BC-3

BC-3-solulinja on ihmisen primaarisen effuusio-lymfooman (PEL) malli, joka on peräisin HIV-negatiivisen potilaan keuhkopussinesteestä. Se edustaa harvinaista B-solujen non-Hodgkin-lymfooman alatyyppiä, joka ilmenee tyypillisesti lymfomaattisina nesteen kertymisinä kehon onteloissa, kuten keuhkopussissa, sydänpussissa tai vatsakalvossa, usein ilman havaittavia kiinteitä kasvainmassoja. BC-3 erottuu siitä, että se on tartunnan saanut yksinomaan Kaposin sarkoomaan liittyvällä herpesviruksella (KSHV tai HHV-8) ja että siinä ei esiinny lainkaan Epstein-Barr-virusta (EBV). Tämä ominaisuus erottaa sen useimmista muista PEL-solulinjoista, jotka ovat tyypillisesti kaksoistartunnan saaneita.

Immunofenotyyppisesti BC-3-solut ilmentävät leukosyyttien yhteistä antigeeniä (CD45), mutta niiltä puuttuvat klassiset B-solujen (esim. CD19, CD20, CD21, CD22) ja T-solujen (esim. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8) linjamerkit, mikä on yhdenmukaista PEL:n erilaistumattoman immunofenotyypin kanssa. Niissä esiintyy kuitenkin vaihtelevaa aktivaatiomarkkerien, kuten CD30:n, CD38:n, CD54:n ja HLA-DR:n, ilmentymistä. Genotyyppisesti BC-3:ssa esiintyy klonaalisia immunoglobuliinigeenien uudelleenjärjestelyjä, jotka viittaavat B-soluperäisyyteen, mutta c-myc-onkogeenin uudelleenjärjestelyjä ei esiinny. Merkittävää on, että Southern-blot- ja PCR-analyysit vahvistivat ehjän ~170 kb:n KSHV-genomin läsnäolon, ja elektronimikroskopia osoitti herpesviruksen kaltaisia kapsideja, mikä vahvisti linjan olevan tuottava tarttuvien KSHV-partikkelien lähde.

BC-3 sisältyy LL-100-paneeliin, joka koostuu leukemia- ja lymfoomasolulinjoista, ja se ryhmittyy transkriptomianalyyseissä selvästi muiden PEL-mallien kanssa. Se ilmentää PEL:lle tyypillisiä geenejä, kuten PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 ja S100A-perheen jäseniä. Nämä merkkiaineet heijastavat germinaalikeskuksen jälkeistä B-solufenotyyppiä ja korostavat BC-3:n hyödyllisyyttä biologisesti merkittävänä mallina KSHV:n patogeneesin, PEL:n biologian ja KSHV:hen liittyvien pahanlaatuisten kasvainten hoitostrategioiden tutkimuksessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa