01General information
- Description
RM-1-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire murine RM-1 de carcinome de la prostate, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur de luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale RM-1 a été établie à partir d’un carcinome de la prostate de souris dérivé de tissu fœtal C57BL/6 à 17 jours fœtaux; il s’agit d’un modèle de cancer de la prostate à croissance rapide et indépendant des androgènes, sur fond syngénique C57BL/6. Les cellules RM-1 présentent une morphologie épithéliale, expriment les marqueurs typiques du carcinome de la prostate et forment des tumeurs agressives chez les hôtes C57BL/6 immunocompétents, ce qui rend ce modèle approprié pour l’étude des interactions tumeur-système immunitaire et l’évaluation des stratégies d’immunothérapie contre le cancer de la prostate.
L’intégration stable de la luciférase dans la lignée RM-1-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et non invasive de la croissance de la tumeur primaire et de la dissémination métastatique chez des souris C57BL/6 vivantes après administration de luciférine. Le signal émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet une évaluation longitudinale de la prise de greffe tumorale, de la cinétique de croissance et de la réponse thérapeutique sans avoir recours à des procédures invasives répétées. La lignée RM-1-Luc est particulièrement utile pour l’évaluation préclinique des inhibiteurs de points de contrôle, des stratégies de privation androgénique et des approches d’immunothérapie combinée dans un modèle immunocompétent de cancer de la prostate.
La souche RM-1-Luc conserve les principales caractéristiques biologiques de la souche parentale RM-1, notamment sa croissance indépendante des androgènes, sa compatibilité syngénique avec la souche C57BL/6 et son utilisation bien établie dans la recherche sur le cancer de la prostate. Le rapporteur luciférase améliore la sensibilité expérimentale et permet une évaluation pharmacodynamique en temps réel. Les chercheurs doivent valider l’activité de la luciférase, la cinétique de croissance et le phénotype immunologique dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation in vivo à grande échelle.
- Tissue
- Prostate
- Disease
- Carcinome de la prostate
- Synonyms
- RM1
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Épithélial
04Identifiers
- Citation
- RM-1-Luc (numéro de catalogue Cytion 305703)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_E3IK
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase 5 min, à température ambiante
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Split ratio
- 1 à 3
- Seeding density
- de 1 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
- Donor age
- 17 jours fœtaux
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes