BC-3

La linea cellulare BC-3 è un modello di linfoma da versamento primario (PEL) umano derivato dal versamento pleurico di un paziente HIV-negativo. Rappresenta un sottotipo raro di linfoma non-Hodgkin a cellule B che si manifesta tipicamente con versamenti linfomatosi nelle cavità corporee quali la pleura, il pericardio o il peritoneo, spesso in assenza di masse tumorali solide rilevabili. La linea BC-3 si distingue per la sua infezione esclusiva da herpesvirus associato al sarcoma di Kaposi (KSHV o HHV-8) e per la completa assenza del virus di Epstein-Barr (EBV), una caratteristica che la differenzia dalla maggior parte delle altre linee cellulari PEL, che sono tipicamente infettate da entrambi i virus.

Dal punto di vista immunofenotipico, le cellule BC-3 esprimono l'antigene comune dei leucociti (CD45) ma sono prive dei marcatori classici del lignaggio delle cellule B (ad es. CD19, CD20, CD21, CD22) e delle cellule T (ad es. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), in linea con l'immunofenotipo indifferenziato del PEL. Tuttavia, mostrano un'espressione variabile di marcatori di attivazione quali CD30, CD38, CD54 e HLA-DR. Dal punto di vista genotipico, BC-3 presenta riarrangiamenti clonali dei geni delle immunoglobuline indicativi dell'origine da cellule B, ma è priva di riarrangiamenti dell'oncogene c-myc. È importante sottolineare che le analisi Southern blot e PCR hanno confermato la presenza di un genoma KSHV intatto di circa 170 kb, mentre la microscopia elettronica ha dimostrato la presenza di capisidi simili a quelli dell'herpesvirus, convalidando la linea come fonte produttiva di particelle infettive di KSHV.

BC-3 è inclusa nel pannello LL-100 di linee cellulari di leucemia e linfoma e si raggruppa distintamente con altri modelli di PEL nelle analisi trascrittomiche. Mostra l'espressione di geni caratteristici della PEL come PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 e membri della famiglia S100A. Questi marcatori riflettono un fenotipo delle cellule B post-centro germinale e sottolineano l'utilità di BC-3 come modello biologicamente rilevante per lo studio della patogenesi del KSHV, della biologia del PEL e delle strategie terapeutiche mirate alle neoplasie associate al KSHV.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia