BC-3

Linia komórkowa BC-3 stanowi model pierwotnego chłoniaka wysiękowego (PEL) pochodzącego z wysięku opłucnowego pacjenta bez zakażenia wirusem HIV. Reprezentuje ona rzadki podtyp chłoniaka nieziarniczego z komórek B, który zazwyczaj objawia się wysiękami chłoniakowymi w jamach ciała, takich jak opłucna, osierdzie lub otrzewna, często przy braku wykrywalnych guzów litych. BC-3 wyróżnia się wyłączną infekcją wirusem opryszczki związanym z mięsakiem Kaposiego (KSHV lub HHV-8) oraz całkowitym brakiem wirusa Epsteina-Barra (EBV), co odróżnia ją od większości innych linii komórkowych PEL, które są zazwyczaj podwójnie zakażone.

Pod względem immunofenotypowym komórki BC-3 wykazują ekspresję wspólnego antygenu leukocytów (CD45), ale nie posiadają klasycznych markerów linii komórek B (np. CD19, CD20, CD21, CD22) i komórek T (np. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), co jest zgodne z niezróżnicowanym immunofenotypem PEL. Wykazują one jednak zmienną ekspresję markerów aktywacji, takich jak CD30, CD38, CD54 i HLA-DR. Pod względem genotypowym BC-3 wykazuje klonalne rearanżacje genów immunoglobulin wskazujące na pochodzenie z komórek B, ale nie wykazuje rearanżacji onkogenu c-myc. Co ważne, analizy metodą Southern blot i PCR potwierdziły obecność nienaruszonego genomu KSHV o wielkości ~170 kb, a mikroskopia elektronowa wykazała kapsydy podobne do herpeswirusów, potwierdzając, że linia ta jest produktywnym źródłem zakaźnych cząstek KSHV.

BC-3 znajduje się w panelu LL-100 linii komórkowych białaczki i chłoniaka i w analizach transkryptomicznych wyraźnie skupia się z innymi modelami PEL. Wykazuje ekspresję genów charakterystycznych dla PEL, takich jak PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 oraz członków rodziny S100A. Markery te odzwierciedlają fenotyp komórek B po fazie centrum germinacyjnego i podkreślają przydatność BC-3 jako biologicznie istotnego modelu do badania patogenezy KSHV, biologii PEL oraz strategii terapeutycznych ukierunkowanych na nowotwory złośliwe związane z KSHV.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym