Вступ

Цей Bend.3 Клітини Лінія — також відома під синонімами bEND.3, b.End3, bEnd3, BEND-3, BEND3 та «ендотеліальні клітини, отримані з мозку.3» — це трансформована лінія ендотеліальних клітин мікросудин головного мозку миші, яка стала одним із найпоширеніших інструментів in vitro у нейроваскулярній біології. Лінія була створена з тканини ендотеліоми мишачого мозку після трансформації антигеном «середнього Т» вірусу поліоми — маніпуляції, що надає клітинам стабільну здатність до безкінечного проліферації, зберігаючи при цьому ключові характеристики ендотелію. З моменту її охарактеризування на початку 1990-х років bEnd.3 слугує доступним та відтворюваним сурогатом для дослідження гематоенцефалічного бар’єру (ГЕБ), церебральної ішемії, інсульту, реперфузійного ушкодження, ангіогенезу та, у ширшому сенсі, біології ендотеліальних клітин. Його корисність у моделюванні порушення ГЕБ у контексті ішемічного інсульту, хвороби Альцгеймера та черепно-мозкової травми зробила його широко використовуваним інструментом як у фундаментальних, так і в трансляційних дослідженнях у галузі нейронауки.

Основні висновки

• bEnd.3 — це трансформована лінія мікросудинних ендотеліальних клітин мозку миші, отримана з тканини мозку миші лінії BALB/c та трансформована за допомогою середнього Т-антигену поліомавірусу (реєстраційний номер Cellosaurus CVCL_0170).
• Вона широко використовується як модель гематоенцефалічного бар’єру in vitro для дослідження ішемічного інсульту, реперфузійного ураження, хвороби Альцгеймера та нейрозапалення.
• Ці клітини експресують ключові маркери, пов’язані з гематоенцефалічним бар’єром, зокрема білки щільних з’єднань — клаудин-5, окклюдин і ZO-1, а також eNOS і PECAM-1.
• Клітини bEnd.3 експресують маркери лімфатичного ендотелію, такі як LYVE-1 та VEGFR-3, що розширює їхню значимість для досліджень у галузі судинної біології.
• Час подвоєння клітинної лінії становить 26–30 годин, що робить її ефективною для проведення експериментів у великих масштабах.
• Герметичність бар’єру є обмеженою: максимальний трансендотеліальний електричний опір, що становив приблизно 130 Ом·см², було досягнуто лише в кокультурі астрогліальних клітин, а ця лінія погано розрізняє маркери парацелюлярної та трансцелюлярної проникності.
• Було доведено, що клітини bEnd.3, виступаючи в ролі клітин-годівників, сприяють підтримці життєдіяльності плюрипотентних стовбурових клітин людини, що розширює можливості їхнього застосування в біології стовбурових клітин.

Що таке bEnd.3?

bEnd.3 було отримано з тканини головного мозку 6-тижневої миші лінії BALB/c невизначеної статі (номер зразка Cellosaurus CVCL_0170). Вихідні клітини ендотеліоми було отримано шляхом трансформації мишачих ендотеліальних клітин антигеном «middle T» (mT) поліомавірусу. У знаковому дослідженні 1990 року, проведеному Монтесано, Пеппером та їхніми колегами, було продемонстровано, що клітини ендотеліоми, які експресують mT, виявляють значно підвищену протеолітичну активність — зокрема, підвищений рівень активатора плазміногену урокіназного типу разом зі зниженим виробленням інгібітора активатора плазміногену — та утворюють великі кістозні структури, схожі на гемангіоми, у фібринових гелях, що пояснює глибоке порушення нормального розвитку судин під впливом онкогену [1]. Ця механістична основа допомогла визначити трансформований фенотип, який лежить в основі біологічної поведінки bEnd.3 та його корисності в експериментальних умовах.

У ході подальших досліджень було детально визначено морфологічний та молекулярний профіль цієї клітинної лінії. Оміді та колеги повідомили, що клітини bEnd.3 у культурі мають характерну веретеноподібну плоскоклітинну морфологію та експресують білки, пов’язані з везикулами, зокрема клатрин, кавеолін-1, флотилін та динамін II, що відповідає активному механізму везикулярного транспорту [2]. У цьому ж дослідженні було підтверджено наявність транскриптів елементів щільних з’єднань ZO-1, JAM, оклюдину, клаудину-1 та клаудину-5, а також функціональне поглинання глюкози за участю GLUT-1 та ефлюкс за участю P-глікопротеїну. У кокультурі з астроглією C6 моношари досягали максимального трансендотеліального електричного опору приблизно 130 Ом·см², хоча автори також виявили, що клітини не проводили суттєвого розрізнення між парацелюлярними та транселюлярними пробниками проникності. Пізніше Юен та колеги повідомили, що клітини bEnd.3 також експресують лімфатичні ендотеліальні маркери LYVE-1 та VEGFR-3, а також маркери прогеніторів Sca-1 та CD133, і утворюють трубочки капілярного типу при стимуляції TNF-альфа — це відкриття розширило біологічне значення цієї клітинної лінії за межі класичних досліджень кровоносних судин [3].

Переваги bEnd.3

Однією з найважливіших переваг bEnd.3 є її доступність та практична відтворюваність. На відміну від первинних ендотеліальних клітин мікросудин головного мозку, які вимагають трудомістких процедур виділення та мають обмежену здатність до пасажування, bEnd.3 є безсмертною лінією, яку можна надійно розмножувати в різних лабораторіях. Завдяки часу подвоєння, що становить 26–30 годин, ці клітини добре підходять для експериментів, що вимагають великої кількості однорідних клітин. Їхня стабільна експресія ендотеліальних маркерів — зокрема білків щільних з’єднань клаудін-5, окклюдін, та ZO-1, а також eNOS і PECAM-1 — робить їх практичним замінником ендотелію мікросудин головного мозку в широкому діапазоні експериментальних умов, за умови врахування застережень щодо бар’єрної функції, викладених нижче.

Універсальність лінії bEnd.3 охоплює низку наукових дисциплін. У ході досліджень цю лінію використовували для моделювання порушення гематоенцефалічного бар’єру під час ішемічного інсульту та реперфузійного ураження, вивчення нейрозапалення, спричиненого молекулами адгезії, аналізу експресії генів, що регулюють ангіогенез, а також дослідження міжклітинної комунікації, опосередкованої коннексинами. Крім того, Жубен та його колеги продемонстрували, що клітини bEnd.3 здатні підтримувати людські плюрипотентні стовбурові клітини в недиференційованому стані, виконуючи роль клітин-годівників, які можна генетично модифікувати — ця здатність важко відтворити за допомогою короткоживучих первинних культур [4]. Такий широкий спектр застосування свідчить про корисність цієї клітинної лінії в таких галузях, як нейронаука, судинна біологія, фармакологія та дослідження стовбурових клітин.

Обмеження bEnd.3

Незважаючи на широке застосування, bEnd.3 має суттєві обмеження при використанні як моделі гематоенцефалічного бар’єру. Оміді та колеги виміряли максимальний трансендотеліальний електричний опір, що становив лише близько 130 Ом·см², причому для досягнення цього значення була необхідна спільна культивація з астроцитами лінії C6; що ще важливіше, моношари майже не розрізняли трансклітинні та параклітинні зонди, причому коефіцієнти проникності для пропранололу та сахарози відрізнялися лише незначно [2]. Автори дійшли висновку, що ця лінія не підходить для оцінки трансендотеліальної проникності, хоча й залишається цінною для досліджень механізмів транспорту через гематоенцефалічний бар’єр. Тому дані щодо проникності, отримані в цій системі, слід інтерпретувати з обережністю та, за можливості, доповнювати результатами досліджень у системах спільного культивування або перевіркою in vivo.

Ще однією пов’язаною з цим слабкістю є сама організація щільних з’єднань. Сонг і Пахтер порівняли bEnd.3 зі свіжоочищеними первинними клітинами ендотелію мікросудин головного мозку мишей і виявили, що, тоді як первинні клітини концентрували клаудин-5, окклюдин та ZO-1 уздовж міжклітинних меж і розділяли окклюдин та ZO-1 за допомогою стійкого до детергентів цитоскелетного каркаса, то клітини bEnd.3 демонстрували дифузну цитоплазматичну локалізацію окклюдину та ZO-1 і утримували ці білки переважно у розчинній фракції [5]. Отже, експресія білка щільних з’єднань у bEnd.3 сама по собі не означає правильного формування з’єднань.

Змінена природа bEnd.3, що зумовлена експресією онкогену mT, також може спричиняти фенотипічні артефакти, яких немає у нормальному ендотелії головного мозку. Підвищена протеолітична активність — визначальна ознака клітин ендотеліоми, що експресують mT [1] — а експресія лімфатичних маркерів, таких як LYVE-1 і VEGFR-3, свідчить про те, що ця клітинна лінія не повністю відтворює властивості нормального ендотелію кровоносних судин [3]. Крім того, стать донора для цієї клітинної лінії не вказано, що обмежує можливість застосування отриманих результатів для вирішення дослідницьких завдань, що передбачають стратифікацію за статтю. Ці міркування не применшують цінності клітинної лінії, але підкреслюють важливість розуміння її конкретного біологічного контексту.

Переглянути повні технічні характеристики та замовити

Застосування

Моделювання гематоенцефалічного бар'єру та ішемічний інсульт

Найбільш відомим застосуванням bEnd.3 є використання його як in vitro моделі гематоенцефалічного бар’єру в ішемічних та постішемічних умовах. Кото та його колеги продемонстрували, що гіпоксія (1 % O₂) змінювала локалізацію та рівень білка клаудіну-5 у моношарах bEnd.3, спричиняючи вимірюване зниження трансендотеліального електричного опору, та підтвердили відповідну втрату клаудіну-5 у ендотелії мікросудин сітківки in vivo [6]. Це дозволило встановити механістичний зв’язок між ремоделюванням щільних з’єднань та порушенням бар’єру під час нейрогіпоксії, а також визначило bEnd.3 як зручну систему для вивчення молекулярних процесів, що лежать в основі порушення ГЕБ при інсульті.

У часто цитованому дослідженні Кіма та колег цю клітинну лінію використовували як in vitro модель ГЕБ, яку піддавали депривації кисню та глюкози (ДКГ) для імітації ішемії. Вісімнадцять годин OGD спричинили клітинну дисфункцію, підвищення проникності, деградацію оклюдину та активацію шляхів аутофагії, причому деградований оклюдин колокалізувався з ішемічними аутофагосомами; як втрата оклюдину, так і зміна проникності були значно зменшені інгібітором аутофагії 3-метиладеніном. Ті самі молекулярні зміни та їхнє зворотне проявлення під дією 3-метиладеніну згодом було відтворено в капілярах головного мозку щурів, яким було проведено оклюзію середньої мозкової артерії [7]. Ця робота встановила механістичну основу, що пов’язує автофагічний потік із втратою білків щільних з’єднань, та надала важливі трансляційні уявлення щодо патології інсульту.

Додаткові дослідження продемонстрували, що агматин послаблює експресію матричних металопротеїназ-2 та -9 у клітинах ендотелію головного мозку — зокрема, у bEnd.3 — які зазнали ушкодження внаслідок ОГД-реперфузії, причому зниження експресії ММП-9 відбувалося паралельно з підвищенням експресії eNOS та підтриманням вивільнення оксиду азоту, що вказує на потенційний нейропротекторний механізм, актуальний для ушкоджень головного мозку та реперфузійного ушкодження [8]. Дослідження апоптозу, опосередкованого ангіотензином II, також показали, що гіперозид захищає клітини bEnd.3 та зберігає цілісність моношару ГЕБ in vitro, впливаючи на JAM-A, клаудин-5, ZO-1, кавеолін-1 та Mfsd2a, що відкриває перспективи для терапевтичного захисту судин головного мозку [9]. Дослідження надмірної експресії circLphn3 у клітинах bEnd.3 також підкреслили роль некодуючої РНК у підтримці експресії білків щільних з’єднань — зокрема ZO-1, ZO-2 та окклюдину — після травматичного ураження головного мозку, причому circLphn3 діє як молекулярна губка для miR-185-5p [10].

Нейрозапалення, ендотеліальна токсикологія та хвороба Альцгеймера

Клітини bEnd.3 широко використовуються для вивчення запальних сигналів у ендотелії судин головного мозку. Чон та колеги показали, що кадмій — повсюдно поширений важкий метал, який накопичується за межами гематоенцефалічного бар’єру (ГЕБ) — стимулював експресію ICAM-1 у клітинах bEnd.3 через активацію NF-κB, зумовлену фосфорилюванням тирозину IκBα, а не його деградацією, що надає механістичне обґрунтування кадмій-індукованій цереброваскулярній токсичності [11]. Аналогічно, Чжан та колеги повідомили, що С-реактивний білок у концентраціях 1–75 мг/л підвищував експресію ICAM-1 та VCAM-1, а також витік ЛДГ у клітинах bEnd.3, що вказує на пряму роль цього білка гострої фази у пошкодженні ГЕ під час ішемічного інсульту [12].

У цій клітинній лінії також досліджували індуковану пестицидами ендотеліальну токсичність. Юнг та колеги продемонстрували, що N-нітрозокарбофуран, нітрозометаболіт карбаматного пестициду карбофурану, індукував апоптоз у клітинах bEnd.3 через шляхи MAP-кіназ, причому шлях ERK відігравав домінуючу роль у загибелі клітин [13]. Цитотоксичність, індукована лізофосфатидилхоліном у клітинах bEnd.3, була досліджена Цаєм та колегами, які пов’язали загибель клітин із перенавантаженням цитозолю кальцієм, втратою потенціалу мітохондріальної мембрани, активації p38 та активації каспази-3 — причому, що важливо, без утворення активних форм кисню — та визначили гепарин як захисний агент, що діє нижче за p38 [14]. У більш пізніх дослідженнях щодо лікування флорфеніколом було задокументовано, що опосередкована ROCK/кофіліном ремоделювання F-актину сприяє зниженню проліферації та міграції в ендотеліальних клітинах bEnd.3 [15].

У сфері досліджень хвороби Альцгеймера клітини bEnd.3 слугували моделлю порушення гематоенцефалічного бар’єру, опосередкованого бета-амілоїдним пептидом. Чан та колеги показали, що індуковані олігомерами Аβ зміни автофагії в клітинах bEnd.3 блокувалися малою інтерферуючою РНК RAGE, пов’язуючи сигнальний шлях RAGE через вісь CaMKKβ/AMPK/mTOR з автофагічно-залежним пошкодженням білків каркасу щільних з’єднань — ZO-1, окклюдину та клаудину-5 [16]. Окремо було показано, що поліфенол насіння лічі захищає цілісність ГЕБ шляхом інгібування індукованої Aβ(25–35) активації інфламмасоми NLRP3 через шлях аутофагії, опосередкований AMPK/mTOR/ULK1, у клітинах bEnd.3; ці результати були підтверджені на трансгенних мишах APP/PS1 — це дослідження розширило розуміння взаємодії між аутофагією та інфламмасомою на нейроваскулярному інтерфейсі [17]. Фотобіомодуляцію досліджували в тому ж контексті: Ма та колеги використовували клітини bEnd.3, стимульовані LPS, а також мишей APP/PS1, щоб показати, що лікування в ближньому інфрачервоному діапазоні покращує мітохондріальний енергетичний обмін, підвищує експресію оклюдину, клаудину-5 та ZO-1 і захищає цілісність бар’єру в залежності від AMPK [18].

Ангіогенез та судинна сигналізація

bEnd.3 виявився надзвичайно інформативним у дослідженнях ангіогенної сигналізації. Юе та колеги застосували мікроматрицю cDNA для аналізу експресії ангіогенних генів у клітинах bEnd.3, оброблених основним фактором росту фібробластів (bFGF), виявивши підвищення експресії проангіогенних генів, зокрема ADAMTS1, MMP-9, ангіопоетин-1, PDGF-B та G-CSF, зниження експресії антиангіогенних генів, таких як TIMP-2 та TSP-3, а також індукцію циклооксигенази-2 (COX-2) як на рівні мРНК, так і на рівні білка [19]. Цей високопродуктивний підхід дозволив визнати bEnd.3 зручною платформою для профілювання ангіогенезу на рівні геному.

Ангіогенні реакції, спричинені гіпоксією, також були картографовані з використанням клітин bEnd.3. Чжу та колеги продемонстрували, що гіпоксія підвищує експресію мРНК та білка ендогліну (CD105) у клітинах bEnd.3 через активацію p38 MAPK, причому інгібітори цього шляху — а також домінантно-негативний MKK3 — пригнічують індукцію ендогліну [20]. Оскільки ендоглін мутує при спадковій геморагічній телеангіектазії та його експресія підвищується під час активної ангіогенезу, ці результати пов’язали чутливий до гіпоксії сигнальний шлях MAPK із патологічною ремоделяцією судин. Лі та колеги додатково показали, що гіпоксія підвищує активність CD73 (екто-5'-нуклеотидази), мРНК та білок у клітинах bEnd.3 у залежності від часу, тоді як реоксигенація спочатку скасовувала цю індукцію, перш ніж рівень CD73 знову підвищувався при тривалій реоксигенації — що вказує на утворення аденозину як нейропротекторного механізму під час ішемії-реперфузії [21].

Сигналізація ангіопоетином була детально досліджена з використанням bEnd.3 як модельної системи. Ші та колеги створили безсироваткову модель апоптозу в клітинах bEnd.3 і продемонстрували, що ангіопоетин-1 інгібує апоптоз ендотеліальних клітин мікросудин за допомогою механізму, пов’язаного зі зниженням рівня Bax, підвищенням рівня Bcl-2 та зменшенням вивільнення цитохрому С з мітохондрій у цитоплазму [22]. Перрі та колеги розширили дослідження біології ангіопоетину на гемангіоми, продемонструвавши конститутивну активацію рецептора Tie-2 у гемангіомі немовлят та використовуючи клітини bEnd.3 як мишачу модель гемангіоми, в якій фармакологічне інгібування синтезу ангіопоетину-2 майже повністю зупинило ріст пухлини in vivo [23].

eNOS, коннексини та функція ендотелію

Біологія ендотеліальної синтази оксиду азоту (eNOS) була досить точно охарактеризована на клітинах bEnd.3. Говерс та колеги за допомогою імунофлуоресцентної мікроскопії показали, що локалізація eNOS на плазматичній мембрані критично залежить від міжклітинного контакту, причому спостерігається значне збагачення в місцях міжклітинного контакту, що нагадує характер розподілу PECAM-1, а не VE-кадгерину чи плакоглобіну, а активність eNOS вища у конфлюентних моношарах, ніж у субконфлюентних, незважаючи на незмінний рівень експресії [24]. Цей просторовий зв’язок між локалізацією та активністю eNOS виділив лінію bEnd.3 як модель, за допомогою якої можна змістовно досліджувати фізіологічний контекст конфлюентного ендотелію.

Беверс та колеги досліджували роз'єднання eNOS у клітинах bEnd.3, які експресують eNOS на рівні, що на два порядки величини перевищує показники порівняльної ендотеліальної лінії, при цьому не маючи iNOS та nNOS. Вони виявили, що введення тетрагідробіоптерину (BH4) збільшувало синтез NO та зменшувало утворення активних форм кисню, тоді як додавання додаткового L-аргініну ще більше посилювало утворення активних форм кисню, індукованих VEGF, — що вказує на те, що саме відносний дефіцит BH4, а не доступність аргініну, зумовлює роз’єднання в цих умовах [25]. Цей результат має безпосереднє значення для судинних ускладнень таких станів, як гіпертонія та атеросклероз, де тривала гіперекспресія eNOS може парадоксальним чином сприяти окислювальному стресу.

Комунікація через щілинні з’єднання, опосередкована коннексинами, також досліджувалася в клітинах bEnd.3. Квак та колеги порівняли експресію коннексинів та міжклітинне з’єднання до та після механічного пошкодження моношарів bEnd.3, зафіксувавши індуковану пошкодженням активацію експресії Cx43 та пригнічення експресії Cx37 у місці пошкодження, при цьому експресія Cx40 залишилася незмінною [26]. Стабільна трансфекція домінантно-негативними інгібіторами коннексинів подовжила час, необхідний для повного закриття рани, приблизно на 50 % без зміни проліферації, міграції окремих клітин або протеолітичної активності, що підтвердило специфічну роль комунікації через щілинні з’єднання в скоординованому відновленні ендотеліальних ран.

Секреція нейротрофічних факторів та застосування стовбурових клітин

Клітини bEnd.3 секретують нейротрофічні фактори, які впливають на навколишнє нервове мікросередовище. Ван та колеги продемонстрували, що нейротрофічний фактор, похідний від мозку (BDNF), експресується та вивільняється клітинами bEnd.3, причому як тривала, так і періодична гіпоксія стимулюють секрецію BDNF — причому періодична гіпоксія є більш потужним стимулом [27]. Індуковане гіпоксією вивільнення BDNF частково інгібувалося N-ацетил-L-цистеїном та міметиком супероксиддисмутази, що вказує на участь активних форм кисню у гіпоксією керованій нейротрофічній сигналізації та вимагало мобілізації кальцію з внутрішніх депо. Ці результати довели, що ендотелій мікросудин головного мозку є активним учасником процесу виживання нейронів, а не лише пасивним бар’єром.

Найбільш вражаючим є те, що Жубен та його колеги продемонстрували, що клітини bEnd.3 підтримують людські плюрипотентні стовбурові клітини в недиференційованому стані, секретуючи розчинну речовину, яка імітує нішу, що забезпечується ембріональними фібробластами мишей [4]. Автори також продемонстрували, що клітини bEnd.3 можна генетично модифікувати для експресії флуоресцентних репортерів або генів резистентності до ліків, створюючи «дизайнерські» живильні шари для культивування стовбурових клітин — це застосування значно розширює сферу застосування клітинної лінії за межі класичних досліджень ендотелію.

Висновок

bEnd.3 залишається однією з найбільш універсальних і продуктивних клітинних ліній у дослідженнях нейросудинної системи та гематоенцефалічного бар’єру. Від моделювання ішемічного інсульту та реперфузійного ураження до аналізу сигнальних шляхів eNOS, відновлення ран за участю коннексинів, експресії ангіогенних генів та порушення щільних з’єднань під впливом аутофагії — ця лінія мікросудинних ендотеліальних клітин мишачого мозку внесла значний вклад у розуміння процесів у багатьох біомедичних дисциплінах. Її застосовність до досліджень хвороби Альцгеймера, черепно-мозкових травм та скринінгу нейропротекторних засобів ще більше зміцнює її місце в арсеналі інструментів нейробіологічних досліджень — за умови, що в експериментальному дизайні враховуються її обмежена герметичність бар’єру та трансформований фенотип. Дослідникам, які шукають добре охарактеризовану, відтворювану та зручну для експериментів модель ендотелію та транспорту через гематоенцефалічний бар’єр in vitro, рекомендується ознайомитися з клітинами Bend.3, доступними на сайті cytion.com, де наведено повні технічні характеристики продукту та інформацію щодо замовлення.

Ключові публікації

1. Montesano R, Pepper MS, Möhle-Steinlein U, et al. (1990) Підвищена протеолітична активність є причиною аномальної морфогенетичної поведінки ендотеліальних клітин, що експресують онкоген middle T. Cell 62:435–445. PMID: 2379237
2. Omidi Y, Campbell L, Barar J, та ін. (2003) Оцінка імморталізованої лінії ендотеліальних клітин капілярів мозку миші, b.End3, як моделі гематоенцефалічного бар’єру in vitro для досліджень поглинання та транспорту лікарських засобів. Brain Research 990:95–112. PMID: 14568334
3. Юен Д., Леу Р., Цзе Дж. та ін. (2014) Нова характеристика клітин bEnd.3, що експресують гіалурононовий рецептор-1 ендотелію лімфатичних судин. Lymphology 47:73–81. PMID: 25282873
4. Жубен К., Річардсон А., Новоа Н. та ін. (2012) Лінія ендотеліальних клітин bEnd.3 підтримує життєздатність людських плюрипотентних стовбурових клітин. «Stem Cells and Development» 21:2312–2321. PMID: 22224974
5. Song L, Pachter JS (2003) Культивування ендотеліальних клітин мікросудин головного мозку мишей, що зберігають експресію та асоціацію з цитоскелетом білків, пов’язаних із щільними з’єднаннями. In Vitro Cellular & Developmental Biology. Animal 39:313–320. PMID: 14613336
6. Кото Т., Такубо К., Ішида С. та ін. (2007) Гіпоксія порушує бар’єрну функцію нервових кровоносних судин через зміни в експресії клаудіну-5 в ендотеліальних клітинах. The American Journal of Pathology 170:1389–1397. PMID: 17392177
7. Кім К.А., Кім Д., Кім Дж.Х. та ін. (2020) Опосередкований аутофагією розпад оклюдину сприяє порушенню гематоенцефалічного бар’єру під час ішемії в ендотеліальних клітинах мозку bEnd.3 та моделях ішемічного інсульту у щурів. «Fluids and Barriers of the CNS» 17:21. PMID: 32169114
8. Ян М.З., Мун Ч.Х., Чой Й.Дж. та ін. (2007) Агматин інгібує матричну металопротеїназу-9 через ендотеліальну синтазу оксиду азоту в клітинах ендотелію головного мозку. Neurological Research 29:749–754. PMID: 17588309
9. Сє Й.Й., Лу Й.В., Ю Г.Р. (2022) Захисна дія гіперозиду на опотоз клітин bEnd.3, опосередкований ангіотензином II, та ушкодження моделі гематоенцефалічного бар’єру in vitro. BMC Complementary Medicine and Therapies 22:157. PMID: 35698113
10. Чен Ю. Ц., Ву Ц. Р., Ду М. Р. та ін. (2022) CircLphn3 захищає гематоенцефалічний бар’єр при черепно-мозковій травмі. «Дослідження нейральної регенерації» 17:812–818. PMID: 34472480
11. Чон Е.М., Мун Ч.Х., Кім Ч.С. та ін. (2004) Кадмій стимулює експресію ICAM-1 через активацію NF-kappaB у ендотеліальних клітинах судин головного мозку. Biochemical and Biophysical Research Communications 320:887–892. PMID: 15240131
12. Чжан Ц., Руй Ю.Ц., Ян П.Ю. та ін. (2006) C-реактивний білок індукував експресію молекул адгезії в культивованих ендотеліальних клітинах мікросудин головного мозку. Life Sciences 78:2983–2988. PMID: 16412476
13. Jung YS, Kim CS, Park HS та ін. (2003) N-нітрозокарбофуран індукує апоптоз у ендотеліальних клітинах мікросудин головного мозку мишей (bEnd.3). Journal of Pharmacological Sciences 93:489–495. PMID: 14737022
14. Цай Т.Й., Леонг І.Л., Ченг К.С. та ін. (2019) Цитотоксичність, індукована лізофосфатидилхоліном, та захист за допомогою гепарину в ендотеліальних клітинах bEND.3 головного мозку мишей. «Fundamental & Clinical Pharmacology» 33:52–62. PMID: 29974515
15. Ху Д., Шень Ц., Хоу С. та ін. (2025) Опосередкована ROCK реорганізація актину сприяє зниженню проліферації та міграції ендотеліальних клітин bEnd.3, оброблених флорфеніколом. «Журнал біохімічної та молекулярної токсикології» 39:e70453. PMID: 40826991
16. Чан Ю., Чен В., Чен Ю. та ін. (2020) Препарат «Yi-Zhi-Fang-Dai» чинить захисний ефект щодо пошкодження білків каркаса щільних з’єднань in vitro та in vivo шляхом опосередкування аутофагії через регуляцію шляху RAGE/CaMKKβ/AMPK/mTOR. «Biological & Pharmaceutical Bulletin» 43:1847–1858. PMID: 33268702
17. Сюн Р., Чжоу С.Г., Тан Ю. та ін. (2021) Поліфеноли насіння лічі захищають гематоенцефалічний бар’єр шляхом інгібування активації інфламмасоми NLRP3, індукованої Aβ(25-35), через аутофагію, опосередковану AMPK/mTOR/ULK1, у клітинах bEnd.3 та мишах APP/PS1. Phytotherapy Research 35:954–973. PMID: 32893437
18. Ma C, Ye Y, Shi X та ін. (2025) Фотобіомодуляція пом’якшує порушення гематоенцефалічного бар’єру в мишачій моделі хвороби Альцгеймера APP/PS1 шляхом активації шляху AMPK. Alzheimer’s Research & Therapy 17:141. PMID: 40551167
19. Юе Ф., Чжан Г.П., Цзінь Х.М. (2006) Вплив основного фактора росту фібробластів на експресію ангіогенного генного профілю та циклооксигенази-2 в ендотеліальних клітинах мікросудин головного мозку. «Sheng Li Xue Bao» 58:124–128. PMID: 16628358
20. Чжу Ю., Сунь Ю., Се Л. та ін. (2003) Гіпоксична індукція ендогліну через мітоген-активовані протеїнкінази в ендотеліальних клітинах мікросудин головного мозку мишей. Stroke 34:2483–2488. PMID: 12947156
21. Лі С., Чжоу Т., Чжі С. та ін. (2006) Вплив гіпоксії/реоксигенації на CD73 (екто-5'-нуклеотидазу) у лініях ендотеліальних клітин мікросудин мишей. Microvascular Research 72:48–53. PMID: 16828810
22. Ші Л. Г., Чжан Г. П., Цзінь Х. М. (2006) Пригнічення апоптозу ендотеліальних клітин мікросудин ангіопоетином-1 та участь цитохрому С. Chinese Medical Journal 119:725–730. PMID: 16701012
23. Perry BN, Govindarajan B, Bhandarkar SS та ін. (2006) Фармакологічна блокада ангіопоетину-2 є ефективною проти модельних гемангіом у мишей. The Journal of Investigative Dermatology 126:2316–2322. PMID: 16741507
24. Говерс Р., Беверс Л., де Брі П. та ін. (2002) Активність ендотеліальної синтази оксиду азоту пов’язана з її присутністю у місцях міжклітинних контактів. «The Biochemical Journal» 361:193–201. PMID: 11772391
25. Беверс Л. М., Браам Б., Пост Дж. А. та ін. (2006) Тетрагідробіоптерин, на відміну від L-аргініну, зменшує роз’єднання NO-синтази в клітинах, що експресують високі рівні ендотеліальної NO-синтази. «Гіпертонія» 47:87–94. PMID: 16344367
26. Квак Б. Р., Пеппер М. С., Грос Д. Б. та ін. (2001) Пригнічення ендотеліального відновлення пошкоджень домінантно-негативними інгібіторами коннексинів. «Молекулярна біологія клітини» 12:831–845. PMID: 11294890
27. Ван Х., Уорд Н., Босвелл М. та ін. (2006) Секреція нейротрофічного фактора, похідного з мозку, з ендотеліальних клітин мікросудин головного мозку. «Європейський журнал нейронауки» 23:1665–1670. PMID: 16553631