01General information
- Description
RM-1-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים RM-1 של קרצינומה בערמונית עכברית, שהונדסה כך שתבטא באופן יציב גן-דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי RM-1 הוקם מתוך קרצינומה של בלוטת הערמונית בעכבר, שמקורה ברקמה עוברית של C57BL/6 ביום העובר ה-17, והוא מהווה מודל לסרטן הערמונית בעל צמיחה מהירה ובלתי תלוי באנדרוגנים ברקע סינגני של C57BL/6. תאי RM-1 מציגים מורפולוגיה אפיתלית, מבטאים סמנים אופייניים לסרטן הערמונית ויוצרים גידולים אגרסיביים במארחים בעלי מערכת חיסון תקינה מזן C57BL/6, מה שהופך מודל זה למתאים לחקר האינטראקציות בין הגידול למערכת החיסון ולהערכת אסטרטגיות אימונותרפיה נגד סרטן הערמונית.
השילוב היציב של לוקיפרז ב-RM-1-Luc מאפשר הדמיה רגישה ולא פולשנית באמצעות ביולומיננס (BLI) של צמיחת הגידול הראשוני והתפשטות גרורתית בעכברי C57BL/6 חיים לאחר מתן לוקיפרין. האות הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר הערכה ארוכת טווח של השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה והתגובה הטיפולית ללא צורך בהליכים פולשניים חוזרים. RM-1-Luc הוא בעל ערך רב במיוחד להערכה פרה-קלינית של מעכבי נקודות בקרה, אסטרטגיות של מניעת אנדרוגנים וגישות של אימונותרפיה משולבת במודל של סרטן הערמונית בעל מערכת חיסונית תקינה.
RM-1-Luc שומר על המאפיינים הביולוגיים המרכזיים של קו ה-RM-1 ההורי, לרבות צמיחתו הבלתי תלויה באנדרוגנים, תאימות סינגנית עם C57BL/6, והשימוש המוכח במחקר סרטן הערמונית. הרפורט של לוקיפרז משפר את הרגישות הניסויית ומאפשר הערכה פרמקודינמית בזמן אמת. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את קינטיקת הצמיחה ואת הפנוטיפ החיסוני בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם, לפני שימוש בקנה מידה גדול in vivo.
- Tissue
- ערמונית
- Disease
- קרצינומה של בלוטת הערמונית
- Synonyms
- RM1
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
04Identifiers
- Citation
- RM-1-Luc (מספר קטלוג Cytion 305703)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_E3IK
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase 5 דקות, בטמפרטורת החדר
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 3
- Seeding density
- 1 עד 4 × 10⁴ תאים לסמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
- Donor age
- 17 ימים עובריים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
