BC-3

Die BC-3-Zelllinie ist ein Modell für das humane primäre Effusionslymphom (PEL), das aus dem Pleuraerguss eines HIV-negativen Patienten gewonnen wurde. Es handelt sich um einen seltenen Subtyp des B-Zell-Non-Hodgkin-Lymphoms, der sich typischerweise als lymphomatöser Erguss in Körperhöhlen wie der Pleura, dem Perikard oder dem Peritoneum manifestiert, oft ohne nachweisbare solide Tumormassen. BC-3 zeichnet sich durch eine ausschließliche Infektion mit dem Kaposi-Sarkom-assoziierten Herpesvirus (KSHV oder HHV-8) und das vollständige Fehlen des Epstein-Barr-Virus (EBV) aus – ein Merkmal, das es von den meisten anderen PEL-Zelllinien unterscheidet, die typischerweise duale Infektionen aufweisen.

Immunphänotypisch exprimieren BC-3-Zellen das Leukozyten-Gemeinsame-Antigen (CD45), weisen jedoch keine klassischen Marker der B-Zell- (z. B. CD19, CD20, CD21, CD22) und T-Zell-Linie (z. B. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8) auf, was mit dem undifferenzierten Immunphänotyp des PEL übereinstimmt. Sie zeigen jedoch eine variable Expression von Aktivierungsmarkern wie CD30, CD38, CD54 und HLA-DR. Genotypisch weist BC-3 klonale Immunglobulin-Genumlagerungen auf, die auf einen B-Zell-Ursprung hindeuten, es fehlen jedoch c-myc-Onkogen-Umlagerungen. Wichtig ist, dass Southern-Blot- und PCR-Analysen das Vorhandensein eines intakten ~170-kb-KSHV-Genoms bestätigten und die Elektronenmikroskopie herpesvirusähnliche Kapside nachwies, was die Linie als produktive Quelle infektiöser KSHV-Partikel validiert.

BC-3 ist im LL-100-Panel von Leukämie- und Lymphom-Zelllinien enthalten und gruppiert sich in Transkriptom-Analysen eindeutig mit anderen PEL-Modellen. Es zeigt die Expression von PEL-charakteristischen Genen wie PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 und Mitgliedern der S100A-Familie. Diese Marker spiegeln einen B-Zell-Phänotyp nach dem Keimzentrum wider und unterstreichen die Eignung von BC-3 als biologisch relevantes Modell zur Untersuchung der KSHV-Pathogenese, der PEL-Biologie und therapeutischer Strategien gegen KSHV-assoziierte Malignome.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung