BC-3

BC-3細胞株は、HIV陰性患者の胸水から樹立されたヒト原発性滲出性リンパ腫（PEL）モデルである。これはB細胞性非ホジキンリンパ腫の希少な亜型であり、通常、胸膜、心膜、腹膜などの体腔内にリンパ腫性滲出液として現れ、検出可能な固形腫瘍を伴わないことが多い。 BC-3は、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（KSHVまたはHHV-8）のみによる感染と、エプスタイン・バーウイルス（EBV）の完全な欠如によって特徴づけられる。この特徴は、通常は二重感染している他のほとんどのPEL細胞株とは一線を画すものである。

免疫表現型において、BC-3 細胞は白血球共通抗原（CD45）を発現するが、古典的な B 細胞（CD19、CD20、CD21、CD22 など）および T 細胞（CD2、CD3、CD4、CD5、CD8 など）の系統マーカーを欠いており、PEL の未分化な免疫表現型と一致している。 しかし、CD30、CD38、CD54、HLA-DR などの活性化マーカーの発現にはばらつきが見られる。遺伝子型的には、BC-3 は B 細胞由来であることを示すクローン性免疫グロブリン遺伝子再構成を示すものの、c-myc 癌遺伝子の再構成は認められない。 重要なことに、サザンブロットおよびPCR解析により、約170 kbの無傷のKSHVゲノムの存在が確認され、電子顕微鏡観察によりヘルペスウイルス様キャプシドが確認され、この細胞株が感染性KSHV粒子の生産源であることが実証された。

BC-3は、白血病およびリンパ腫細胞株のLL-100パネルに含まれており、トランスクリプトーム解析において他のPELモデルとは明確に異なるクラスターを形成する。PRDM1/BLIMP1、IL-10、SLAMF7、およびS100Aファミリーのメンバーなど、PELに特徴的な遺伝子の発現を示す。 これらのマーカーは、胚中心通過後のB細胞の表現型を反映しており、KSHVの病原性、PELの生物学、およびKSHV関連悪性腫瘍を標的とした治療戦略の研究において、BC-3が生物学的に意義のあるモデルとして有用であることを強調している。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。