Pāriet uz saturu
RM-1-Luc
Audums
Prostatas
Slimība
Prostatas dziedzera karcinoma
Sinonīmi
RM1

Dokumenti

RM-1-Luc

Cell line · Preces numurs 305703

RM-1-Luc ir peles prostatas karcinomas šūnu līnijas RM-1 bioluminiscents atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskurku luciferāzes reportergēnu. ...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

RM-1-Luc ir peles prostatas karcinomas šūnu līnijas RM-1 bioluminiscents atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskrēsliņa luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā RM-1 šūnu līnija tika izveidota no peles prostatas dziedzera karcinomas, kas iegūta no C57BL/6 augļa audiem 17. augļa attīstības dienā, un tā ir strauji augošs, androgēnu neatkarīgs prostatas vēža modelis C57BL/6 singēnā fonā. RM-1 šūnas uzrāda epitēlija morfoloģiju, ekspresē tipiskus prostatas karcinomas marķierus un veido agresīvus audzējus imūnkompetentos C57BL/6 saimniekos, tādējādi padarot šo modeli piemērotu audzēja un imūnsistēmas mijiedarbības pētīšanai un imūnterapijas stratēģiju novērtēšanai pret prostatas vēzi.

Stabila luciferāzes integrācija RM-1-Luc šūnās ļauj veikt jutīgu, neinvazīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI), novērojot primārā audzēja augšanu un metastāžu izplatību dzīvos C57BL/6 pelēs pēc luciferīna ievadīšanas. Izstarotais signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, kas ļauj veikt audzēja implantācijas, augšanas kinētikas un terapeitiskās atbildes garenvirziena novērtējumu bez atkārtotām invazīvām procedūrām. RM-1-Luc ir īpaši vērtīgs, lai veiktu pirmsklīnisko novērtējumu attiecībā uz kontrolpunktu inhibitoriem, androgēnu deprivācijas stratēģijām un kombinētajām imūnterapijas pieejām imūnkompetentā prostatas vēža modelī.

RM-1-Luc saglabā vecāku RM-1 līnijas galvenās bioloģiskās īpašības, tostarp androgēnu neatkarīgo augšanu, C57BL/6 singēnisko saderību un iedibināto lietošanu prostatas vēža pētījumos. Luciferāzes reportera gēns uzlabo eksperimentālo jutību un ļauj veikt farmakodinamisko novērtējumu reālajā laikā. Pētniekiem pirms plaša mēroga in vivo izmantošanas ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, augšanas kinētika un imunoloģiskais fenotips savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Prostatas
Slimība
Prostatas dziedzera karcinoma
Sinonīmi
  • RM1

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
RM-1-Luc (Cytion kataloga numurs 305703)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IK

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase 5 min, istabas temperatūrā
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1 līdz 4 x 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6
Donora vecums
17 augļa dienas