Mine otse sisu juurde
RM-1-Luc
Kude
Eesnäärme
Haigus
Eesnäärme kartsinoom
Sünonüümid
RM1

Dokumendid

RM-1-Luc

Cell line · Toote number 305703

RM-1-Luc on hiire RM-1 eesnäärmevähirakkude liini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseerib stabiilselt särava liblika lusiferase reportergeeni. ...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

RM-1-Luc on hiire RM-1 eesnäärmevähirakkude liini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseerib stabiilselt särava liblika lusiferase reportergeeni. Algrakuliin RM-1 loodi hiire eesnäärme kartsinoomist, mis pärines 17. lootepäeval C57BL/6 loote koest, ning see on kiiresti kasvav, androgeenist sõltumatu eesnäärmevähi mudel C57BL/6 süngeensel taustal. RM-1-rakud omavad epiteelilist morfoloogiat, ekspresseerivad tüüpilisi eesnäärme kartsinoomi markereid ja moodustavad agressiivseid kasvajaid immuunkompetentsetes C57BL/6 peremeesorganismides, mistõttu sobib see mudel kasvajate ja immuunsüsteemi vastastikmõju uurimiseks ning eesnäärmevähi vastu suunatud immunoteraapiastrateegiate hindamiseks.

Stabiilne lusiferaasi integratsioon RM-1-Luc-is võimaldab pärast lusiferini manustamist elusatel C57BL/6 hiirtel teostada tundlikku, mitteinvasiivset bioluminestsentskuvamist (BLI) primaarse kasvaja kasvu ja metastaatilise leviku jälgimiseks. Väljastatav signaal korreleerub eluvõimeliste kasvajarakkude arvuga, võimaldades kasvaja juurdumise, kasvukineetika ja ravivastuse pikaajalist hindamist ilma korduvate invasiivsete protseduurideta. RM-1-Luc on eriti väärtuslik kontrollpunkti inhibiitorite, androgeeni-deprivatsiooni strateegiate ja kombinatsioonilise immunoteraapia lähenemisviiside prekliiniliseks hindamiseks immuunkompetentses eesnäärmevähi mudelis.

RM-1-Luc säilitab emaliini RM-1 peamised bioloogilised omadused, sealhulgas androgeenist sõltumatu kasvu, C57BL/6-liini süngeense ühilduvuse ja väljakujunenud kasutuse eesnäärmevähi uuringutes. Lucifereesi reporter suurendab eksperimendi tundlikkust ja võimaldab reaalajas farmakodünaamilist hindamist. Teadlased peaksid enne laiaulatuslikku in vivo kasutamist valideerima lusiferase aktiivsuse, kasvu kineetika ja immunoloogilise fenotüübi oma konkreetsetes katsetingimustes.

Kude
Eesnäärme
Haigus
Eesnäärme kartsinoom
Sünonüümid
  • RM1

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
RM-1-Luc (Cytioni katalooginumber 305703)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IK

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase 5 minutit, toatemperatuuril
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1–4 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6
Doonori vanus
17 loote päeva