Въведение

The Bend.3 Клетки Клетъчната линия — известна също под синонимите bEND.3, b.End3, bEnd3, BEND-3, BEND3 и „ендотелиални клетки с произход от мозъка.3“ — представлява трансформирана линия от микросъдови ендотелиални клетки от миши мозък, която се е превърнала в един от най-широко използваните инструменти за in vitro изследвания в областта на невросъдовата биология. Линията е създадена от тъкан на ендотелиом от мозъка на мишка след трансформация с антигена „Middle T“ на полиомавируса — манипулация, която придава стабилна, неограничена способност за пролиферация, като същевременно запазва ключовите ендотелиални характеристики. От момента на охарактеризирането ѝ в началото на 90-те години на миналия век bEnd.3 служи като достъпен и възпроизводим сурогат за изучаване на кръвно-мозъчната бариера (КМБ), церебралната исхемия, инсулта, реперфузионното увреждане, ангиогенезата и биологията на ендотелните клетки в по-широк смисъл. Полезността му при моделиране на нарушаването на БББ в контекста на исхемичен инсулт, болестта на Алцхаймер и травматично мозъчно увреждане го е превърнала в широко използван инструмент както в фундаменталните, така и в транслационните изследвания в областта на невронауките.

Основни изводи

• bEnd.3 е трансформирана клетъчна линия от микросъдови ендотелиални клетки на мозъка на мишка, получена от мозъчна тъкан на мишка от линията BALB/c и трансформирана с антигена „Middle T“ на полиомавируса (регистрационен номер в Cellosaurus: CVCL_0170).
• Той се използва широко като in vitro модел на кръвно-мозъчната бариера за изследване на исхемичен инсулт, реперфузионно увреждане, болестта на Алцхаймер и невровъзпаление.
• Клетките експресират ключови маркери, свързани с кръвно-мозъчната бариера (КМБ), включително протеините на плътните съединения клаудин-5, оклудин и ZO-1, както и eNOS и PECAM-1.
• Клетките bEnd.3 експресират лимфни ендотелни маркери като LYVE-1 и VEGFR-3, което разширява тяхното приложение в изследванията в областта на съдовата биология.
• Клетъчната линия има време за удвояване от 26–30 часа, което я прави подходяща за експериментална работа в голям мащаб.
• Херметичността на бариерата е ограничена: максимално трансендотелиално електрическо съпротивление от приблизително 130 Ω·cm² беше достигнато само в кокултура с астроглиални клетки, а линията не прави ясно разграничение между маркерите за парацелуларна и трансцелуларна пропускливост.
• Доказано е, че клетките bEnd.3 подпомагат поддържането на човешки плюрипотентни стволови клетки в ролята си на поддържащи клетки, което разширява приложението им в биологията на стволовите клетки.

Какво представлява bEnd.3?

bEnd.3 е получен от мозъчна тъкан на 6-седмична мишка от линията BALB/c с неуточнени пол (Cellosaurus, номер на пробата CVCL_0170). Първоначалните ендотелиомни клетки са били получени чрез трансформация на миши ендотелни клетки с антигена „middle T“ (mT) на полиомавируса. Едно знаково проучване от 1990 г., проведено от Монтесано, Пепър и колеги, показа, че ендотелиомните клетки, експресиращи mT, проявяват значително повишена протеолитична активност — по-специално повишени нива на плазминогенен активатор от урокиназен тип, съчетани с намалено производство на инхибитор на плазминогенния активатор — и образуват големи кистозни структури, наподобяващи хемангиоми, във фибринови гелове, което обяснява дълбокото нарушаване на нормалното съдово развитие от страна на онкогена [1]. Тази механистична основа спомогна за определянето на трансформирания фенотип, който лежи в основата на биологичното поведение и полезността на bEnd.3 в експериментални условия.

Последващите изследвания за характеризиране определиха подробно морфологичния и молекулярния профил на клетъчната линия. Омиди и колегите му съобщават, че клетките bEnd.3 притежават характерна плоскоклетъчна морфология с форма на вретено в култура и експресират везикулно-асоциирани протеини, включително клатрин, кавеолин-1, флотилинин и динамин II, което съответства на активен механизъм за везикулен транспорт [2]. Същото проучване потвърди наличието на транскрипти за елементите на плътните съединения ZO-1, JAM, оклудин, клаудин-1 и клаудин-5, както и функционален прием на глюкоза, медииран от GLUT-1, и ефлукс, медииран от P-гликопротеин. При съвместна култура с астроглиални клетки C6 монослоевете достигнаха максимално трансендотелиално електрическо съпротивление от приблизително 130 Ω·cm², въпреки че авторите също така установиха, че клетките не правят значима разлика между пробите за парацелуларна и трансцелуларна пропускливост. По-късно Юен и колегите му съобщиха, че bEnd.3-клетките също експресират лимфни ендотелиални маркери LYVE-1 и VEGFR-3, както и маркери на прогенитори Sca-1 и CD133, и образуват капилярни тръбички при стимулация с TNF-алфа — откритие, което разшири биологичното значение на клетъчната линия отвъд класическите изследвания на кръвоносните съдове [3].

Предимства на bEnd.3

Едно от най-значимите предимства на bEnd.3 е нейната достъпност и практическа възпроизводимост. За разлика от първичните микросъдови ендотелни клетки на мозъка, които изискват трудоемки процедури по изолиране и притежават ограничена способност за пасажиране, bEnd.3 е безсмъртна линия, която може да се размножава надеждно в различни лаборатории. С време за удвояване от 26–30 часа клетките са подходящи за експерименти, изискващи голям брой еднородни клетки. Стабилната им експресия на ендотелиални маркери — включително протеините на плътните съединения клаудин-5, оклудин и ZO-1, както и eNOS и PECAM-1 — ги превръща в практичен заместител на мозъчния микросъдов ендотелиум в широк спектър от експериментални условия, при условие че се вземат предвид изброените по-долу ограничения, свързани с бариерната функция.

Многофункционалността на bEnd.3 обхваща множество изследователски дисциплини. В проучвания тази линия е използвана за моделиране на нарушаване на кръвно-мозъчната бариера по време на исхемичен инсулт и реперфузионно увреждане, за изследване на невровъзпалението, предизвикано от адхезионни молекули, за профилиране на експресията на ангиогенни гени и за проучване на междуклетъчната комуникация, медиирана от конексини. Освен това Joubin и колегите му доказаха, че клетките bEnd.3 могат да поддържат човешките плюрипотентни стволови клетки в недиференцирано състояние, като функционират като подхранващи клетки, които могат да бъдат генетично модифицирани — способност, която не се възпроизвежда лесно с краткоживеещи първични култури [4]. Тази широка област на приложение подчертава полезността на клетъчната линия в невронауките, съдовата биология, фармакологията и изследванията върху стволовите клетки.

Ограничения на bEnd.3

Въпреки широкото си приложение, bEnd.3 има значителни ограничения, когато се използва като модел на кръвно-мозъчната бариера. Омиди и колегите му измериха максимално трансендотелиално електрическо съпротивление от едва около 130 Ω·cm², като тази стойност беше постигната при съвместна култура с астроцити от линия C6; още по-важно е, че монослоевете показваха слаба разлика между трансцелуларните и парацелуларните сонди, като коефициентите на пропускливост за пропранолол и захароза се различаваха само незначително [2]. Авторите стигат до заключението, че тази линия не е подходяща за оценка на трансендотелиалната пропускливост, но остава ценна за изследвания на механизмите на транспорт през кръвно-мозъчната бариера. Данните за пропускливостта, получени в тази система, следва следователно да се тълкуват с предпазливост и, където е възможно, да се допълват със системи за съвместна култура или валидиране in vivo.

Самата организация на плътните съединения представлява свързана с това слабост. Song и Pachter сравниха bEnd.3 с прясно пречистени първични микроваскуларни ендотелни клетки от миши мозък и установиха, че докато първичните клетки концентрираха клаудин-5, оклудин и ZO-1 по междуклетъчните граници и разделяха оклудин и ZO-1 с устойчивата на детергенти цитоскелетна структура, клетките bEnd.3 показваха дифузна цитоплазмена локализация на оклудин и ZO-1 и задържаха тези протеини предимно в разтворимата фракция [5]. Следователно експресията на протеин от типа „плътни съединения“ в bEnd.3 сама по себе си не означава, че съединенията са сформирани правилно.

Променената природа на bEnd.3, произтичаща от експресията на онкогена mT, може също така да доведе до фенотипни артефакти, които не се срещат в нормалния церебрален ендотелиум. Повишената протеолитична активност — характерна особеност на ендотелиомните клетки, експресиращи mT [1] — а експресията на лимфни маркери като LYVE-1 и VEGFR-3 сочи, че клетъчната линия не възпроизвежда напълно нормалния ендотелиум на кръвоносните съдове [3]. Освен това полът на донора не е посочен за тази клетъчна линия, което ограничава приложимостта на резултатите към изследователски въпроси, структурирани по пол. Тези съображения не намаляват стойността на клетъчната линия, но подчертават важността на разбирането на нейния специфичен биологичен контекст.

Вижте пълните технически характеристики и поръчайте

Приложения

Моделиране на кръвно-мозъчната бариера и исхемичен инсулт

Най-известното приложение на bEnd.3 е като in vitro модел на кръвно-мозъчната бариера при исхемични и постисхемични състояния. Koto и колегите му демонстрираха, че хипоксията (1% O₂) променя локализацията и нивото на протеина клаудин-5 в монослоевете на bEnd.3, което води до измеримо намаление на трансендотелиалното електрическо съпротивление, и потвърдиха съответната загуба на клаудин-5 в микросъдовия ендотелиум на ретината in vivo [6]. Това установи механистична връзка между ремоделирането на плътните съединения и разрушаването на бариерата по време на невронална хипоксия и позиционира bEnd.3 като подходяща система за изучаване на молекулярните събития, лежащи в основата на провала на кръвно-мозъчната бариера при инсулт.

Често цитирано проучване на Ким и колеги използва клетъчната линия като in vitro модел на кръвно-мозъчната бариера (КМБ), изложена на лишаване от кислород и глюкоза (OGD), за да симулира исхемия. Осемнадесет часа OGD предизвикаха клетъчна дисфункция, повишена пропускливост, разграждане на оклудин и активиране на автофагичните пътища, като разграденият оклудин се локализираше заедно с исхемичните автофагозоми; както загубата на оклудин, така и промяната в пропускливостта бяха значително намалени от автофагичния инхибитор 3-метиладенин. Същите молекулярни промени и тяхното обратно въздействие чрез 3-метиладенин впоследствие бяха възпроизведени в мозъчните капиляри на плъхове, подложени на оклузия на средната мозъчна артерия [7]. Тази работа установи механистична рамка, свързваща автофагичния поток със загубата на протеини на плътните съединения, и предостави важни транслационни прозрения за патологията на инсулта.

Допълнителни изследвания показаха, че агматинът потиска експресията на матрични металопротеинази-2 и -9 в мозъчните ендотелиални клетки — включително bEnd.3 — подложени на увреждане от лишаване от кислород и глюкоза (OGD) и реперфузия, като понижената експресия на MMP-9 протича успоредно с повишената експресия на eNOS и поддържаното освобождаване на азотен оксид, което предлага потенциален невропротективен механизъм, свързан с мозъчни увреждания и увреждания от реперфузия [8]. Проучвания върху апоптозата, медиирана от Ang II, допълнително показаха, че хиперозидът предпазва bEnd.3 клетките и запазва целостта на монослоя на кръвно-мозъчната бариера (BBB) in vitro, като въздейства върху JAM-A, клаудин-5, ZO-1, кавеолин-1 и Mfsd2a, и предлага терапевтични пътища за цереброваскуларна защита [9]. Изследванията върху свръхекспресията на circLphn3 в bEnd.3 клетки също подчертаха ролята на некодиращата РНК в поддържането на експресията на протеини на плътните съединения — включително ZO-1, ZO-2 и оклудин — след травматично мозъчно увреждане, като circLphn3 действа като молекулна гъба за miR-185-5p [10].

Невровъзпаление, ендотелиална токсикология и болестта на Алцхаймер

Клетките bEnd.3 са широко използвани за изучаване на възпалителните сигнали в цереброваскуларния ендотелиум. Jeong и колегите му показаха, че кадмият — широко разпространен тежки метал, който се натрупва извън кръвно-мозъчната бариера (КМБ) — стимулира експресията на ICAM-1 в bEnd.3 клетките чрез активиране на NF-κB, предизвикано от тирозинова фосфорилация на IκBα, а не от неговата деградация, което предоставя механистична основа за индуцираната от кадмий цереброваскуларна токсичност [11]. По подобен начин Zhang и колегите му съобщават, че C-реактивният протеин в концентрации от 1–75 mg/L увеличава експресията на ICAM-1 и VCAM-1, както и изтичането на LDH в bEnd.3 клетките, което предполага пряка роля на този протеин на острата фаза в увреждането на кръвно-мозъчната бариера по време на исхемичен инсулт [12].

В тази клетъчна линия е изследвана и индуцираната от пестициди ендотелиална токсичност. Jung и колегите му демонстрираха, че N-нитрозокарбофуранът, нитрозометаболитът на карбаматния пестицид карбофуран, индуцира апоптоза в клетките bEnd.3 чрез MAP-киназните пътища, като ERK-пътят играе преобладаваща роля в клетъчната смърт [13]. Цитотоксичността, предизвикана от лизофосфатидилхолин в клетки bEnd.3, е изследвана от Tsai и колеги, които проследиха клетъчната смърт до претоварване с цитозолен калций, загуба на потенциала на митохондриалната мембрана, активирането на p38 и активирането на каспаза-3 — забележително без образуване на реактивни кислородни видове — и идентифицираха хепарина като защитен агент, действащ надолу по веригата от p38 [14]. По-скорошни изследвания върху лечението с флорфеникол документираха медиирано от ROCK/кофилин преструктуриране на F-актина, което допринася за намалена пролиферация и миграция в ендотелните клетки bEnd.3 [15].

В областта на изследванията на болестта на Алцхаймер bEnd.3 клетките са служили като модел за нарушаване на кръвно-мозъчната бариера, медиирано от амилоид-бета пептид. Чан и колегите му показаха, че предизвиканите от Aβ олигомери промени в автофагията в bEnd.3 клетките са блокирани от малка интерферираща РНК срещу RAGE, което свързва сигнализацията на RAGE чрез оста CaMKKβ/AMPK/mTOR с автофагия-зависимото увреждане на протеините на скелето на плътните съединения ZO-1, оклудин и клаудин-5 [16]. Отделно от това беше показано, че полифенолът от семена на личи предпазва целостта на кръвно-мозъчната бариера, като инхибира индуцираната от Aβ(25–35) активация на инфламазома NLRP3 чрез посредствания от AMPK/mTOR/ULK1 път на автофагията в bEnd.3 клетки, като резултатите бяха потвърдени при трансгенни мишки APP/PS1 — проучване, което допринесе за по-доброто разбиране на взаимодействието между автофагията и инфламазома на невросъдовия интерфейс [17]. Фотобиомодулацията е изследвана в същия контекст: Ма и колегите му използваха LPS-стимулирани bEnd.3 клетки, както и мишки APP/PS1, за да покажат, че лечението с близка инфрачервена светлина подобрява митохондриалния енергиен метаболизъм, повишава експресията на оклудин, клаудин-5 и ZO-1 и защитава целостта на бариерата по AMPK-зависим начин [18].

Ангиогенеза и съдово сигнализиране

bEnd.3 се е оказал изключително информативен в проучванията на ангиогенното сигнализиране. Юе и колегите му са използвали cDNA микрочип, за да профилират експресията на ангиогенните гени в bEnd.3 клетки, третирани с основен фибропластен растежен фактор (bFGF), като са идентифицирали повишена експресия на проангиогенни гени, включително ADAMTS1, MMP-9, ангиопоетин-1, PDGF-B и G-CSF, понижена експресия на антиангиогенни гени като TIMP-2 и TSP-3, както и индукция на циклооксигеназа-2 (COX-2) както на ниво мРНК, така и на ниво протеин [19]. Този подход с висока производителност утвърди bEnd.3 като удобна платформа за профилиране на ангиогенезата в геномна скала.

Ангиогенните реакции, предизвикани от хипоксия, също са картирани с помощта на bEnd.3 клетки. Zhu и колегите му демонстрираха, че хипоксията увеличава експресията на мРНК и протеина на ендоглин (CD105) в bEnd.3 клетките чрез активиране на p38 MAPK, като инхибиторите на този път — и доминантно-негативният MKK3 — потискат индукцията на ендоглин [20]. Тъй като ендоглинът е мутиран при наследствената хеморагична телеангиектазия и се регулира нагоре по време на активна ангиогенеза, тези открития свързват чувствителния към хипоксия MAPK сигнализационен път с патологичното съдово преобразуване. Ли и колегите му показаха освен това, че хипоксията регулира нагоре активността на CD73 (екто-5'-нуклеотидаза), мРНК и протеина в клетки bEnd.3 по времево-зависим начин, докато реоксигенацията първоначално обръща тази индукция, преди нивото на CD73 да се повиши отново при продължителна реоксигенация — което предполага, че образуването на аденозин действа като невропротективен механизъм по време на исхемия-реперфузия [21].

Сигнализацията на ангиопоетина е изследвана задълбочено, като за моделна система е използвана bEnd.3. Ши и колегите му създадоха безсерумен модел на апоптоза в bEnd.3 клетки и доказаха, че ангиопоетин-1 инхибира апоптозата на микросъдовите ендотелни клетки чрез механизъм, включващ намаляване на Bax, увеличаване на Bcl-2 и намалено освобождаване на цитохром С от митохондриите в цитоплазмата [22]. Perry и колегите му разшириха биологията на ангиопоетина към изследванията на хемангиомите, като демонстрираха конститутивна активация на рецептора Tie-2 при човешки хемангиоми в кърмаческа възраст и използваха клетки bEnd.3 като миши модел на хемангиомна система, в която фармакологичното инхибиране на продукцията на ангиопоетин-2 почти напълно преустанови растежа на тумора in vivo [23].

eNOS, конексини и ендотелиална функция

Биологията на ендотелната синтаза на азотен оксид (eNOS) е охарактеризирана в клетки bEnd.3 с значителна прецизност. Говерс и колегите му използваха имунофлуоресцентна микроскопия, за да покажат, че локализацията на eNOS на плазмената мембрана зависи в решаваща степен от междуклетъчния контакт, като се наблюдава силно обогатяване в местата на междуклетъчен контакт, наподобяващо модела на разпределение на PECAM-1, а не този на VE-кадхерин или плакоглобин, като активността на eNOS е по-висока в конфлуентни монослоеве в сравнение с субконфлуентните, въпреки непроменената експресия [24]. Това пространствено съотнасяне между локализацията и активността на eNOS изтъкна bEnd.3 като модел, при който физиологичният контекст на конфлуентен ендотелиум може да бъде значимо изследван.

Bevers и колегите му изследваха развързването на eNOS в bEnd.3 клетки, които експресират eNOS на нива, надвишаващи с повече от два порядъка тези на сравнителна ендотелиална линия, като същевременно липсват iNOS и nNOS. Те установиха, че добавката на тетрахидробиоптерин (BH4) увеличава производството на NO и намалява образуването на реактивни кислородни видове, докато добавянето на допълнително L-аргинин увеличава още повече VEGF-индуцираните ROS — което показва, че относителният дефицит на BH4, а не наличието на аргинин, е причината за развързването в този контекст [25]. Този резултат има пряко отношение към съдовите усложнения при състояния като хипертония и атеросклероза, при които продължителната свръхекспресия на eNOS може парадоксално да способства за оксидативния стрес.

Комуникацията чрез межклетъчни пролуки, медиирана от конексини, също е изследвана в bEnd.3 клетки. Квак и колегите му сравниха експресията на конексини и свързването между клетките преди и след механично нараняване на монослоеве от bEnd.3, като наблюдаваха предизвикано от раната повишаване на експресията на Cx43 и понижаване на експресията на Cx37 в мястото на увреждането, докато Cx40 остана незасегнат [26]. Стабилната трансфекция с доминантно-негативни инхибитори на конексините удължи времето, необходимо за пълно затваряне на раната, с около 50%, без да промени пролиферацията, миграцията на единични клетки или протеолитичната активност, което установява специфична роля на комуникацията чрез межклетъчни пролуки в координираното ендотелиално възстановяване на рани.

Секреция на невротрофични фактори и приложения с стволови клетки

Клетките bEnd.3 секретират невротрофични фактори, които действат върху околната невронна микросреда. Wang и колегите му демонстрираха, че невротрофичният фактор, произхождащ от мозъка (BDNF), се експресира и освобождава от клетките bEnd.3, като както продължителната, така и интермитентната хипоксия стимулират секрецията на BDNF — като интермитентната хипоксия е по-мощният стимул [27]. Индуцираното от хипоксия освобождаване на BDNF беше частично инхибирано от N-ацетил-L-цистеин и от миметик на супероксиддисмутазата, което сочи към участието на реактивни кислородни видове в невротрофичното сигнализиране, предизвикано от хипоксия, и изискваше мобилизация на калций от вътрешни резерви. Тези открития утвърдиха микросъдовия ендотелиум на мозъка като активен участник в оцеляването на невроните, а не просто като пасивна бариера.

Най-впечатляващо е, че Joubin и колегите му показаха, че bEnd.3 клетките поддържат човешките плюрипотентни стволови клетки в недиференцирано състояние, като секретират разтворима активност, която имитира нишата, осигурявана от ембрионални фибробласти на мишки [4]. Авторите допълнително демонстрираха, че bEnd.3 клетките могат да бъдат генетично модифицирани да експресират флуоресцентни репортери или гени за лекарствена резистентност, създавайки специално проектирани подхранващи слоеве за култивиране на стволови клетки — приложение, което значително разширява полезността на клетъчната линия отвъд класическите ендотелиални изследвания.

Заключение

bEnd.3 остава една от най-многофункционалните и продуктивни клетъчни линии в изследванията на невросъдовата система и кръвно-мозъчната бариера. От моделиране на исхемичен инсулт и увреждане при реперфузия до анализ на eNOS сигнализацията, възстановяването на рани, медиирано от конексини, експресията на ангиогенни гени и нарушаването на плътните съединения, предизвикано от автофагията, тази клетъчна линия от микроваскуларни ендотелиални клетки от миши мозък е допринесла за по-доброто разбиране в множество биомедицински дисциплини. Нейната приложимост към въпроси, свързани с болестта на Алцхаймер, травматични мозъчни увреждания и скрининг на невропротективни средства, допълнително затвърждава мястото ѝ в набора от инструменти за неврологични изследвания — при условие че ограничената ѝ бариерна плътност и трансформираният ѝ фенотип бъдат отчетени в експерименталния дизайн. Изследователите, които търсят добре характеризиран, възпроизводим и експериментално управляем in vitro модел на ендотелиални клетки и транспорт през кръвно-мозъчната бариера (BBB), се насърчават да проучат клетките Bend.3, достъпни на cytion.com, където са предоставени пълни спецификации на продукта и информация за поръчка.

Ключови публикации

1. Montesano R, Pepper MS, Möhle-Steinlein U, et al. (1990) Повишената протеолитична активност е отговорна за анормалното морфогенетично поведение на ендотелните клетки, експресиращи онкогена middle T. Cell 62:435–445. PMID: 2379237
2. Omidi Y, Campbell L, Barar J, et al. (2003) Оценка на иммортализираната клетъчна линия от капилярни ендотелиални клетки на мишия мозък, b.End3, като in vitro модел на кръвно-мозъчната бариера за изследвания на усвояването и транспорта на лекарства. Brain Research 990:95–112. PMID: 14568334
3. Юен Д., Леу Р., Цзе Дж. и др. (2014) Нова характеристика на клетките bEnd.3, които експресират хиалуронан-рецептор-1 на ендотелиалните клетки на лимфните съдове. Lymphology 47:73–81. PMID: 25282873
4. Joubin K, Richardson A, Novoa N и др. (2012) Ендотелната клетъчна линия bEnd.3 поддържа човешки плюрипотентни стволови клетки. Stem Cells and Development 21:2312–2321. PMID: 22224974
5. Song L, Pachter JS (2003) Култивиране на микроваскуларни ендотелни клетки от миши мозък, които поддържат експресията и цитоскелетната асоциация на протеини, свързани с плътните съединения. In Vitro Cellular & Developmental Biology. Animal 39:313–320. PMID: 14613336
6. Кото Т., Такубо К., Ишида С. и др. (2007) Хипоксията нарушава бариерната функция на невронните кръвоносни съдове чрез промени в експресията на клаудин-5 в ендотелните клетки. The American Journal of Pathology 170:1389–1397. PMID: 17392177
7. Ким К.А., Ким Д., Ким Дж.Х. и др. (2020) Разграждането на оклудин, медиирано от автофагия, допринася за нарушаването на кръвно-мозъчната бариера по време на исхемия в мозъчни ендотелиални клетки bEnd.3 и модели на исхемичен инсулт при плъхове. „Fluids and Barriers of the CNS“ 17:21. PMID: 32169114
8. Ян М.З., Мун Ч.Х., Чой Й.Дж. и др. (2007) Агматинът инхибира матричната металопротеиназа-9 чрез ендотелиалната синтаза на азотен оксид в мозъчните ендотелиални клетки. Neurological Research 29:749–754. PMID: 17588309
9. Xie YY, Lu YW, Yu GR (2022) Защитните ефекти на хиперозида върху медиираната от Ang II апоптоза на bEnd.3 клетки и увреждането на модела на кръвно-мозъчната бариера in vitro. BMC Complementary Medicine and Therapies 22:157. PMID: 35698113
10. Ченг Й.К., Уу Ч.Р., Ду М.Р. и др. (2022) CircLphn3 предпазва кръвно-мозъчната бариера при травматично мозъчно увреждане. „Изследвания върху неврорегенерацията“ 17:812–818. PMID: 34472480
11. Jeong EM, Moon CH, Kim CS и др. (2004) Кадмият стимулира експресията на ICAM-1 чрез активиране на NF-kappaB в цереброваскуларните ендотелни клетки. Biochemical and Biophysical Research Communications 320:887–892. PMID: 15240131
12. Zhang J, Rui YC, Yang PY и др. (2006) C-реактивният протеин индуцира експресията на адхезионни молекули в култивирани ендотелиални клетки от мозъчните микросъдове. Life Sciences 78:2983–2988. PMID: 16412476
13. Jung YS, Kim CS, Park HS и др. (2003) N-нитрозокарбофуран индуцира апоптоза в микроваскуларни ендотелиални клетки от мозъка на мишки (bEnd.3). Journal of Pharmacological Sciences 93:489–495. PMID: 14737022
14. Tsai TY, Leong IL, Cheng KS и др. (2019) Цитотоксичност, предизвикана от лизофосфатидилхолин, и защита чрез хепарин в ендотелните клетки bEND.3 от мозъка на мишки. Fundamental & Clinical Pharmacology 33:52–62. PMID: 29974515
15. Ху Д., Шен З., Хоу Х. и др. (2025) Опосредстваното от ROCK преструктуриране на актина допринася за намалената пролиферация и миграция на ендотелните клетки bEnd.3, третирани с флорфеникол. Списание за биохимична и молекулярна токсикология 39:e70453. PMID: 40826991
16. Чан Й., Чен У., Чен Й. и др. (2020) Формулата „Yi-Zhi-Fang-Dai“ оказва защитен ефект върху увреждането на протеините на скелето на плътните съединения in vitro и in vivo, като медиира автофагията чрез регулиране на пътя RAGE/CaMKKβ/AMPK/mTOR. Biological & Pharmaceutical Bulletin 43:1847–1858. PMID: 33268702
17. Xiong R, Zhou XG, Tang Y, и др. (2021) Полифенолът от семена на личи предпазва кръвно-мозъчната бариера чрез инхибиране на индуцираната от Aβ(25-35) активация на инфламазома NLRP3 посредством автофагията, медиирана от AMPK/mTOR/ULK1, в клетки bEnd.3 и мишки APP/PS1. Phytotherapy Research 35:954–973. PMID: 32893437
18. Ma C, Ye Y, Shi X и др. (2025) Фотобиомодулацията смекчава нарушаването на кръвно-мозъчната бариера в мишия модел на болестта на Алцхаймер APP/PS1 чрез активиране на AMPK пътя. Alzheimer's Research & Therapy 17:141. PMID: 40551167
19. Юе Ф., Джан Г.П., Джин Х.М. (2006) Ефекти на основния фибропластен растежен фактор върху експресията на ангиогенния генен профил и циклооксигеназа-2 в ендотелните клетки на мозъчните микросъдове. Sheng Li Xue Bao 58:124–128. PMID: 16628358
20. Zhu Y, Sun Y, Xie L и др. (2003) Хипоксична индукция на ендоглин чрез митоген-активирани протеинкинази в ендотелните клетки на микросъдовете на мозъка при мишки. Stroke 34:2483–2488. PMID: 12947156
21. Ли X, Жоу Т, Жи X и др. (2006) Ефект на хипоксията/реоксигенацията върху CD73 (екто-5'-нуклеотидаза) в клетъчни линии на ендотелиални клетки от микросъдовете на мишки. Microvascular Research 72:48–53. PMID: 16828810
22. Shi LG, Zhang GP, Jin HM (2006) Инхибиране на апоптозата на ендотелните клетки на микросъдовете чрез ангиопоетин-1 и участието на цитохром С. Chinese Medical Journal 119:725–730. PMID: 16701012
23. Perry BN, Govindarajan B, Bhandarkar SS и др. (2006) Фармакологичната блокада на ангиопоетин-2 е ефективна срещу моделни хемангиоми при мишки. The Journal of Investigative Dermatology 126:2316–2322. PMID: 16741507
24. Говерс Р., Беверс Л., де Бри П. и др. (2002) Активността на ендотелната азотен оксид синтеза е свързана с нейното присъствие в междуклетъчните контакти. The Biochemical Journal 361:193–201. PMID: 11772391
25. Беверс Л.М., Браам Б., Пост Дж.А. и др. (2006) Тетрахидробиоптеринът, но не и L-аргининът, намалява развързването на NO-синтазата в клетки, изразяващи високи нива на ендотелиална NO-синтаза. „Хипертония“ 47:87–94. PMID: 16344367
26. Квак Б.Р., Пепър М.С., Грос Д.Б. и др. (2001) Инхибиране на ендотелиалното възстановяване на рани чрез доминантно-негативни инхибитори на коннексините. Molecular Biology of the Cell 12:831–845. PMID: 11294890
27. Wang H, Ward N, Boswell M и др. (2006) Секреция на невротрофичен фактор с мозъчен произход от ендотелните клетки на мозъчните микросъдове. The European Journal of Neuroscience 23:1665–1670. PMID: 16553631