BC-3

Celična linija BC-3 je model primarnega efuzijskega limfoma (PEL) pri človeku, pridobljen iz plevralnega izliva pri pacientu, ki ni okužen z virusom HIV. Predstavlja redek podtip B-celičnega ne-Hodgkinovega limfoma, ki se običajno kaže kot limfomatični izlivi v telesnih votlinah, kot so poprsnica, srčna ovojnica ali trebušna ovojnica, pogosto brez zaznavnih trdnih tumorskih mas. BC-3 se odlikuje po izključni okužbi s herpesvirusom, povezanim s Kaposijevim sarkomom (KSHV ali HHV-8), in popolni odsotnosti virusa Epstein-Barr (EBV), kar ga loči od večine drugih celičnih linij PEL, ki so običajno dvojno okužene.

Imunofenotipsko celice BC-3 izražajo skupni antigen levkocitov (CD45), vendar nimajo klasičnih markerjev linije B-celic (npr. CD19, CD20, CD21, CD22) in T-celic (npr. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), kar je skladno z nediferenciranim imunofenotipom PEL. Vendar pa kažejo spremenljivo izražanje markerjev aktivacije, kot so CD30, CD38, CD54 in HLA-DR. Genotipsko BC-3 kaže klonske preureditve genov imunoglobulina, ki kažejo na izvor iz B-celic, vendar nima preureditev onkogena c-myc. Pomembno je, da so analize Southern blot in PCR potrdile prisotnost nepoškodovanega ~170 kb genoma KSHV, elektronska mikroskopija pa je pokazala kapside, podobne herpesvirusom, kar potrjuje linijo kot produktivni vir infekcioznih delcev KSHV.

BC-3 je vključen v panel LL-100 celičnih linij levkemije in limfoma ter se v transkriptomskih analizah jasno združuje z drugimi modeli PEL. Kaže izražanje genov, značilnih za PEL, kot so PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 in člani družine S100A. Ti markerji odražajo fenotip B-celic po germinalnem centru in poudarjajo uporabnost BC-3 kot biološko relevantnega modela za preučevanje patogeneze KSHV, biologije PEL in terapevtskih strategij, usmerjenih v malignosti, povezane s KSHV.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo