Przejdź do treści
RM-1-Luc
Chusteczka
Prostata
Choroba
Rak gruczołu krokowego
Synonimy
RM1

Dokumenty

RM-1-Luc

Cell line · Numer produktu 305703

RM-1-Luc to bioluminescencyjna odmiana mysiej linii komórkowej RM-1 raka prostaty, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. ...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

RM-1-Luc to bioluminescencyjna odmiana mysiej linii komórkowej RM-1 raka prostaty, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa RM-1 została wyhodowana z raka gruczołu krokowego myszy, pochodzącego z tkanki płodu szczura rasy C57BL/6 w 17. dniu życia płodowego i stanowi szybko rosnący, niezależny od androgenów model raka prostaty na tle syngenicznym szczurów rasy C57BL/6. Komórki RM-1 wykazują morfologię nabłonkową, wyrażają typowe markery raka prostaty i tworzą agresywne nowotwory u immunokompetentnych myszy C57BL/6, co sprawia, że model ten nadaje się do badania interakcji między nowotworem a układem odpornościowym oraz do oceny strategii immunoterapii przeciwko rakowi prostaty.

Stabilna integracja lucyferazy w linii RM-1-Luc umożliwia czułe, nieinwazyjne obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) wzrostu guza pierwotnego i rozprzestrzeniania się przerzutów u żywych myszy C57BL/6 po podaniu lucyferyny. Emitowany sygnał koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, co umożliwia długoterminową ocenę wszczepienia guza, kinetyki wzrostu oraz odpowiedzi na leczenie bez konieczności powtarzania inwazyjnych procedur. Linia RM-1-Luc jest szczególnie cenna w przedklinicznej ocenie inhibitorów punktów kontrolnych, strategii deprywacji androgenów oraz podejść opartych na immunoterapii skojarzonej w modelu raka prostaty u myszy z prawidłową odpornością.

RM-1-Luc zachowuje kluczowe cechy biologiczne macierzystej linii RM-1, w tym wzrost niezależny od androgenów, syngeniczną zgodność z myszami C57BL/6 oraz ugruntowane zastosowanie w badaniach nad rakiem prostaty. Reporter lucyferazy zwiększa czułość eksperymentalną i umożliwia ocenę farmakodynamiczną w czasie rzeczywistym. Przed zastosowaniem in vivo na dużą skalę naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, kinetykę wzrostu oraz fenotyp immunologiczny w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Prostata
Choroba
Rak gruczołu krokowego
Synonimy
  • RM1

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
RM-1-Luc (numer katalogowy Cytion 305703)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IK

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase – 5 minut, temperatura pokojowa
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
od 1 do 4 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/6
Wiek dawcy
17 dni płodowych