Pereiti prie turinio
BC-3
Audinys
Pleuros išskyros
Liga
Pirminė efuzinė limfoma
Sinonimai
BC3

Dokumentai

BC-3

Cell line · Prekės numeris 305748

BC-3 ląstelių linija yra žmogaus pirminės efuzinės limfomos (PEL) modelis, gautas iš ŽIV neigiamo paciento pleuros efuzijos. Ji atspindi retą sub...

€700.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

BC-3 ląstelių linija yra žmogaus pirminės efuzinės limfomos (PEL) modelis, gautas iš ŽIV neigiamo paciento pleuros efuzijos. Ji atspindi retą B ląstelių ne Hodžkino limfomos potipį, kuris paprastai pasireiškia limfomatinėmis efuzijomis kūno ertmėse, tokiose kaip pleura, perikardas ar peritonas, dažnai nesant aptinkamų kietųjų navikų masių. BC-3 išsiskiria tuo, kad ji yra užkrėsta tik Kaposio sarkomai asocijuotu herpesvirusu (KSHV arba HHV-8) ir visiškai neturi Epštejno-Barro viruso (EBV) – tai bruožas, kuris ją išskiria iš daugumos kitų PEL ląstelių linijų, kurios paprastai yra užkrėstos abiem virusais.

Imunofenotipiškai BC-3 ląstelės ekspresuoja bendrą leukocitų antigeną (CD45), tačiau neturi klasinių B ląstelių (pvz., CD19, CD20, CD21, CD22) ir T ląstelių (pvz., CD2, CD3, CD4, CD5, CD8) linijos žymenų, o tai atitinka nediferencijuotą PEL imunofenotipą. Tačiau jos išreiškia kintamą aktyvacijos žymenų, tokių kaip CD30, CD38, CD54 ir HLA-DR, ekspresiją. Genotipiškai BC-3 rodo kloninius imunoglobulino genų pertvarkymus, rodančius B ląstelių kilmę, tačiau neturi c-myc onkogeno pertvarkymų. Svarbu tai, kad Southern blot ir PCR analizės patvirtino nepažeisto ~170 kb KSHV genomo buvimą, o elektroninė mikroskopija parodė herpesviruso tipo kapsides, patvirtindama, kad ši linija yra produktyvus infekcinių KSHV dalelių šaltinis.

BC-3 yra įtraukta į LL-100 leukemijos ir limfomos ląstelių linijų rinkinį ir transkriptomikos analizėse aiškiai grupuojasi su kitais PEL modeliais. Ji rodo PEL būdingų genų, tokių kaip PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 ir S100A šeimos narių, ekspresiją. Šie žymekliai atspindi po germinalinio centro B ląstelių fenotipą ir pabrėžia BC-3 naudingumą kaip biologiniu požiūriu aktualaus modelio, skirto KSHV patogenezei, PEL biologijai ir terapinėms strategijoms, nukreiptoms į su KSHV susijusius piktybinius navikus, tirti.

Audinys
Pleuros išskyros
Liga
Pirminė efuzinė limfoma
Paraiškos
Imunologija
Sinonimai
  • BC3

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Limfoblastai
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug 50–60 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
BC-3 (Cytion katalogo numeris 305748)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1080

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
CD30+; CD38+; CD45+; CD54+; CD71+; HLA-DR+; EMA+ (epitelio membranos antigenas); CD2–; CD3–; CD4–; CD5–, CD8–; CD19–; CD20–; CD21–; CD22–
Mutacijų profilis
Mutacija: geno delecija, CDKN2A, homozigotinė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 20 % FBS
Disociacijos reagentas
Nėra
Sėjos tankis
nuo 2,5 iki 10 x 10⁵ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip krioprezervacijos terpę naudojame pilną auginimo terpę (įskaitant FBS) su 5 % DMSO, siekdami užtikrinti pakankamą gyvybingumą po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuoti osmoapsauginiai ir metabolizmo stabilizatoriai, skirti pagerinti ląstelių atsigavimą ir sumažinti kriogeninio poveikio sukeltą stresą.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
85 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių