BC-3

A linha celular BC-3 é um modelo de linfoma de efusão primário (PEL) humano derivado da efusão pleural de um doente seronegativo para o VIH. Representa um subtipo raro de linfoma não-Hodgkin de células B que se apresenta tipicamente sob a forma de efusões linfomatosas em cavidades corporais, tais como a pleura, o pericárdio ou o peritônio, frequentemente na ausência de massas tumorais sólidas detetáveis. A BC-3 distingue-se pela sua infecção exclusiva pelo herpesvírus associado ao sarcoma de Kaposi (KSHV ou HHV-8) e pela ausência total do vírus de Epstein-Barr (EBV), uma característica que a diferencia da maioria das outras linhas celulares de PEL, que são tipicamente duplamente infectadas.

Do ponto de vista imunofenotípico, as células BC-3 expressam o antígeno comum dos leucócitos (CD45), mas carecem de marcadores clássicos da linhagem das células B (por exemplo, CD19, CD20, CD21, CD22) e das células T (por exemplo, CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), o que é consistente com o imunofenótipo indiferenciado do PEL. No entanto, apresentam uma expressão variável de marcadores de ativação, tais como CD30, CD38, CD54 e HLA-DR. Genotipicamente, as BC-3 exibem rearranjos clonais do gene da imunoglobulina indicativos de origem das células B, mas não apresentam rearranjos do oncogene c-myc. É importante referir que as análises por Southern blot e PCR confirmaram a presença de um genoma KSHV intacto de ~170 kb, e a microscopia eletrónica demonstrou cápsides semelhantes às do herpesvírus, validando a linha como uma fonte produtiva de partículas infecciosas de KSHV.

A BC-3 está incluída no painel LL-100 de linhas celulares de leucemia e linfoma e agrupa-se distintamente com outros modelos de PEL em análises transcriptómicas. Apresenta expressão de genes característicos da PEL, tais como PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 e membros da família S100A. Estes marcadores refletem um fenótipo de células B pós-centro germinativo e sublinham a utilidade da BC-3 como modelo biologicamente relevante para o estudo da patogénese do KSHV, da biologia da PEL e de estratégias terapêuticas direcionadas para neoplasias associadas ao KSHV.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia