BC-3

BC-3-cellelinjen er en modell for humant primært effusjonslymfom (PEL) som stammer fra pleuralvæske fra en HIV-negativ pasient. Den representerer en sjelden undertype av B-celle-non-Hodgkin-lymfom som typisk manifesterer seg som lymfomatøse væskeansamlinger i kroppshulrom som pleura, perikardiet eller bukhinnen, ofte uten påvisbare solide svulster. BC-3 kjennetegnes ved sin eksklusive infeksjon med Kaposis sarkom-assosiert herpesvirus (KSHV eller HHV-8) og fullstendig fravær av Epstein-Barr-virus (EBV), et trekk som skiller den fra de fleste andre PEL-cellelinjer, som typisk er dobbeltinfisert.

Immunofenotypisk uttrykker BC-3-celler leukocytt-fellesantigen (CD45), men mangler klassiske markører for B-celle- (f.eks. CD19, CD20, CD21, CD22) og T-celle- (f.eks. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8) linjer, noe som er i samsvar med den udifferensierte immunofenotypen til PEL. De viser imidlertid varierende uttrykk av aktiveringsmarkører som CD30, CD38, CD54 og HLA-DR. Genotypisk viser BC-3 klonale omorganiseringer av immunoglobulin-genet som indikerer B-celleopprinnelse, men mangler c-myc-onkogenomorganiseringer. Viktigst av alt bekreftet Southern blot- og PCR-analyser tilstedeværelsen av et intakt ~170 kb KSHV-genom, og elektronmikroskopi påviste herpesviruslignende kapsider, noe som validerer linjen som en produktiv kilde til smittsomme KSHV-partikler.

BC-3 er inkludert i LL-100-panelet av leukemi- og lymfomcellelinjer og grupperer seg tydelig med andre PEL-modeller i transkriptomiske analyser. Den viser uttrykk for PEL-karakteristiske gener som PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 og medlemmer av S100A-familien. Disse markørene reflekterer en B-cellefenotype etter germinalsenteret og understreker BC-3s nytteverdi som en biologisk relevant modell for å studere KSHV-patogenese, PEL-biologi og terapeutiske strategier rettet mot KSHV-assosierte maligniteter.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring