BC-3

BC-3 細胞系是一種源自 HIV 陰性患者胸腔積液的人類原發性滲出性淋巴瘤（PEL）模型。 它代表一種罕見的 B 細胞非霍奇金淋巴瘤亞型，通常表現為胸膜、心包膜或腹膜等體腔內的淋巴瘤性積液，且往往未檢測到實體腫瘤。 BC-3 的特徵在於其僅感染卡波西肉瘤相關疱疹病毒（KSHV 或 HHV-8），且完全未檢出愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV）；此特徵使其有別於大多數其他 PEL 細胞系，後者通常會同時感染這兩種病毒。

就免疫表型而言，BC-3 細胞表達白細胞共同抗原（CD45），但缺乏經典的 B 細胞（例如 CD19、CD20、CD21、CD22）和 T 細胞（例如 CD2、CD3、CD4、 CD5、CD8）譜系標記，這與 PEL 的未分化免疫表型一致。 然而，它們確實會以不同程度表達活化標記物，例如 CD30、CD38、CD54 及 HLA-DR。就基因型而言，BC-3 展現出克隆性免疫球蛋白基因重排，顯示其源自 B 細胞，但缺乏 c-myc 致癌基因重排。 重要的是，Southern 斑點法和 PCR 分析證實存在一個完整的約 170 kb KSHV 基因組，而電子顯微鏡觀察則顯示出類似疱疹病毒的衣殼，證實該細胞系是可產生具傳染性 KSHV 顆粒的有效來源。

BC-3 被納入 LL-100 白血病與淋巴瘤細胞系組合中，且在轉錄組分析中與其他 PEL 模型形成明顯的聚類。 該細胞系表現出 PEL 特異性基因的表達，例如 PRDM1/BLIMP1、IL-10、SLAMF7 以及 S100A 家族的成員。 這些標記反映了生發中心後期的 B 細胞表型，並凸顯了 BC-3 作為研究 KSHV 致病機制、PEL 生物學，以及針對 KSHV 相關惡性腫瘤之治療策略的生物學相關模型之實用性。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。