BC-3

A BC-3 sejtvonal egy humán primer effúziós limfóma (PEL) modell, amelyet egy HIV-negatív beteg pleurális folyadékgyüleméből nyertek. Ez a B-sejtes non-Hodgkin-limfóma egy ritka altípusát képviseli, amely jellemzően limfomatózus folyadékgyülemek formájában jelentkezik a testüregekben – például a pleurában, a perikardiumban vagy a peritoneumban –, gyakran kimutatható szilárd daganattömeg hiányában. A BC-3-at a Kaposi-szarkómával társult herpeszvírus (KSHV vagy HHV-8) kizárólagos fertőzése és az Epstein-Barr-vírus (EBV) teljes hiánya különbözteti meg, ami megkülönbözteti a legtöbb más PEL sejtvonalaktól, amelyek jellemzően kettős fertőzöttséget mutatnak.

Immunfenotípusilag a BC-3 sejtek expresszálják a leukocita közös antigént (CD45), de hiányoznak belőlük a klasszikus B-sejt (pl. CD19, CD20, CD21, CD22) és T-sejt (pl. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8) vonaljelzők, ami összhangban áll a PEL differenciálatlan immunfenotípusával. Ugyanakkor változó mértékben expresszálnak aktivációs markereket, mint például a CD30, CD38, CD54 és a HLA-DR. Genotipikusan a BC-3 klonális immunglobulin-génátrendeződéseket mutat, amelyek B-sejt eredetre utalnak, de hiányoznak belőle a c-myc onkogén átrendeződései. Fontos, hogy a Southern-blot és a PCR-elemzések megerősítették egy ép, ~170 kb-os KSHV-genom jelenlétét, az elektronmikroszkópos vizsgálat pedig herpeszvírus-szerű kapszidokat mutatott ki, igazolva, hogy a vonal fertőző KSHV-részecskék termelő forrása.

A BC-3 szerepel az LL-100 leukémia- és limfóma-sejtvonalak paneljében, és transzkriptomikai elemzésekben egyértelműen más PEL-modellekkel csoportosul. Olyan PEL-jellegzetes gének expresszióját mutatja, mint a PRDM1/BLIMP1, az IL-10, a SLAMF7 és az S100A család tagjai. Ezek a markerek a germinális centrum utáni B-sejt fenotípust tükrözik, és aláhúzzák a BC-3 hasznosságát, mint biológiailag releváns modell a KSHV patogenezisének, a PEL biológiájának és a KSHV-hez kapcsolódó rosszindulatú daganatokra irányuló terápiás stratégiák tanulmányozásában.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban