บทนำ

The เซลล์ Bend.3 สายเซลล์ — ซึ่งยังเป็นที่รู้จักด้วยชื่ออื่น ๆ เช่น bEND.3, b.End3, bEnd3, BEND-3, BEND3 และ brain-derived Endothelial cells.3 — เป็นสายเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดขนาดเล็กในสมองของหนูที่ผ่านการดัดแปลง ซึ่งได้กลายเป็นหนึ่งในเครื่องมือทดลองในหลอดทดลอง (in vitro) ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดในชีววิทยาประสาทหลอดเลือด สายเซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นจากเนื้อเยื่อเนื้องอกเยื่อบุหลอดเลือดสมองของหนู หลังจากผ่านกระบวนการแปลงด้วยแอนติเจน T กลางของไวรัสโพลีโอมา ซึ่งเป็นกระบวนการที่มอบความสามารถในการเพิ่มจำนวนเซลล์อย่างเสถียรและไม่มีขีดจำกัด ในขณะที่ยังคงรักษาลักษณะสำคัญของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไว้ ตั้งแต่การกำหนดลักษณะในช่วงต้นทศวรรษ 1990 bEnd.3 ได้ทำหน้าที่เป็นตัวแทนที่เข้าถึงได้ง่ายและสามารถทำซ้ำได้สำหรับการศึกษาเกี่ยวกับกำแพงเลือด-สมอง (BBB) การขาดเลือดในสมอง โรคหลอดเลือดสมอง การบาดเจ็บจากการไหลเวียนเลือดกลับ การสร้างหลอดเลือดใหม่ และชีววิทยาของเซลล์เอนโดเทลิอัมในวงกว้าง ประโยชน์ของมันในการสร้างแบบจำลองการรบกวนของ BBB ในบริบทของโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือด โรคอัลไซเมอร์ และบาดเจ็บสมองจากแรงกระแทก ทำให้มันกลายเป็นเครื่องมือที่ได้รับการใช้อย่างแพร่หลายทั้งในวิจัยประสาทวิทยาศาสตร์พื้นฐานและวิจัยประสาทวิทยาศาสตร์เชิงประยุกต์

จุดสำคัญที่ควรจดจำ

• bEnd.3 เป็นสายเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครเวสคิวลาร์ของสมองหนูที่ถูกดัดแปลง ซึ่งได้มาจากเนื้อเยื่อสมองของหนู BALB/c และถูกดัดแปลงด้วยแอนติเจน T กลางของไวรัสโพลีโอมา (Cellosaurus accession CVCL_0170)
• มันถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองของกำแพงเลือด-สมอง เพื่อศึกษาโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือด การบาดเจ็บจากการไหลเวียนเลือดกลับคืน โรคอัลไซเมอร์ และการอักเสบของระบบประสาท
• เซลล์เหล่านี้แสดงตัวบ่งชี้สำคัญที่เกี่ยวข้องกับ BBB ซึ่งรวมถึงโปรตีนที่สร้างจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junction proteins) เช่น claudin-5, occludin และ ZO-1 รวมถึง eNOS และ PECAM-1
• เซลล์ bEnd.3 แสดงตัวบ่งชี้ของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดลิมฟาติก เช่น LYVE-1 และ VEGFR-3 ซึ่งช่วยขยายความสำคัญของเซลล์เหล่านี้ในการวิจัยด้านชีววิทยาของระบบหลอดเลือด
• สายเซลล์นี้มีเวลาเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าอยู่ที่ 26–30 ชั่วโมง ซึ่งทำให้เหมาะสำหรับการทดลองในขนาดใหญ่
• ความแน่นของชั้นกั้นมีข้อจำกัด: ค่าความต้านทานไฟฟ้าผ่านเซลล์เอนโดเทลิอัมสูงสุดประมาณ 130 Ω·cm² พบได้เฉพาะในระบบการเพาะเลี้ยงร่วมของเซลล์แอสโตรเกลียเท่านั้น และเส้นแบ่งนี้ไม่สามารถแยกแยะตัวบ่งชี้ความซึมผ่านแบบพาราเซลล์ลาร์และแบบทรานส์เซลล์ลาร์ได้อย่างชัดเจน
• มีการพิสูจน์แล้วว่าเซลล์ bEnd.3 สามารถช่วยรักษาสภาพของเซลล์ต้นกำเนิดพลูริโพเทนต์ของมนุษย์ในฐานะเซลล์เลี้ยง ซึ่งช่วยขยายขอบเขตการประยุกต์ใช้ในสาขาชีววิทยาเซลล์ต้นกำเนิด

bEnd.3 คืออะไร?

bEnd.3 ได้มาจากเนื้อสมองของหนู BALB/c อายุ 6 สัปดาห์ ซึ่งไม่ระบุเพศ (Cellosaurus accession CVCL_0170) เซลล์เอนโดเทลิโอมาต้นแบบถูกสร้างขึ้นโดยการแปลงเซลล์เอนโดเทลิโอมาของหนูด้วยแอนติเจน middle T (mT) ของไวรัสโพลีโอมา การศึกษาสำคัญในปี 1990 โดย Montesano, Pepper และเพื่อนร่วมงาน ได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์เอนโดเทลิโอมาที่แสดงออกแอนติเจน mT มีกิจกรรมโปรตีโอไลติกที่เพิ่มขึ้นอย่างชัดเจน — โดยเฉพาะอย่างยิ่งการเพิ่มขึ้นของยูโรคินาส-ไทป์พลาสมิโนเจนแอคทิเวเตอร์ พร้อมกับการลดลงของการผลิตพลาสมิโนเจนแอคทิเวเตอร์อินฮิบิเตอร์ — และก่อตัวเป็นโครงสร้างซีสติกขนาดใหญ่คล้ายฮีมางจิโอมาภายในเจลไฟบริน ซึ่งอธิบายถึงการแทรกแซงอย่างลึกซึ้งของยีนก่อมะเร็งต่อการพัฒนาหลอดเลือดปกติ [1]. พื้นฐานเชิงกลไกนี้ช่วยกำหนดลักษณะทางฟีโนไทป์ที่เปลี่ยนแปลงไป ซึ่งเป็นพื้นฐานของพฤติกรรมทางชีวภาพและประโยชน์ของ bEnd.3 ในสภาพแวดล้อมการทดลอง

งานวิเคราะห์ลักษณะต่อมาได้กำหนดลักษณะทางสัณฐานวิทยาและโมเลกุลของสายเซลล์นี้อย่างละเอียด Omidi และเพื่อนร่วมงานได้รายงานว่า เซลล์ bEnd.3 แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบสแควมัสที่มีรูปร่างคล้ายแกนหมุนอย่างชัดเจนในสภาพเพาะเลี้ยง และแสดงการออกฤทธิ์ของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับเวสิเคิล รวมถึง clathrin, caveolin-1, flotillin และ dynamin II ซึ่งสอดคล้องกับกลไกการขนส่งเวสิเคิลที่ทำงานอย่างแข็งขัน [2]. การศึกษาเดียวกันนี้ได้ยืนยันการมีอยู่ของทรานสคริปต์สำหรับองค์ประกอบของจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junctions) ได้แก่ ZO-1, JAM, occludin, claudin-1 และ claudin-5 รวมถึงการดูดกลูโคสที่ทำงานผ่าน GLUT-1 และการขับออกของ P-glycoprotein ในการเพาะเลี้ยงร่วม (co-culture) กับเซลล์แอสโตรกลิอา C6 ชั้นเซลล์เดียว (monolayers) มีค่าความต้านทานไฟฟ้าผ่านเยื่อบุหลอดเลือดสูงสุดประมาณ 130 Ω·cm² แม้ว่าผู้วิจัยจะพบว่าเซลล์เหล่านี้ไม่สามารถแยกแยะได้อย่างมีนัยสำคัญระหว่างตัวชี้วัดความซึมผ่านแบบพาราเซลลูลาร์ (paracellular) และแบบทรานส์เซลลูลาร์ (transcellular) Yuen และเพื่อนร่วมงานได้รายงานในภายหลังว่าเซลล์ bEnd.3 ยังแสดงตัวบ่งชี้ของเซลล์เยื่อบุหลอดน้ำเหลือง LYVE-1 และ VEGFR-3 รวมถึงตัวบ่งชี้ของเซลล์ต้นกำเนิด Sca-1 และ CD133, และสร้างท่อแบบหลอดเลือดฝอยเมื่อได้รับการกระตุ้นด้วย TNF-alpha — การค้นพบนี้ช่วยขยายความสำคัญทางชีววิทยาของสายเซลล์นี้ให้เกินขอบเขตการวิจัยระบบหลอดเลือดแบบดั้งเดิม [3].

ข้อดีของ bEnd.3

หนึ่งในข้อได้เปรียบที่สำคัญที่สุดของ bEnd.3 คือความเข้าถึงได้ง่ายและความสามารถในการทำซ้ำได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งต่างจากเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครในสมองแบบปฐมภูมิ ที่ต้องผ่านขั้นตอนการแยกเซลล์ที่ยุ่งยากและมีความสามารถในการเพาะเลี้ยงซ้ำได้จำกัด bEnd.3 เป็นสายเซลล์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะ ซึ่งสามารถขยายจำนวนได้อย่างน่าเชื่อถือใน laboratorium ต่าง ๆ ด้วยเวลาเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่า (doubling time) อยู่ที่ 26–30 ชั่วโมง เซลล์เหล่านี้จึงเหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการทดลองที่ต้องการเซลล์จำนวนใหญ่ที่มีลักษณะสม่ำเสมอ การแสดงออกที่เสถียรของมาร์กเกอร์เซลล์เอนโดเทลิอัม — รวมถึงโปรตีนที่สร้างจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junction proteins) อย่าง claudin-5, occludin, และ ZO-1 รวมถึง eNOS และ PECAM-1 — ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นทางเลือกที่ใช้งานได้จริงสำหรับเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครในสมองในสภาพการทดลองที่หลากหลาย โดยต้องคำนึงถึงข้อจำกัดเกี่ยวกับหน้าที่ของเกราะกั้นที่อธิบายไว้ด้านล่าง

ความหลากหลายของ bEnd.3 ขยายตัวไปทั่วหลายสาขาการวิจัย การศึกษาต่าง ๆ ได้ใช้สายเซลล์นี้เพื่อสร้างแบบจำลองการรบกวนของ BBB (เลือด-สมอง) ระหว่างโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือดและอาการบาดเจ็บจากการไหลเวียนเลือดกลับคืนมา ศึกษาการอักเสบของระบบประสาทที่เกิดจากโมเลกุลยึดติด วิเคราะห์รูปแบบการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสร้างหลอดเลือด และสำรวจการสื่อสารระหว่างเซลล์ที่อาศัยคอนเน็กซิน นอกจากนี้ Joubin และคณะได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ bEnd.3 สามารถรักษาเซลล์ต้นกำเนิดพลูริโพเทนต์ของมนุษย์ให้อยู่ในสภาพที่ยังไม่แยกตัวได้ โดยทำหน้าที่เป็นเซลล์ผู้เลี้ยงที่สามารถถูกดัดแปลงทางพันธุกรรม — ซึ่งเป็นความสามารถที่ไม่อาจทำซ้ำได้ง่ายๆ ด้วยวัฒนธรรมเซลล์ปฐมภูมิที่มีอายุสั้น [4]. ความกว้างขวางในการประยุกต์ใช้นี้แสดงให้เห็นถึงประโยชน์ของสายเซลล์นี้ในสาขาต่าง ๆ เช่น วิทยาศาสตร์ประสาท ชีววิทยาหลอดเลือด เภสัชวิทยา และวิจัยเซลล์ต้นกำเนิด

ข้อจำกัดของ bEnd.3

แม้จะถูกใช้อย่างแพร่หลาย แต่ bEnd.3 มีข้อจำกัดสำคัญเมื่อนำมาใช้เป็นแบบจำลอง BBB Omidi และคณะได้วัดค่าความต้านทานไฟฟ้าสูงสุดผ่านเซลล์เอนโดเทลที่เพียงประมาณ 130 Ω·cm² เท่านั้น และค่าดังกล่าวจำเป็นต้องมีการเพาะเลี้ยงร่วม (co-culture) กับเซลล์แอสโตรกลิอา C6; ที่สำคัญกว่านั้น ชั้นเซลล์เดี่ยวแสดงให้เห็นว่ามีความแตกต่างเพียงเล็กน้อยระหว่างตัวตรวจวัดแบบผ่านเซลล์ (transcellular) และแบบระหว่างเซลล์ (paracellular) โดยค่าสัมประสิทธิ์การซึมผ่านของโปรพราโนลอลและซูโครสมีความแตกต่างเพียงเล็กน้อยเท่านั้น [2]. ผู้เขียนสรุปว่าวิธีการนี้ไม่เหมาะสมสำหรับการประเมินความซึมผ่านของเซลล์เอนโดเทล แต่ยังคงมีประโยชน์สำหรับการศึกษาเกี่ยวกับกลไกการขนส่งของ BBB ดังนั้น ข้อมูลความซึมผ่านที่ได้จากระบบนี้ควรได้รับการตีความอย่างระมัดระวัง และหากเป็นไปได้ ควรเสริมด้วยระบบการเพาะเลี้ยงร่วมหรือการตรวจสอบความถูกต้องในร่างกายจริง

การจัดเรียงของจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junctions) เองก็เป็นจุดอ่อนที่เกี่ยวข้อง Song และ Pachter ได้เปรียบเทียบ bEnd.3 กับเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครของสมองหนูแบบปฐมภูมิที่เพิ่งถูกแยกบริสุทธิ์ และพบว่า ในขณะที่เซลล์ปฐมภูมิมีการรวมตัวของ claudin-5, occludin และ ZO-1 ตามแนวขอบระหว่างเซลล์ และแบ่ง occludin และ ZO-1 กับโครงร่างไซโตสเกเลตันที่ต้านทานสารซักฟอก เซลล์ bEnd.3 กลับแสดงการกระจายตัวของ occludin และ ZO-1 ในไซโทพลาซึมอย่างแพร่หลาย และเก็บรักษาโปรตีนเหล่านี้ไว้ส่วนใหญ่ในส่วนที่ละลายได้ [5]. ดังนั้น การแสดงออกของโปรตีนที่สร้างจุดต่อแน่นใน bEnd.3 จึงไม่ได้หมายความโดยตัวมันเองว่าจุดต่อนั้นถูกจัดเรียงอย่างถูกต้อง

ลักษณะที่เปลี่ยนแปลงของ bEnd.3 ซึ่งเกิดจากการแสดงออกของยีนมะเร็ง mT อาจก่อให้เกิดความผิดปกติทางฟีโนไทป์ที่ไม่มีอยู่ในเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดสมองปกติด้วยเช่นกัน กิจกรรมโปรตีโอไลติกที่เพิ่มขึ้น — ซึ่งเป็นลักษณะเด่นของเซลล์เอนโดเทลิโอมาที่แสดงออกของ mT [1] — และการแสดงออกของตัวบ่งชี้ระบบน้ำเหลือง เช่น LYVE-1 และ VEGFR-3 ชี้ให้เห็นว่าสายเซลล์นี้ไม่สามารถจำลองเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดในเลือดปกติได้อย่างสมบูรณ์ [3]. นอกจากนี้ เพศของผู้บริจาคในสายเซลล์นี้ยังไม่ได้รับการระบุ ซึ่งทำให้ผลการวิจัยนี้ไม่สามารถนำไปใช้กับคำถามวิจัยที่แบ่งตามเพศได้อย่างเต็มที่ ข้อพิจารณาเหล่านี้ไม่ได้ลดคุณค่าของสายเซลล์นี้ แต่กลับเน้นย้ำถึงความสำคัญของการเข้าใจบริบททางชีววิทยาเฉพาะของมัน

ดูข้อมูลจำเพาะทั้งหมดและสั่งซื้อ

การใช้งาน

การสร้างแบบจำลองของกำแพงเลือด-สมองและโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือด

การประยุกต์ใช้ที่โดดเด่นที่สุดของ bEnd.3 คือในฐานะแบบจำลองในหลอดทดลองของกำแพงเลือด-สมองภายใต้สภาวะขาดเลือดและหลังขาดเลือด Koto และเพื่อนร่วมงานได้แสดงให้เห็นว่าภาวะขาดออกซิเจน (1% O₂) ทำให้ตำแหน่งและระดับโปรตีนของ claudin-5 ในชั้นเซลล์เดียวของ bEnd.3 เปลี่ยนแปลง ซึ่งก่อให้เกิดการลดลงที่วัดได้ของความต้านทานไฟฟ้าผ่านเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือด และยืนยันการสูญเสีย claudin-5 ที่สอดคล้องกันในเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดไมโครของจอตาในร่างกาย [6]. สิ่งนี้ได้ก่อให้เกิดความเชื่อมโยงเชิงกลไกระหว่างการปรับโครงสร้างของจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junction) กับการพังทลายของกำแพงเลือด-สมอง (BBB) ระหว่างภาวะขาดออกซิเจนในระบบประสาท และทำให้ bEnd.3 กลายเป็นระบบที่จัดการได้ง่ายสำหรับการศึกษาเหตุการณ์ระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการล้มเหลวของ BBB ในโรคหลอดเลือดสมอง

การศึกษาที่ได้รับการอ้างอิงบ่อยครั้งของ Kim และคณะ ได้ใช้สายเซลล์นี้เป็นแบบจำลอง BBB ในหลอดทดลองที่ถูกทำให้ขาดออกซิเจนและกลูโคส (OGD) เพื่อจำลองภาวะขาดเลือด การขาดออกซิเจนและกลูโคส (OGD) เป็นเวลา 18 ชั่วโมง ทำให้เกิดการทำงานผิดปกติของเซลล์ ความซึมผ่านที่เพิ่มขึ้น การสลายตัวของ occludin และการกระตุ้นเส้นทางออโตฟาจี โดย occludin ที่สลายตัวจะอยู่ร่วมกับออโตฟาโกโซมในภาวะขาดเลือด ทั้งการสูญเสีย occludin และการเปลี่ยนแปลงความซึมผ่านถูกลดลงอย่างชัดเจนด้วยสารยับยั้งออโตฟาจี 3-methyladenine การเปลี่ยนแปลงระดับโมเลกุลเดียวกันนี้ รวมถึงการกลับคืนสู่สภาพเดิมโดย 3-methyladenine ได้ถูกจำลองขึ้นในหลอดเลือดฝอยสมองของหนูที่ถูกทำให้หลอดเลือดสมองส่วนกลางอุดตัน [7] งานวิจัยนี้ได้สร้างกรอบกลไกที่เชื่อมโยงการไหลของออโตฟาจีกับการสูญเสียโปรตีนที่จุดเชื่อมต่อแน่น และให้ข้อมูลเชิงลึกที่สำคัญสำหรับการประยุกต์ใช้ในทางคลินิกเกี่ยวกับพยาธิสภาพของโรคหลอดเลือดสมอง

การวิจัยเสริมได้แสดงให้เห็นว่า agmatine ช่วยลดการแสดงออกของเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีเนส-2 และ -9 ในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดสมอง — รวมถึง bEnd.3 — ที่ได้รับบาดเจ็บจากภาวะขาดออกซิเจนและเลือดไหลกลับ (OGD-reperfusion injury), โดยการลดการแสดงออกของ MMP-9 เกิดขึ้นพร้อมกับการเพิ่มการแสดงออกของ eNOS และการรักษาการปล่อยออกซิเจนไนตริกอย่างต่อเนื่อง ซึ่งเสนอกลไกการป้องกันระบบประสาทที่อาจเกี่ยวข้องกับการบาดเจ็บของสมองและบาดเจ็บจากภาวะเลือดไหลกลับ [8]. การศึกษาเกี่ยวกับกระบวนการตายของเซลล์ (apoptosis) ที่เกิดจาก Ang II ยังแสดงให้เห็นว่า hyperoside ช่วยปกป้องเซลล์ bEnd.3 และรักษาความสมบูรณ์ของชั้นเซลล์ BBB ในหลอดทดลอง โดยออกฤทธิ์ต่อ JAM-A, claudin-5, ZO-1, caveolin-1 และ Mfsd2a ซึ่งชี้ให้เห็นแนวทางรักษาเพื่อปกป้องระบบหลอดเลือดสมอง [9]. การวิจัยเกี่ยวกับการแสดงออกเกินของ circLphn3 ในเซลล์ bEnd.3 ยังเน้นย้ำถึงบทบาทของ RNA ที่ไม่เข้ารหัสในการรักษาการแสดงออกของโปรตีนที่จุดเชื่อมต่อแน่น — รวมถึง ZO-1, ZO-2 และ occludin — หลังจากเกิดการบาดเจ็บสมองแบบรุนแรง โดยที่ circLphn3 ทำหน้าที่เป็น “ฟองน้ำโมเลกุล” สำหรับ miR-185-5p [10].

การอักเสบของระบบประสาท, พิษวิทยาของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือด, และโรคอัลไซเมอร์

เซลล์ bEnd.3 ได้ถูกใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาสัญญาณการอักเสบที่เยื่อบุหลอดเลือดสมอง Jeong และเพื่อนร่วมงานได้แสดงให้เห็นว่า แคดเมียม — โลหะหนักที่พบได้ทั่วไปและสะสมตัวอยู่ด้านนอกของ BBB — กระตุ้นการแสดงออกของ ICAM-1 ในเซลล์ bEnd.3 ผ่านการกระตุ้น NF-κB ที่เกิดจากกระบวนการฟอสโฟรีเลชันของไทโรซีนใน IκBα แทนที่จะเป็นการสลายตัวของมัน ซึ่งให้พื้นฐานทางกลไกสำหรับความเป็นพิษต่อหลอดเลือดสมองที่เกิดจากแคดเมียม [11]. ในทำนองเดียวกัน Zhang และคณะรายงานว่า โปรตีน C-reactive ในความเข้มข้น 1–75 mg/L เพิ่มการแสดงออกของ ICAM-1 และ VCAM-1 รวมถึงการรั่วของ LDH ในเซลล์ bEnd.3 ซึ่งชี้ให้เห็นถึงบทบาทโดยตรงของโปรตีนระยะเฉียบพลันนี้ในการบาดเจ็บของ BBB ระหว่างโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือด [12].

ความเป็นพิษต่อเซลล์บุผนังหลอดเลือดที่เกิดจากสารกำจัดศัตรูพืชก็ได้รับการศึกษาในสายเซลล์นี้เช่นกัน Jung และคณะได้แสดงให้เห็นว่า N-nitrosocarbofuran ซึ่งเป็นสารเมแทบอลิตรูปไนโตรโซของสารกำจัดศัตรูพืชคาร์บาเมตคาร์โบฟูแรน ก่อให้เกิดการตายแบบอะพอพโทซิสในเซลล์ bEnd.3 ผ่านทางสัญญาณ MAP kinase โดยที่ทางสัญญาณ ERK มีบทบาทสำคัญที่สุดในการตายของเซลล์ [13]. Tsai และเพื่อนร่วมงานได้ศึกษาความเป็นพิษต่อเซลล์ bEnd.3 ที่เกิดจากไลโซฟอสฟาทิดิลโคลีน โดยพวกเขาพบว่าสาเหตุการตายของเซลล์เกิดจากภาวะแคลเซียมในไซโทซอลเกินระดับปกติ การสูญเสียศักย์ไฟฟ้าของเยื่อหุ้มไมโทคอนเดรีย, การกระตุ้น p38 และการกระตุ้น caspase-3 — โดยเฉพาะอย่างยิ่งโดยไม่มีการสร้างอนุมูลออกซิเจน — และระบุว่าเฮปารินเป็นสารป้องกันที่ทำงานในขั้นตอนถัดไปของ p38 [14]. งานวิจัยล่าสุดเกี่ยวกับการรักษาด้วยฟลอร์เฟนิคอลได้บันทึกว่า การปรับโครงสร้าง F-actin ที่ถูกควบคุมโดย ROCK/cofilin มีส่วนทำให้การเพิ่มจำนวนและการเคลื่อนที่ของเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือด bEnd.3 ลดลง [15].

ในด้านการวิจัยโรคอัลไซเมอร์ เซลล์ bEnd.3 ได้ถูกใช้เป็นแบบจำลองสำหรับการทำลาย BBB ที่เกิดจากเปปไทด์เบต้า-อะไมลอยด์ Chan และคณะได้แสดงให้เห็นว่า การเปลี่ยนแปลงของกระบวนการออโตฟาจีในเซลล์ bEnd.3 ที่เกิดจากโอลิโกเมอร์ Aβ ถูกยับยั้งโดย RNA แทรกแซงขนาดเล็กของ RAGE, ซึ่งเชื่อมโยงสัญญาณ RAGE ผ่านแกน CaMKKβ/AMPK/mTOR ไปสู่ความเสียหายที่ขึ้นอยู่กับกระบวนการออโตฟาจีของโปรตีนโครงสร้างจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junction scaffold proteins) ได้แก่ ZO-1, occludin และ claudin-5 [16]. นอกจากนี้ ยังมีการแสดงให้เห็นว่าโพลีฟีนอลจากเมล็ดลิ้นจี่สามารถปกป้องความสมบูรณ์ของ BBB ได้โดยการยับยั้งการกระตุ้นอินฟลามมาโซม NLRP3 ที่เกิดจาก Aβ(25–35) ผ่านทางกระบวนการออโตฟาจีที่ควบคุมโดย AMPK/mTOR/ULK1 ในเซลล์ bEnd.3 โดยผลการศึกษานี้ได้รับการยืนยันในหนูทรานส์เจนิก APP/PS1 — การศึกษาที่ช่วยเพิ่มความเข้าใจเกี่ยวกับปฏิสัมพันธ์ระหว่างออโตฟาจีและอินฟลามมาโซมที่จุดเชื่อมต่อระหว่างระบบประสาทและหลอดเลือด [17] การปรับแต่งด้วยแสง (Photobiomodulation) ได้ถูกศึกษาในบริบทเดียวกัน: Ma และคณะได้ใช้เซลล์ bEnd.3 ที่ถูกกระตุ้นด้วย LPS ร่วมกับหนู transgenic APP/PS1 เพื่อแสดงให้เห็นว่าการรักษาด้วยแสงใกล้อินฟราเรดช่วยปรับปรุงการเผาผลาญพลังงานของไมโทคอนเดรีย เพิ่มการแสดงออกของ occludin, claudin-5 และ ZO-1 และปกป้องความสมบูรณ์ของเกราะกั้นในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับ AMPK [18].

การสร้างหลอดเลือดและการส่งสัญญาณทางหลอดเลือด

bEnd.3 ได้พิสูจน์แล้วว่าเป็นเซลล์ที่มีข้อมูลเชิงลึกสูงในการศึกษาสัญญาณการสร้างหลอดเลือด Yue และคณะได้ใช้ไมโครอาร์เรย์ cDNA เพื่อวิเคราะห์โปรไฟล์การแสดงออกของยีนการสร้างหลอดเลือดในเซลล์ bEnd.3 ที่ได้รับการรักษาด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสต์แบบเบส (bFGF) โดยระบุการเพิ่มการแสดงออกของยีนที่ส่งเสริมการสร้างหลอดเลือด รวมถึง ADAMTS1, MMP-9, แองจิโอโพเอติน-1, PDGF-B และ G-CSF การลดการแสดงออกของยีนที่ต้านการสร้างหลอดเลือด เช่น TIMP-2 และ TSP-3 รวมถึงการกระตุ้นไซโคลออกซีจีเนส-2 (COX-2) ทั้งในระดับ mRNA และโปรตีน [19]. วิธีการแบบ high-throughput นี้ได้ยืนยันว่า bEnd.3 เป็นแพลตฟอร์มที่สะดวกสำหรับการวิเคราะห์โปรไฟล์การสร้างหลอดเลือดในระดับจีโนม

การตอบสนองการสร้างหลอดเลือดที่เกิดจากภาวะขาดออกซิเจนยังได้รับการวิเคราะห์โดยใช้เซลล์ bEnd.3 ด้วย Zhu และเพื่อนร่วมงานได้แสดงให้เห็นว่าภาวะขาดออกซิเจนเพิ่มการแสดงออกของ mRNA และโปรตีนของ endoglin (CD105) ในเซลล์ bEnd.3 ผ่านการกระตุ้น p38 MAPK โดยสารยับยั้งของเส้นทางนี้ — และ MKK3 แบบ dominant negative — สามารถยับยั้งการกระตุ้น endoglin ได้ [20]. เนื่องจาก endoglin มีการกลายพันธุ์ในโรค telangiectasia เลือดออกทางพันธุกรรม และมีการเพิ่มการแสดงออกในช่วงการสร้างหลอดเลือดที่กระตือรือร้น ผลการวิจัยเหล่านี้จึงเชื่อมโยงสัญญาณ MAPK ที่ไวต่อภาวะขาดออกซิเจนกับการปรับโครงสร้างหลอดเลือดที่ผิดปกติ Li และคณะยังแสดงให้เห็นเพิ่มเติมว่าภาวะขาดออกซิเจนเพิ่มกิจกรรมของ CD73 (ecto-5'-nucleotidase), mRNA และโปรตีนในเซลล์ bEnd.3 ตามเวลา ในขณะที่การคืนออกซิเจนในขั้นต้นได้กลับการกระตุ้นนี้ก่อนที่ CD73 จะเพิ่มขึ้นอีกครั้งเมื่อการคืนออกซิเจนดำเนินไปนาน — ซึ่งชี้ให้เห็นว่าการสร้างอะดีโนซีนเป็นกลไกการปกป้องระบบประสาทระหว่างภาวะขาดเลือด-การคืนเลือด [21].

การส่งสัญญาณของแองจิโอโพเอตินได้รับการศึกษาอย่างลึกซึ้งโดยใช้ bEnd.3 เป็นระบบแบบจำลอง Shi และเพื่อนร่วมงานได้สร้างแบบจำลองการตายแบบอะพอพโทซิสในเซลล์ bEnd.3 โดยไม่ใช้เซรั่ม และแสดงให้เห็นว่า แองจิโอโพเอทิน-1 ยับยั้งการตายแบบอะพอพโทซิสของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครผ่านกลไกที่เกี่ยวข้องกับการลดระดับ Bax การเพิ่มระดับ Bcl-2 และการลดการปล่อยไซโตโครม C จากไมโทคอนเดรียเข้าสู่ไซโทพลาซึม [22]. Perry และคณะได้ขยายการศึกษาชีววิทยาของแองจิโอโพเอตินไปยังการวิจัยเกี่ยวกับฮีมาจิโอมา โดยแสดงให้เห็นถึงการกระตุ้นแบบคงที่ของตัวรับ Tie-2 ในฮีมาจิโอมาของทารกมนุษย์ และใช้เซลล์ bEnd.3 เป็นระบบแบบจำลองฮีมาจิโอมาในหนู ซึ่งการยับยั้งการผลิตแองจิโอโพเอติน-2 ด้วยยาได้ทำให้การเติบโตของก้อนเนื้องอกในร่างกายสัตว์ทดลองหยุดลงเกือบทั้งหมด [23].

eNOS, Connexins และหน้าที่ของเซลล์บุผนังหลอดเลือด

ชีววิทยาของเอนไซม์ไนตริกออกไซด์ซินเทสของเซลล์บุผนังหลอดเลือด (eNOS) ได้รับการศึกษาอย่างละเอียดในเซลล์ bEnd.3 ด้วยความแม่นยำสูง Govers และเพื่อนร่วมงานได้ใช้กล้องจุลทรรศน์อิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์เพื่อแสดงให้เห็นว่า การจัดตำแหน่งของ eNOS ที่เยื่อหุ้มเซลล์ขึ้นอยู่กับความสัมผัสระหว่างเซลล์อย่างสำคัญ โดยมีการสะสมอย่างเข้มข้นที่จุดสัมผัสระหว่างเซลล์ ซึ่งมีรูปแบบการกระจายคล้ายกับ PECAM-1 มากกว่า VE-cadherin หรือ plakoglobin, และกิจกรรมของ eNOS สูงขึ้นในชั้นเซลล์ที่รวมตัวกันสมบูรณ์ (confluent) เมื่อเทียบกับชั้นเซลล์ที่ยังไม่รวมตัวกันสมบูรณ์ (subconfluent) แม้ระดับการแสดงออกจะไม่เปลี่ยนแปลง [24] ความสัมพันธ์เชิงพื้นที่ระหว่างตำแหน่งของ eNOS และกิจกรรมของมันได้ทำให้ bEnd.3 กลายเป็นแบบจำลองที่สามารถศึกษาบริบททางสรีรวิทยาของชั้นเซลล์บุผนังหลอดเลือดที่รวมตัวกันสมบูรณ์ได้อย่างมีนัยสำคัญ

Bevers และเพื่อนร่วมงานได้ศึกษาการแยกตัวของ eNOS ในเซลล์ bEnd.3 ซึ่งแสดงออก eNOS ในระดับที่สูงกว่าสายเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดที่ใช้เปรียบเทียบถึงสองลำดับขนาด แต่ไม่มี iNOS และ nNOS พวกเขาพบว่า การเสริม tetrahydrobiopterin (BH4) ช่วยเพิ่มการผลิต NO และลดการสร้างสารออกซิเจนปฏิกิริยา (ROS) ในขณะที่การเพิ่ม L-arginine เพิ่มเติมกลับทำให้ ROS ที่ถูกกระตุ้นโดย VEGF เพิ่มขึ้นอีก — ซึ่งชี้ให้เห็นว่า การขาด BH4 อย่างสัมพัทธ์ ไม่ใช่ความพร้อมของ arginine เป็นปัจจัยที่ขับเคลื่อนการแยกตัวในบริบทนี้ [25]. ผลวิจัยนี้มีความเกี่ยวข้องโดยตรงกับภาวะแทรกซ้อนทางหลอดเลือดในโรคต่าง ๆ เช่น ความดันโลหิตสูงและโรคหลอดเลือดแข็ง ซึ่งการแสดงออกของ eNOS ที่มากเกินไปอย่างต่อเนื่องอาจส่งเสริมความเครียดออกซิเดทีฟได้อย่างขัดแย้ง

การสื่อสารผ่านช่องว่างแบบ gap junction ที่ถูกควบคุมโดย connexin ยังได้รับการศึกษาในเซลล์ bEnd.3 ด้วย Kwak และเพื่อนร่วมงานได้เปรียบเทียบการแสดงออกของคอนเน็กซินและการเชื่อมต่อระหว่างเซลล์ก่อนและหลังการบาดเจ็บทางกลของชั้นเซลล์ bEnd.3 เดี่ยว โดยสังเกตเห็นการเพิ่มขึ้นของ Cx43 และการลดลงของ Cx37 ที่บริเวณบาดเจ็บ ซึ่ง Cx40 ไม่ได้รับผลกระทบ [26]. การทรานส์เฟคชันแบบคงที่ด้วยสารยับยั้งคอนเน็กซินแบบโดมินันท์เนกาทีฟ ทำให้เวลาที่จำเป็นสำหรับการปิดแผลอย่างสมบูรณ์ยืดออกไปประมาณ 50% โดยไม่เปลี่ยนแปลงการเพิ่มจำนวนเซลล์ การเคลื่อนที่ของเซลล์เดี่ยว หรือกิจกรรมโปรตีโอไลติก ซึ่งยืนยันบทบาทเฉพาะของการสื่อสารผ่านช่องว่างแบบ gap junction ในการซ่อมแซมแผลของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดอย่างประสานกัน

การหลั่งปัจจัยนิวโรโทรฟิกและการประยุกต์ใช้กับเซลล์ต้นกำเนิด

เซลล์ bEnd.3 ปล่อยปัจจัยบำรุงระบบประสาท (neurotrophic factors) ที่ออกฤทธิ์ต่อสภาพแวดล้อมไมโครของระบบประสาทรอบข้าง Wang และคณะได้แสดงให้เห็นว่า ปัจจัยบำรุงระบบประสาทที่มาจากสมอง (BDNF) ถูกแสดงออกและปล่อยออกมาโดยเซลล์ bEnd.3 โดยทั้งภาวะขาดออกซิเจนแบบต่อเนื่องและแบบเป็นช่วงสามารถกระตุ้นการปล่อย BDNF ได้ — โดยภาวะขาดออกซิเจนแบบเป็นช่วงเป็นปัจจัยกระตุ้นที่มีประสิทธิภาพมากกว่า [27]. การปล่อย BDNF ที่เกิดจากภาวะขาดออกซิเจนถูกยับยั้งบางส่วนโดย N-acetyl-L-cysteine และสารเลียนแบบซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเทส ซึ่งชี้ให้เห็นว่าอนุมูลออกซิเจนมีบทบาทในกระบวนการส่งสัญญาณนิวโรโทรฟิกที่ถูกกระตุ้นโดยภาวะขาดออกซิเจน และจำเป็นต้องมีการเคลื่อนย้ายแคลเซียมจากแหล่งเก็บภายใน ผลการวิจัยเหล่านี้ได้ยืนยันว่า เยื่อบุหลอดเลือดไมโครในสมองมีบทบาทอย่างแข็งขันในการรักษาชีวิตของเซลล์ประสาท ไม่ใช่เพียงเป็นอุปสรรคที่รับมืออย่างเฉื่อยชา

ที่น่าทึ่งที่สุดคือ Joubin และคณะได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ bEnd.3 ช่วยรักษาเซลล์ต้นกำเนิดพลูริโพเทนต์ของมนุษย์ให้อยู่ในสภาพที่ยังไม่แยกตัว โดยหลั่งสารที่ละลายได้ซึ่งเลียนแบบนิชที่สร้างขึ้นโดยไฟโบรบลาสต์ตัวอ่อนของหนู [4]. ผู้วิจัยยังแสดงให้เห็นเพิ่มเติมว่าเซลล์ bEnd.3 สามารถถูกดัดแปลงทางพันธุกรรมให้แสดงตัวรายงานเรืองแสงหรือยีนต้านยาได้ ซึ่งช่วยสร้างชั้นเซลล์เลี้ยงที่ออกแบบเฉพาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิด — การประยุกต์ใช้ที่ขยายประโยชน์ของสายเซลล์นี้ออกไปอย่างกว้างขวางเกินกว่าการวิจัยเกี่ยวกับเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดแบบดั้งเดิม

สรุป

bEnd.3 ยังคงเป็นหนึ่งในสายเซลล์ที่มีความหลากหลายและให้ผลผลิตสูงที่สุดในการวิจัยด้านระบบประสาทและหลอดเลือด รวมถึงการวิจัยเกี่ยวกับ BBB ตั้งแต่การสร้างแบบจำลองโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือดและบาดเจ็บจากการไหลเวียนเลือดกลับคืน ไปจนถึงการวิเคราะห์สัญญาณ eNOS การซ่อมแซมแผลที่อาศัยคอนเน็กซิน การแสดงออกของยีนสร้างหลอดเลือด และการรบกวนจุดเชื่อมต่อแน่นที่ขับเคลื่อนด้วยออโตฟาจี สายเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครในสมองหนูสายพันธุ์นี้ได้ให้ข้อมูลเชิงลึกในหลายสาขาชีวการแพทย์ ความสามารถในการนำไปใช้กับปัญหาที่เกี่ยวข้องกับโรคอัลไซเมอร์ การบาดเจ็บสมองจากอุบัติเหตุ และการคัดกรองสารป้องกันระบบประสาท ยิ่งตอกย้ำตำแหน่งของมันในชุดเครื่องมือวิจัยทางประสาทวิทยาศาสตร์ — โดยต้องคำนึงถึงความแน่นของช่องว่างที่จำกัดและลักษณะทางฟีโนไทป์ที่เปลี่ยนแปลงไปในการออกแบบการทดลอง นักวิจัยที่กำลังมองหาแบบจำลองเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดและแบบจำลองการขนส่งผ่าน BBB ในหลอดทดลอง (in vitro) ที่มีลักษณะเฉพาะชัดเจน สามารถทำซ้ำได้ และจัดการในการทดลองได้ง่าย ขอแนะนำให้สำรวจ Bend.3 Cells ที่มีให้บริการที่ cytion.com ซึ่งมีการให้ข้อมูลจำเพาะของผลิตภัณฑ์อย่างครบถ้วนและข้อมูลการสั่งซื้อ

บทความสำคัญ

1. Montesano R, Pepper MS, Möhle-Steinlein U, et al. (1990) การเพิ่มขึ้นของกิจกรรมโปรตีโอไลติกเป็นสาเหตุของพฤติกรรมมอร์โฟเจเนติกที่ผิดปกติของเซลล์เอนโดเทลที่แสดงออกยีนมะเร็ง T ระดับกลาง Cell 62:435–445. PMID: 2379237
2. Omidi Y, Campbell L, Barar J, et al. (2003) การประเมินสายเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดฝอยในสมองหนูที่ถูกทำให้เป็นอมตะ b.End3 ในฐานะแบบจำลองกำแพงเลือด-สมองในหลอดทดลอง สำหรับการศึกษาการดูดซึมและการขนส่งยา Brain Research 990:95–112. PMID: 14568334
3. Yuen D, Leu R, Tse J, et al. (2014) การวิเคราะห์ลักษณะใหม่ของเซลล์ bEnd.3 ที่แสดงตัวรับไฮยาลูโรแนน-1 ของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดลิมฟาติก Lymphology 47:73–81. PMID: 25282873
4. Joubin K, Richardson A, Novoa N, et al. (2012) สายเซลล์เยื่อบุหลอดเลือด bEnd.3 ช่วยรักษาเซลล์ต้นกำเนิดพลูริโพเทนต์ของมนุษย์. Stem Cells and Development 21:2312–2321. PMID: 22224974
5. Song L, Pachter JS (2003) การเพาะเลี้ยงเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครเวสคิวลาร์ในสมองของหนู ที่รักษาการแสดงออกและการเชื่อมโยงกับโครงร่างเซลล์ของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับจุดเชื่อมต่อแน่น. In Vitro Cellular & Developmental Biology. Animal 39:313–320. PMID: 14613336
6. Koto T, Takubo K, Ishida S, et al. (2007) ภาวะขาดออกซิเจนทำให้หน้าที่กั้นของหลอดเลือดในระบบประสาทถูกรบกวนผ่านการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของ claudin-5 ในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือด. The American Journal of Pathology 170:1389–1397. PMID: 17392177
7. Kim KA, Kim D, Kim JH, et al. (2020) การสลายตัวของ occludin ที่เกิดจากกระบวนการออโตฟาจี มีส่วนทำให้การสลายตัวของอุปสรรคเลือด-สมองเกิดขึ้นระหว่างภาวะขาดเลือดในเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดสมอง bEnd.3 และในแบบจำลองโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือดในหนู Fluids and Barriers of the CNS 17:21. PMID: 32169114
8. Yang MZ, Mun CH, Choi YJ, et al. (2007) Agmatine ยับยั้งเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีเนส-9 ผ่านเอนโดเทลนิทริกออกไซด์ซินเทสในเซลล์เอนโดเทลสมอง. Neurological Research 29:749–754. PMID: 17588309
9. Xie YY, Lu YW, Yu GR (2022) ผลป้องกันของไฮเพอโรไซด์ต่อกระบวนการอะพอพโทซิสของเซลล์ bEnd.3 ที่เกิดจาก Ang II และความเสียหายของแบบจำลองกำแพงเลือด-สมองในหลอดทดลอง. BMC Complementary Medicine and Therapies 22:157. PMID: 35698113
10. Cheng YQ, Wu CR, Du MR, et al. (2022) CircLphn3 ช่วยปกป้องกำแพงเลือด-สมองในกรณีบาดเจ็บสมองแบบรุนแรง Neural Regeneration Research 17:812–818. PMID: 34472480
11. Jeong EM, Moon CH, Kim CS, et al. (2004) แคดเมียมกระตุ้นการแสดงออกของ ICAM-1 ผ่านการกระตุ้น NF-kappaB ในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดสมอง Biochemical and Biophysical Research Communications 320:887–892. PMID: 15240131
12. Zhang J, Rui YC, Yang PY, et al. (2006) โปรตีน C-reactive กระตุ้นการแสดงออกของโมเลกุลการยึดติดในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครสมองที่เพาะเลี้ยง Life Sciences 78:2983–2988. PMID: 16412476
13. Jung YS, Kim CS, Park HS, et al. (2003) N-nitrosocarbofuran กระตุ้นการตายแบบอะพอพโทซิสในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครในสมองของหนู (bEnd.3). Journal of Pharmacological Sciences 93:489–495. PMID: 14737022
14. Tsai TY, Leong IL, Cheng KS, et al. (2019) ความเป็นพิษต่อเซลล์ที่เกิดจากไลโซฟอสฟาทิดิลโคลีนและการป้องกันโดยเฮปารินในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดสมอง bEND.3 ของหนูทดลอง. Fundamental & Clinical Pharmacology 33:52–62. PMID: 29974515
15. Hu D, Shen Z, Hou X, et al. (2025) การปรับโครงสร้างแอคตินที่ควบคุมโดย ROCK มีส่วนทำให้การเพิ่มจำนวนและการเคลื่อนที่ของเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือด bEnd.3 ที่ได้รับการรักษาด้วยฟลอร์เฟนิคอลลดลง Journal of Biochemical and Molecular Toxicology 39:e70453. PMID: 40826991
16. Chan Y, Chen W, Chen Y, et al. (2020) สูตรยา Yi-Zhi-Fang-Dai มีผลป้องกันการบาดเจ็บของโปรตีนโครงสร้างจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junction scaffold proteins) ทั้งในหลอดทดลองและในร่างกายจริง โดยการควบคุมกระบวนการออโตฟาจีผ่านทางสัญญาณ RAGE/CaMKKβ/AMPK/mTOR. Biological & Pharmaceutical Bulletin 43:1847–1858. PMID: 33268702
17. Xiong R, Zhou XG, Tang Y, et al. (2021) โพลีฟีนอลจากเมล็ดลิ้นจี่ช่วยปกป้องกำแพงเลือด-สมอง โดยการยับยั้งการกระตุ้นอินฟลามมาโซม NLRP3 ที่เกิดจาก Aβ(25-35) ผ่านกระบวนการออโตฟาจีที่ควบคุมโดย AMPK/mTOR/ULK1 ในเซลล์ bEnd.3 และหนู APP/PS1. Phytotherapy Research 35:954–973. PMID: 32893437
18. Ma C, Ye Y, Shi X, et al. (2025) การปรับแต่งด้วยแสงช่วยลดการรบกวนของกำแพงเลือด-สมองในแบบจำลองหนู APP/PS1 ของโรคอัลไซเมอร์ โดยการกระตุ้นเส้นทาง AMPK. Alzheimer's Research & Therapy 17:141. PMID: 40551167
19. Yue F, Zhang GP, Jin HM (2006) ผลของปัจจัยการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสต์แบบเบสิก (basic fibroblast growth factor) ต่อการแสดงออกของโปรไฟล์ยีนการสร้างหลอดเลือดและไซโคลออกซีจีเนส-2 ในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครในสมอง. Sheng Li Xue Bao 58:124–128. PMID: 16628358
20. Zhu Y, Sun Y, Xie L, et al. (2003) การเหนี่ยวนำเอนโดกลินโดยภาวะขาดออกซิเจนผ่านทางโปรตีนไคเนสที่ถูกกระตุ้นด้วยไมโตเจนในเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครในสมองของหนู. Stroke 34:2483–2488. PMID: 12947156
21. Li X, Zhou T, Zhi X, et al. (2006) ผลของภาวะขาดออกซิเจน/การกลับสู่ภาวะมีออกซิเจนต่อ CD73 (ecto-5'-nucleotidase) ในสายเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครของหนู. Microvascular Research 72:48–53. PMID: 16828810
22. Shi LG, Zhang GP, Jin HM (2006) การยับยั้งการตายแบบอะพอพโทซิสของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครโดยแองจิโอโพเอทิน-1 และการมีส่วนร่วมของไซโตโครม C. Chinese Medical Journal 119:725–730. PMID: 16701012
23. Perry BN, Govindarajan B, Bhandarkar SS, et al. (2006) การปิดกั้นทางเภสัชวิทยาของแองจิโอโพเอติน-2 มีประสิทธิภาพในการรักษาฮีมาจิโอมาแบบจำลองในหนูทดลอง. The Journal of Investigative Dermatology 126:2316–2322. PMID: 16741507
24. Govers R, Bevers L, de Bree P, et al. (2002) กิจกรรมของเอนไซม์ไนตริกออกไซด์ซินเทสในเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดมีความเกี่ยวข้องกับการมีอยู่ของมันที่จุดติดต่อระหว่างเซลล์ The Biochemical Journal 361:193–201. PMID: 11772391
25. Bevers LM, Braam B, Post JA, et al. (2006) Tetrahydrobiopterin (แต่ไม่ใช่ L-arginine) ลดการแยกตัวของเอนไซม์ NO synthase ในเซลล์ที่แสดงระดับสูงของเอนไซม์ NO synthase ของเซลล์บุผนังหลอดเลือด Hypertension 47:87–94. PMID: 16344367
26. Kwak BR, Pepper MS, Gros DB, et al. (2001) การยับยั้งการซ่อมแซมแผลของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดโดยสารยับยั้งคอนเน็กซินแบบโดมิแนนท์เนกาทีฟ Molecular Biology of the Cell 12:831–845. PMID: 11294890
27. Wang H, Ward N, Boswell M, et al. (2006) การหลั่งปัจจัยการเจริญเติบโตของระบบประสาทที่มาจากสมอง (BDNF) จากเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดไมโครในสมอง. The European Journal of Neuroscience 23:1665–1670. PMID: 16553631