BC-3

La lignée cellulaire BC-3 est un modèle de lymphome d’épanchement primaire (PEL) humain dérivé de l’épanchement pleural d’un patient séronégatif pour le VIH. Elle représente un sous-type rare de lymphome non hodgkinien à cellules B qui se manifeste généralement par des épanchements lymphomateux dans les cavités corporelles telles que la plèvre, le péricarde ou le péritoine, souvent en l’absence de masses tumorales solides détectables. La lignée BC-3 se distingue par son infection exclusive par l’herpèsvirus associé au sarcome de Kaposi (KSHV ou HHV-8) et par l’absence totale du virus d’Epstein-Barr (EBV), une caractéristique qui la différencie de la plupart des autres lignées cellulaires de LEP, qui présentent généralement une double infection.

Sur le plan immunophénotypique, les cellules BC-3 expriment l’antigène commun des leucocytes (CD45), mais ne possèdent pas les marqueurs de lignée classiques des cellules B (p. ex., CD19, CD20, CD21, CD22) ni ceux des cellules T (p. ex., CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), ce qui correspond à l’immunophénotype indifférencié de la PEL. Cependant, elles présentent une expression variable de marqueurs d’activation tels que CD30, CD38, CD54 et HLA-DR. Sur le plan génotypique, la lignée BC-3 présente des réarrangements clonaux des gènes d’immunoglobulines indiquant une origine lymphoïde B, mais ne présente pas de réarrangements de l’oncogène c-myc. Il est important de noter que les analyses par Southern blot et par PCR ont confirmé la présence d’un génome intact du KSHV d’environ 170 kb, et que la microscopie électronique a mis en évidence des capsides de type herpèsvirus, validant ainsi cette lignée comme source productive de particules infectieuses du KSHV.

La lignée BC-3 fait partie du panel LL-100 de lignées cellulaires de leucémie et de lymphome et se regroupe distinctement avec d’autres modèles de PEL dans les analyses transcriptomiques. Elle présente l’expression de gènes caractéristiques de la PEL, tels que PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 et des membres de la famille S100A. Ces marqueurs reflètent un phénotype de cellules B post-centre germinatif et soulignent l’utilité de la lignée BC-3 en tant que modèle biologiquement pertinent pour l’étude de la pathogenèse du KSHV, de la biologie du PEL et des stratégies thérapeutiques ciblant les tumeurs malignes associées au KSHV.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.