Ir diretamente para o conteúdo
RM-1-Luc
Tecido
Próstata
Doença
Carcinoma da próstata
Sinónimos
RM1

Documentos

RM-1-Luc

Cell line · Número do produto 305703

O RM-1-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular murina RM-1 de carcinoma da próstata, geneticamente modificado para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. ...

€800.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A RM-1-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular murina RM-1 de carcinoma da próstata, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental RM-1 foi estabelecida a partir de um carcinoma da próstata de ratinho derivado de tecido fetal C57BL/6 aos 17 dias de gestação e constitui um modelo de cancro da próstata de crescimento rápido e independente de androgénios no contexto singénico C57BL/6. As células RM-1 apresentam morfologia epitelial, expressam marcadores típicos do carcinoma da próstata e formam tumores agressivos em hospedeiros C57BL/6 imunocompetentes, tornando este modelo adequado para o estudo das interações tumor-imunológicas e para a avaliação de estratégias de imunoterapia contra o cancro da próstata.

A integração estável da luciferase no RM-1-Luc permite a obtenção de imagens por bioluminescência (BLI) sensíveis e não invasivas do crescimento do tumor primário e da disseminação metastática em ratos C57BL/6 vivos após a administração de luciferina. O sinal emitido está correlacionado com o número de células tumorais viáveis, permitindo a avaliação longitudinal do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta terapêutica sem a necessidade de procedimentos invasivos repetidos. O RM-1-Luc é particularmente valioso para a avaliação pré-clínica de inibidores de pontos de controlo, estratégias de privação androgénica e abordagens de imunoterapia combinada num modelo imunocompetente de cancro da próstata.

O RM-1-Luc mantém as principais características biológicas da linha parental RM-1, incluindo o seu crescimento independente de androgénios, a compatibilidade singénica com C57BL/6 e a utilização estabelecida na investigação do cancro da próstata. O repórter de luciferase aumenta a sensibilidade experimental e permite a avaliação farmacodinâmica em tempo real. Os investigadores devem validar a atividade da luciferase, a cinética de crescimento e o fenótipo imunológico nas suas condições experimentais específicas antes da utilização in vivo em grande escala.

Tecido
Próstata
Doença
Carcinoma da próstata
Sinónimos
  • RM1

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
RM-1-Luc (número de catálogo da Cytion 305703)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IK

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Luc2 (firefly, com codões otimizados)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase 5 min, temperatura ambiente
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
1 a 4 x 10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/6
Idade do dador
17 dias fetais