BC-3

Cellinjen BC-3 är en modell för humant primärt effusionslymfom (PEL) som härrör från en pleuralvätskeansamling hos en HIV-negativ patient. Den representerar en sällsynt subtyp av B-cellsnon-Hodgkin-lymfom som vanligtvis yttrar sig som lymfomatösa vätskeansamlingar i kroppshåligheter såsom pleura, hjärtsäcken eller bukhinnan, ofta utan att några påvisbara solida tumörmassor förekommer. BC-3 kännetecknas av sin exklusiva infektion med Kaposis sarkomassocierat herpesvirus (KSHV eller HHV-8) och fullständig frånvaro av Epstein-Barr-virus (EBV), en egenskap som skiljer den från de flesta andra PEL-cellinjer, som vanligtvis är dubbelt infekterade.

Immunofenotypiskt uttrycker BC-3-celler leukocytgemensamt antigen (CD45) men saknar klassiska markörer för B-cells- (t.ex. CD19, CD20, CD21, CD22) och T-cellslinjen (t.ex. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), vilket överensstämmer med den odifferentierade immunofenotypen hos PEL. De uppvisar dock varierande uttryck av aktiveringsmarkörer såsom CD30, CD38, CD54 och HLA-DR. Genotypiskt uppvisar BC-3 klonala omarrangemang av immunoglobulingen som indikerar B-cellsursprung, men saknar omarrangemang av c-myc-onkogenen. Viktigt är att Southern blot- och PCR-analyser bekräftade förekomsten av ett intakt ~170 kb KSHV-genom, och elektronmikroskopi visade herpesvirusliknande kapsider, vilket validerar linjen som en produktiv källa till infektiösa KSHV-partiklar.

BC-3 ingår i LL-100-panelen av leukemi- och lymfomcellinjer och klustrar tydligt med andra PEL-modeller i transkriptomiska analyser. Den uppvisar uttryck av PEL-karakteristiska gener såsom PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 och medlemmar av S100A-familjen. Dessa markörer återspeglar en B-cellfenotyp efter germinalcentret och understryker BC-3:s användbarhet som en biologiskt relevant modell för att studera KSHV-patogenes, PEL-biologi och terapeutiska strategier riktade mot KSHV-associerade maligniteter.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring