Prejsť na obsah
BC-3
Tkanivo
Pleurálny výpotok
Choroba
Primárny efúzny lymfóm
Synonymá
BC3

Dokumenty

BC-3

Cell line · Číslo výrobku 305748

Bunka BC-3 je model primárneho efúzneho lymfómu (PEL) pochádzajúci z pleurálneho výpotku pacienta bez HIV. Ide o zriedkavý podtyp...

€700.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka BC-3 je model primárneho efúzneho lymfómu (PEL) odvodený z pleurálneho výpotku pacienta bez HIV. Ide o zriedkavý podtyp B-buniek non-Hodgkinovho lymfómu, ktorý sa typicky prejavuje lymfomatóznymi výpotkami v telesných dutinách, ako sú pleura, perikard alebo peritoneum, často bez zistiteľných solídnych nádorových ložísk. BC-3 sa vyznačuje výlučnou infekciou herpesvírusom asociovaným s Kaposiho sarkómom (KSHV alebo HHV-8) a úplnou absenciou vírusu Epstein-Barrového (EBV), čo je vlastnosť, ktorá ho odlišuje od väčšiny ostatných bunkových línií PEL, ktoré sú typicky dvojito infikované.

Z hľadiska imunofenotypu bunky BC-3 exprimujú spoločný antigén leukocytov (CD45), ale chýbajú im klasické markery línie B-buniek (napr. CD19, CD20, CD21, CD22) a T-buniek (napr. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), čo je v súlade s nediferencovaným imunofenotypom PEL. Vykazujú však variabilnú expresiu aktivačných markerov, ako sú CD30, CD38, CD54 a HLA-DR. Genotypicky vykazuje BC-3 klonálne prestavby génov imunoglobulínov, čo svedčí o pôvode z B-buniek, chýbajú mu však prestavby onkogénu c-myc. Dôležité je, že analýzy Southern blot a PCR potvrdili prítomnosť intaktného genómu KSHV s veľkosťou ~170 kb a elektrónová mikroskopia preukázala kapsidy podobné herpesvírusom, čím sa potvrdilo, že táto línia je produktívnym zdrojom infekčných častíc KSHV.

BC-3 je zaradený do panelu LL-100 bunkových línií leukémie a lymfómu a v transkriptomických analýzach sa zreteľne zoskupuje s inými modelmi PEL. Vykazuje expresiu génov charakteristických pre PEL, ako sú PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 a členovia rodiny S100A. Tieto markery odrážajú fenotyp B-buniek po germinálnom centre a podčiarkujú užitočnosť BC-3 ako biologicky relevantného modelu na štúdium patogenézy KSHV, biológie PEL a terapeutických stratégií zameraných na malignity asociované s KSHV.

Tkanivo
Pleurálny výpotok
Choroba
Primárny efúzny lymfóm
Aplikácie
Imunológia
Synonymá
  • BC3

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblast
Doba zdvojnásobenia
cca 50–60 hodín

04Identifikátory

Citácia
BC-3 (katalógové číslo Cytion 305748)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1080

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
CD30+; CD38+; CD45+; CD54+; CD71+; HLA-DR+; EMA+ (epiteliálny membránový antigén); CD2–; CD3–; CD4–; CD5–, CD8–; CD19–; CD20–; CD21–; CD22–
Mutčný profil
Mutácia: Delécia génu CDKN2A, homozygotná

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 20 % FBS
Disociačné činidlo
Žiadne
Hustota výsevu
2,5 až 10 × 10⁵ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 5 % DMSO na zabezpečenie dostatočnej životaschopnosti po rozmrazení, alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie kryoindukovaného stresu.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
85 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský