tessuto
Prostata
Malattia
Carcinoma della ghiandola prostatica
Sinonimi
  • RM1

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
RM-1-Luc (codice catalogo Cytion 305703)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IK

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Luc2 (lucciola, ottimizzata a livello di codoni)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase 5 min, a temperatura ambiente
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
da 1 a 4 × 10⁴ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6
Età dei donatori
17 giorni fetali